Funktionelle Charakterisierung und Analyse des Wirkungsprinzips des vakuolisierenden Cytotoxins von Heliobacter pylori

幽门螺杆菌的细胞毒素（VacA）是一种中性的细菌蛋白毒素，在胃和十二指肠溃疡的实验室中产生一种溃疡。Das VacA- Toxin wird als Vorläufer-Protein von 140 kDa synthetisiert und besteht nach seiner Prozessierung zum reifen Toxin aus 6-12 Untereinheiten von je 87-95 kDa.随后，在本研究期间，我们建立了一个新的实验室，初步研究了H. pylori zu produzieren（Shuttle vector-based Outer Membrane Protein Expression System，SOMPES），利用新技术在大肠杆菌韦尔登中构建毒素突变体。幽门螺旋杆菌。其他韦尔登可用于治疗细胞毒素。根据细胞毒素复合物的分离和生物化学特性，突变体可产生韦尔登，在反应器结合、细胞内转运或结合或细胞内基质的固定（活性中心定义）。最终可以通过这种方法将细胞内的细胞毒素分离并鉴定为韦尔登。

Das vakuolisierende Cytotoxin (VacA) von Helicobacter pylori ist ein neuartiges bakterielles Protein-Toxin, das vermutlich eine Schlüsselrolle bei der Entstehung von Magen- und Zwölffingerdarm-Geschwüren spielt (peptische Ulzerationen). Das VacA- Toxin wird als Vorläufer-Protein von 140 kDa synthetisiert und besteht nach seiner Prozessierung zum reifen Toxin aus 6-12 Untereinheiten von je 87-95 kDa. Nachdem in dem zur Zeit aus- laufenden Projekt eine neuartige Strategie etabliert wurde, um erstmals rekombinantes aktives Cytotoxin in H. pylori zu produzieren (Shuttle vector-based Outer Membrane Protein Expression System, SOMPES), soll diese Technik im neuen Antrag dazu benutzt werden, um gezielte oder zufallsgesteuerte Toxin-Mutanten in H. pylori zu erzeugen. Weiterhin werden von dieser Strategie vereinfachte Verfahren zur Reinigung des Cytotoxins erwartet. Durch die Isolierung und biochemische Charakterisierung solcher Mutanten soll Aufschluß gewonnen werden über funktionelle Domänen des Cytotoxin-Komplexes, die an der Rezeptor-Bindung, dem intrazellulären Transport oder der Bindung oder Umsetzung des intrazellulären Substrates beteiligt sind (Definition des aktiven Zentrums). Eventuell kann mit dieser Strategie auch das intrazelluläre Target des Cytotoxins isoliert und identifiziert werden.