線虫モデルを用いたタウオパチー神経変性機構の解明と治療法の探索

利用线虫模型阐明 tau 蛋白病神经变性机制并寻找治疗方法

• 批准号: 18700349
• 负责人: 宮坂 知宏
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Doshisha University (2007)The University of Tokyo (2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18700349/
• 关键词: タウ; 神経変性疾患; アルツハイマー; 線虫; Gene Chip; RNAi; 認知症; タウオパチー; アルツハイマー病

本年度は前年度に引き続き、RNAi法を用いたタウオパチー神経変性メカニズムの解析をすすめた。はじめにPan-neuron tau-Tg線虫の軌跡異常を指標とした効率よい半定量的スクリーニング法を確立した。この手法を用い、Gene chip解析でリストアップした遺伝子のうち、タウによる異常に伴い発現量の低下する遺伝子群についてスクリーニングした。その結果、再現性高くUncが誘発される遺伝子としてcol-98を同定した。異常タウがこれらの遺伝子発現に影響を与え、神経機能異常を起こしている可能性が考えられる。さらに導入したタウの発現抑制系確立するため、Tau-RNAiプラスミドを構築した。Tau RNAiの結果、タウ発現量の低下と共に、軌跡異常など行動異常の回復が確認された。この解析過程で、Pan-neuron tau Tg線虫数匹でのタウの検出法も確立した。今後はtau-Tg線虫へのRNAiを軸に行動、神経機能、病理変化、生化学的解析を組み合わせてさらに詳細なタウオパチーメカニズムの解明を進める。一方、治療法検索として、既知の化学物質の有用性についても検討した。上記の線虫の軌跡を指標に幾つかの低分子量化合物について効果を確認した結果、一部の色素成分にタウによる神経機能異常を緩和させる効果があることを見出した。現在その類縁化合物、誘導体を中心にさらに薬理解析をすすめてゆく予定である。また、これまでの解析からpan-tau TgではDaf-2 pathwayの亢進によりDaf-16の活性低下を模倣するような遺伝子発現傾向が観察されている。タウとdaf-2シグナルとの影響を調べるため、pan-tau Tgラインとdaf-2 mutant(e1370)との掛け合わせを終えた。

This year, compared with the previous year, the RNAi method was used to analyze the characteristics of the disease. The Pan-neuron tau-Tg trajectory anomaly index is established by semi-quantitative method. This technique is used in Gene chip analysis to detect abnormal changes in gene expression. The results and reproducibility are high. The results are consistent with col-98. The possibility of abnormal nervous system function is examined. The expression inhibition system of the introduced RNA was established and the Tau-RNAi protein was constructed. Tau RNAi results, low detection, abnormal trajectory, abnormal behavior and recovery are confirmed. The analysis process, Pan-neuron tau Tg line number and its detection method are established. In the future, the RNAi axis of tau-Tg line insects will be analyzed in detail, including its action, neurofunction, pathological changes and biochemistry. A prescription, a therapeutic approach, a known chemical substance's usefulness. The results of the above-mentioned study on the trajectory of the insect and the effects of low molecular weight compounds were confirmed, and some of the pigment components were found to be abnormal in the brain function. At present, all kinds of compounds and inducers are in the center of the molecular analysis. The analysis of this protein shows that the pan-tau Tg is not increased in the Daf-2 pathway, but decreased in the activity of Daf-16. The effect of daf-2 mutation on the growth of the mutant is discussed.