胚発生に必須な細胞極性の確立に関わる細胞内輸送機構の解明

阐明参与建立胚胎发育所必需的细胞极性的细胞内运输机制

• 批准号: 07J05064
• 负责人: 鈴木 誠
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Institute for Basic Biology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J05064/
• 关键词: 原腸形成; 神経管閉鎖; 細胞内輸送; 微小管; ツメガエル

大規模な形態形成運動における細胞の振る舞いと、細胞内輸送機構とそれを調節する微小管ネットワークが果たす役割を理解するため、複数のcDNAライブラリーに対してスクリーニングを実施した。アミノ酸配列、ドメイン構造などを基に分類を行うと共に細胞内局在の観察と強制発現系を併せた機能スクリーニングを行い、細胞内輸送、微小管ネットワーク、極性形成への関与が予想される分子を複数同定した。また、既に単離したOpitz syndromeの原因遺伝子のホモログであるxMIDに関しては機能解析を進め、遺伝子発現パターン、微小管結合能、機能阻害による神経管閉鎖不全の誘導といった知見に加え、xMIDが神経上皮細胞における微小管のダイナミクスと細胞形態の変化に関与している可能性を見出した。加えてxMIDのドメイン解析から、N末端側のRINGドメインを欠いた変異型xMIDが微小管ダイナミクスに影響を与えることが明らかになり、xMIDの正常な機能発現にはRINGドメインが必須であることが示唆された。更に、アフリカツメガエルのCentrin2ホモログ(xCETN2)を同定し、原腸形成における中心体ダイナミクスの解析を行った。まずxCETN2のEGFP融合型を作成しツメガエル胚に導入したところ、中心体特異的な局在を示した。更に将来脊索を形成する背側中胚葉細胞におけるEGFP-xCETN2の動態を解析した結果、極性化した中胚葉細胞で特徴的な局在を示すことが明らかになった。これは中心体のダイナミクスが細胞内輸送の極性化と原腸形成過程に関連があることを示唆しており、より詳細な動態解析が望まれる。加えて、原腸形成や神経管閉鎖の過程の単一細胞レベルでの解析に向け、ライブイメージング技術の改良を更に推進した。前年度までに確立したツメガエル神経胚における細胞形態の時間・空間的変化の可視化技術を用いて5次元イメージングを行い、細胞形態の変化を定量化した。これにより前述のxMIDとxCETN2、更にPCP経路やaPKC-PAR複合体の構成因子の機能を定量的に解析する方法の実現化が期待される。

A large number of cellular processes are involved in the regulation of microcellular processes. The molecular structure of acid alignment, molecular structure, molecular classification, molecular identification, molecular identification, In addition, the possibility of functional analysis, gene discovery, microtubule binding energy, functional impairment, induction of renal tubule atresia, and morphological changes in the epithelial cells of the brain was also revealed. Add xMID to the analysis, N terminal side of the RING to the analysis, N terminal side of the analysis, N terminal side of the RING to the analysis, N terminal side of the analysis, N terminal side of the Ring to the analysis, N terminal side of the Ring to the analysis, N terminal side of the analysis, N terminal side of the analysis, In addition, the analysis of centroids in the formation of protogut is carried out. XCETN2 EGFP fusion type is produced in the presence of centrosome. Furthermore, EGFP-xCETN2 was analyzed dynamically in dorsal mesodermal cells after notochord formation. Results showed that the polarization of mesodermal cells was characteristic of the situation. The relationship between centrosome polarization and gut formation is discussed in detail. Further advances in the analysis of cellular processes such as gut formation and vascular atresia have been made. In the past year, the visualization technology of cell morphology in time and space has been established and quantified by using the 5-dimensional technology. Therefore, it is expected to realize the quantitative analysis method of xMID, xCETN2, PCP and aPKC-PAR complex components.

项目成果

Mitf contributes to melanosome distribution and melanophore dendricity

• DOI: 10.1111/j.1755-148x.2007.00420.x
• 发表时间: 2008-02-01
• 期刊: PIGMENT CELL & MELANOMA RESEARCH
• 影响因子: 4.3
• 作者: Kawasaki, Akiha;Kumasaka, Mayuko;Yamamoto, Hiroaki
• 通讯作者: Yamamoto, Hiroaki

Correlation between Shh expression and DNA methylation status of the limb-specific Shh enhancer region during limb regeneration in amphibians.

• DOI: 10.1016/j.ydbio.2007.09.022
• 发表时间: 2007-12
• 期刊: Developmental biology
• 影响因子: 2.7
• 作者: Nayuta Yakushiji;Makoto Suzuki;A. Satoh;T. Sagai;T. Shiroishi;Hisato Kobayashi;H. Sasaki;H. Ide

ツメガエル胚の形態形成を細胞の挙動と細胞内動態から理解する

从细胞行为和细胞内动力学了解非洲爪蟾胚胎的形态发生

• 发表时间: 2009
• 作者: Yakushiji;N.;中野匡規;M. Nakano;鈴木誠
• 通讯作者: 鈴木誠

神経管閉鎖過程におけるxMID1/2と微小管の役割

xMID1/2 和微管在神经管闭合过程中的作用

• 发表时间: 2008
• 作者: Yakushiji;N.;中野匡規;M. Nakano;鈴木誠;中野 匡規;鈴木誠;M. Nakano;鈴木誠;M. Nakano;中野 匡規;鈴木誠
• 通讯作者: 鈴木誠

ツメガエル胚の形態形成を細胞内動態から理解する神-経管閉鎖におけるMIDの機能解析を通して-

从细胞内动力学了解非洲爪蟾胚胎的形态发生 - 通过神经管闭合中 MID 的功能分析 -

• 发表时间: 2008
• 作者: Yakushiji;N.;中野匡規;M. Nakano;鈴木誠;中野 匡規;鈴木誠;M. Nakano;鈴木誠;M. Nakano;中野 匡規;鈴木誠;中野 匡規;鈴木誠;中野 匡規;鈴木誠
• 通讯作者: 鈴木誠