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心筋細胞への経冠動脈的遺伝子導入:SRCa^<2+> ATPASE 遺伝子及び変異ミオシン遺伝子の導入・発現の検討

经冠状动脉基因转移至心肌细胞：SRCa^<2+>ATPASE基因和突变肌球蛋白基因的引入和表达的检查

基本信息

批准号：
08877108
负责人：
青柳昭彦
金额：
$ 1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.左室心筋への直接注入によるin vivo遺伝子導入強力なviral promoterを持つpSV-β galactosidase geneを封入した膜融合リポソーム250μlを家兎の左室心筋内に麻酔・開胸下に27ゲージの注射針を介して注入し、遺伝子導入を行った。1週間後に心臓を摘出し短軸方向の左室心筋切片に対し組織β galactosidase assayを行った。注入部位に一致したβ galactosidase活性、すなわち青染を認めた。2.Dispatchカテーテルによる経皮経冠動脈的遺伝子導入:蛍光マイクロスフェア-による評価麻酔下に家兎の右頚動脈を露出し拡張時外径4mmのDispatchカテーテル(冠動脈壁内薬物注入用のカテーテル)を大動脈弁部まで進め、その薬品注入用ルーメンから0.5mlの蛍光マイクロスフェア-を注入した。左室心筋、肝臓を摘出し組織内の蛍光を測定した。その結果、左室心筋への注入流量は肝臓の19.0倍であった。この値は蛍光マイクロスフェア-を左室内腔に注入した場合の2.3倍であり、本法により準選択的に冠動脈内薬物注入が可能であると判断した。現在pSV-β galactosidase gene注入による導入を行っている。3、心膜腔内への注入、留置によるin vivo遺伝子導入上記の経冠動脈法による遺伝子導入は、効率が低い可能性も予想される。やはり臨床応用を考慮し得る次善の方法として、心膜腔内への注入も検討している。麻酔下に家兎を開胸し、直視下に心膜腔内27ゲージ注射針を介してpSV-β galactosidase geneを封入した膜融合リポソーム250μlを注入し閉胸した。1週間後に上記のごとく組織β galactosidase assayを行ったところ、心外膜側に広範囲にわたるβ galactosidase活性すなわち青染を認め、本方法による遺伝子導入が可能なことを確認した。現在、他のvectorとしてadenovirus vector, AdCa lacZを調整中である。

1. Direct injection of pSV-β galactosidase gene into the left ventricular muscle 250μl injection of pSV-β galactosidase gene into the left ventricular muscle 27 μl injection of pSV-β galactosidase gene into the left ventricular muscle The β galactosidase assay was performed on the left ventricular tendon sections in the short axis direction after 1 weekβ galactosidase activity is consistent at the injection site. 2. Dispatch Category: Transducer of the coronary artery in the cortex: Transducer of the right coronary artery in the lower part of the coronary artery with an outer diameter of 4mm at the time of exposure. Dispatch Category: Transducer of the right coronary artery with an outer diameter of 4mm at the time of exposure. The left ventricular muscle and liver were extracted and the light in the tissues was measured. The results showed that the injection flow rate of the left ventricular muscle was 19.0 times that of the liver. This method can be used to determine the possibility of intracoronary drug injection by 2.3 times in the case of intracoronary drug injection pSV-β galactosidase gene is now injected into the system. 3. Intracardiac injection and retention in vivo gene introduction are described in the coronary artery method. The gene introduction efficiency is low. The second best method for clinical application is to investigate intracardiac injection. Under anesthesia, 27 μl of pSV-β galactosidase gene was injected into the cardiac cavity under direct vision. 1 week later, the β galactosidase assay was recorded on the epicardial side, and the β galactosidase activity was identified. Now, he's vector <$adenovirus vector, AdCa lacZ adjust in.