成体型造血の多分化能獲得のための血管内皮細胞の機能解析

血管内皮细胞在成人造血中获得多能性的功能分析

• 批准号: 17790652
• 负责人: 坂本 比呂志
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790652/
• 关键词: c-myb; リンパ球; T細胞; B細胞; 生体型造血; 赤血球

c-mybは成体型造血の発生に必須であり、その遺伝子破壊マウスは成体型造血の不全による貧血で胎生15日前後に致死となる。そこで、このc-Mybの詳細な機能解析を行うためにES細胞のin vitro分化系とテトラサイクリン(Tet)による遺伝子発現系を組み合わせて研究を推進した。c-myb遺伝子破壊ES細胞(c-myb-KO/ES)の血管内皮細胞から成体型造血は全く観察されなかった。そこで、c-myb-KO/ESからc-myb遺伝子発現誘導をテトラサイクリン(Tet)制御下で行えるES細胞(c-myb-Tet/KO)を樹立した。血管内皮細胞以降にc-myb遺伝子発現誘導を行うことにより成体型の血液細胞発生が回復したが、野生型と比較してその成体型血液細胞は巨核球および未成熟な赤芽球の増加となった。本年度はリンパ球系への影響を検討した。OP9ストローマ細胞上では、血管内皮細胞からのB細胞分化が起こるが、細胞delta-ligand 1を強制発現させたOP9ストローマ細胞(OP9-DL1細)では、T細胞の分化が起こる。そこで、このT細胞ならびにB細胞への分化の影響を検討した。血管内皮細胞からのB細胞分化はc-mybの発現調節によって回復できなかった。このB細胞分化の間、IL7Rα鎖陽性の細胞は観察されていない。しかし、T細胞分化においてDN2の細胞集団に分化が停止しており、DPへの分化は観察されていない。しかし、若干のCD8陽性細胞が存在していた。DPの細胞集団が存在していないことから、この集団はT細胞ではないと考えている。このようなc-myb機能をマウス個体で確認することを現在始めている。

C-myb is the most important factor in the development of hematopoiesis. It is the most important factor in the development of hematopoiesis. Detailed functional analysis of ES cells in vitro differentiation system and gene development system was carried out. c-myb gene disrupts ES cells (c-myb-KO/ES) and vascular endothelial cells (VECs). C-myb-KO/ES cells were induced by C-myb-KO/ES cells under control of C-myb-KO/ES cells. Vascular endothelial cells are induced to develop c-myb genes in the form of down-regulated c-myb genes. In contrast, in the form of wild-type c-myb genes, megakaryocytes develop in the form of immature c-myb genes. This year, the impact of global warming was investigated. OP9 cells are cultured in vitro, vascular endothelial cells are cultured in vitro, and B cells are differentiated in vitro. Delta-ligand 1 stress is induced in OP9 cells (OP9-DL1). To investigate the effects of T cell differentiation and B cell differentiation. Vascular endothelial cell differentiation is regulated by c-myb activation. These B cell differentiation and IL-7Rα-positive cells were detected in vitro. T cell differentiation, DN2 cell population differentiation, DP cell differentiation and observation Some CD8 positive cells were found in the cells. DP cell clusters exist, DP cell clusters exist, DP cell clusters exist and DP cell clusters exist. The c-myb function is now confirmed.

项目成果

Over-expression of c-Myb increases the frequency of hemogenic precursors in the endothelial cell population

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2006.00985.x
• 发表时间: 2006-08-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Dai, Guoyou;Sakamoto, Hiroshi;Ogawa, Minetaro
• 通讯作者: Ogawa, Minetaro

Proper levels of c-Myb are discretely defined at distinct steps of hematopoietic cell development

• DOI: 10.1182/blood-2005-09-3846
• 发表时间: 2006-08-01
• 期刊: BLOOD
• 影响因子: 20.3
• 作者: Sakamoto, Hiroshi;Dai, Guoyou;Ogawa, Minetaro
• 通讯作者: Ogawa, Minetaro