ヒストンH3メチル化酵素Whsc1による転写ネットワーク制御

组蛋白 H3 甲基转移酶 Whsc1 的转录网络调控

• 批准号: 09F09129
• 负责人: 金田 安史
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09F09129/
• 关键词: ヒストン修飾; クロマチン; 転写調節; ES細胞; Whsc1

4p-症候群の原因遺伝子であるヒストンメチル化酵素Whsc1の機能を、心臓形成を支配するホメオドメイン転写因子Nkx2.5とWhsc1の協調した転写制御に焦点を当てて明らかにするために、ES細胞の心筋細胞分化系を試みた。Whsc1を欠損したES細胞はHanging drop法では拍動心筋細胞への分化が抑制されたが、Flk+細胞を抗体を用いてFACSソートし、Op9細胞をフィーダー細胞に用いて、さらにCSAを添加すると、野生型ES細胞と同等に心筋細胞に分化し、単純に心筋細胞への分化が遺伝子欠損により起きる訳でないことが判明した。従って、Whsc1が単純に細胞分化に伴う遺伝子の選別に機能するのではなく、予想したように、何かの調整に機能することが示唆された。また一方で、Whsc1の細胞局在解析では、Whsc1が細胞分裂期に凝集した染色体に局在することを見出した。しかもWhsc1抗体で染色されない染色体が1本存在する。以上の結果は細胞分裂期には転写は一般には不活性化されることから、Whsc1が転写のメモリーに機能することを示唆するとともに、不活性X染色体ではWhsc1が排除されている可能性を示す。今後、細胞周期およびX染色体不活性か、再活性化過程で、Whsc1の細胞局在を追跡する目的で、Whsc1を認識するモノクローナル抗体の作成を試み、細胞染色検定により有効な抗体の絞り込みを行いつつある。

4p-syndrome causative factors: the function of Whsc1, the regulation of cardiac formation, the coordination of Whsc1 and Nkx 2.5, and the regulation of cardiac differentiation in ES cells. Whsc1-deficient ES cells were identified by the Hanging drop assay for inhibition of differentiation of cardiomyocytes, Flk+ cells, antibodies to FACS, Op9 cells, CSA, wild-type ES cells, and the like for inhibition of differentiation of cardiomyocytes, inhibition of differentiation of cardiomyocytes, and initiation of apoptosis of cardiomyocytes. In addition, Whsc1 can be used for cell differentiation and gene selection. The cell division of Whsc1 is analyzed and the chromosome division of Whsc1 is observed. The presence of Whsc1 antibody in the chromosome was detected. The above results show the possibility that the inactive X chromosome may be excluded from the cell division phase when it is inactive. In the future, cell cycle and X chromosome inactivation, reactivation process, Whsc1 cell structure tracking, Whsc1 recognition, antibody production test, cell staining test, antibody detection, etc.

项目成果

The tale of a tail : Histone H2A and the role of its C-terminal tail in chromatin

尾巴的故事：组蛋白 H2A 及其 C 末端尾巴在染色质中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: Ayman Samir Farid;Yoichiro Horii;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;M.M.Rahman;第32回日本分子生物学会
• 通讯作者: 第32回日本分子生物学会