アミロイドβペプチドの「老化」によるアルツハイマー病原性変化の解析

β淀粉样肽“衰老”导致阿尔茨海默病致病变化分析

• 批准号: 21K06498
• 负责人: 楯 直子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06498/
• 关键词: アルツハイマー病; アミロイドβペプチド; アミノ酸の異性化; D-Asp; 線維形成; 異性化アミノ酸; マルチリガンド受容体RAGE; 老化

加齢に伴い生体内タンパク質を構成するアミノ酸のL-体からD-体への異性化が生じる。アルツハイマー病の病因タンパク質の１つアミロイドβ(Aβ)においても加齢に伴いアスパラギン酸(Asp)のD-体異性化が確認されている。2022年度も引き続きAβ(1-42)においてD-体異性化が確認されている1位、7位、及び23位のAspが異性化したAβの機能特性を解析する研究を継続した。具体的にはD-Asp含有Aβの線維形成促進能（シード能）について解析した。アミロイド線維形成では、既に形成された線維断片が線維核(シード)となって、さらに線維形成を誘導し線維化・凝集が伝播する。野生型Aβ(全アミノ酸L-体)、或いはD-Asp含有Aβより形成した線維を超音波処理することにより断片化して線維形成の核となるシードとし、Aβ単量体に加えた際の線維形成速度をThT-assay法により解析した。その結果、D-Asp23およびD-Asp7,23含有Aβシードは野生型AβシードよりもAβ単量体の線維形成速度を上げ、線維化・凝集を促進することを明らかにした。次に血中で長時間滞留することでAβのD-体異性化が起こることから、生体内で起こるAβのD-体異性化を模した実験系として、Aβの試験管内インキュベーションを行い、その溶液条件に応じて産生するD-Asp含有Aβの分離・解析を行う実験に着手した。試験管内インキュベーション溶液内で産生する各種D-アミノ酸含有異性化Aβをキラルカラムを用いたLC-MS法により、分離する条件検討実験を進めている。各種D-Asp含有Aβを個別に分離できる方法の確立がポイントとなり、個別に分離する条件を決定次第、試験管内Aβインキュベーション溶液の溶液条件に応じて産生した各種D-Asp含有Aβを分離し、得られた各D-Asp含有Aβについて機能特性解析を進めていく方針である。

Add 齢 に with い born in vivo タ ン パ ク qualitative を constitute す る ア ミ ノ acid の L - body か ら D - body へ の subjects が raw じ る. の ア ル ツ ハ イ マ ー disease etiology タ ン パ ク の 1 つ ア ミ ロ イ ド beta (A beta) に お い て も plus 齢 に with い ア ス パ ラ ギ ン acid (Asp) subjects の D - body が confirm さ れ て い る. 2022 も lead き 続 き A beta (1-42) に お い て D - body subjects が confirm さ れ て い る 1, 7, and び 23 subjects の Asp が し た A beta の function characteristic analytical す を る research を 継 続 し た. The specific に に D-Asp contains Aβ -band line-dimension formation promoting energy (シ ド ド energy) に て て て analysis of た た. ア ミ ロ イ ド line d form で は, both に formation さ れ た d が fragment line d nuclear (シ ー ド) と な っ て, さ ら に line form を induced し line dimensions is changed, agglutination が 伝 sowing す る. Wild type A beta (full ア ミ ノ acid L - body), or い は D - Asp contain A beta よ り form し た line D を ultrasound 処 Richard す る こ と に よ り fragment the し て form の D nuclear と な る シ ー ド と し, A beta 単 quantity body に え た interstate の line formation velocity を ThT assay method に よ り parsing し た. そ の results, D - Asp23 お よ び D - Asp7, 23 contains A beta シ ー ド は wild type A beta シ ー ド よ り も A beta 単 quantity body の げ, line on line D forming speed を D · agglutinate を promoting す る こ と を Ming ら か に し た. Time に で stranded for A long time in blood す る こ と で subjects A beta の D - body が up こ る こ と か ら, born in vivo で こ る opposite sex change を module of A beta の D - し た be 験 department と し て, A beta の test tube イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン を い, そ の solution conditions に 応 じ て produce す る D - Asp contain A beta の separation line, parse を う be 験 に to し た. Test tube イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン solution within で produce す る various D - ア ミ ノ subjects acid containing A beta を キ ラ ル カ ラ ム を with い た LC - MS method に よ り, separating す 検 る conditions please be 験 を into め て い る. All kinds of D - Asp contain A beta を individual に separation で き の る method established が ポ イ ン ト と な り separation, individual に す る condition を decision phase, A beta test tube イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン solution の solution conditions に 応 じ て produce し た various D - Asp contain A beta し を separation, and ら れ た each D - Asp contain A beta に つ い て analytical を functional characteristics Enter めて めて く policy である.

项目成果

Aβの産生ならびに凝集を抑制する多価型ペプチドの同定

抑制 Aβ 产生和聚集的多价肽的鉴定

• 发表时间: 2022
• 作者: 佐藤和佳;高橋美帆;村田拓哉;楯 直子;内山陽菜;斉藤貴志;西道隆臣;舟本聡;西川喜代孝
• 通讯作者: 西川喜代孝

タウ微小管結合領域におけるアミノ酸D-体異性化と線維化・凝集体形成の相関関係の解析

tau微管结合区氨基酸D-异构化与原纤维化/聚集体形成的相关性分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 村田拓哉;大塚遥菜;矢萩真菜;国生莉奈;伊藤弦太;楯 直子
• 通讯作者: 楯 直子

Physicochemical characterization of the G51D mutation of α-synuclein that is responsible for its severe cytotoxicity

α-突触核蛋白 G51D 突变的理化特征，该突变导致其严重的细胞毒性

• DOI: 10.1016/j.neulet.2021.136077
• 发表时间: 2021
• 期刊: Neuroscience Letters
• 影响因子: 2.5
• 作者: Murata Takuya;Tochio Naoya;Utsunomiya-Tate Naoko
• 通讯作者: Utsunomiya-Tate Naoko

薬学生の物理化学

药学专业学生物理化学

• 发表时间: 2021
• 作者: 井澤満;河嶋秀和;奥野結衣;中谷純菜;石原慶一;秋葉聡;高田和幸;楯 直子・平嶋 尚英
• 通讯作者: 楯 直子・平嶋 尚英

変異型α-synuclein；30PおよびA53Eの線維形成プロセスの解析

突变体α-突触核蛋白30P和A53E原纤维形成过程分析；

• 发表时间: 2022
• 作者: 村田拓哉;小嶋淳也;吉根直加;小澤雅史;楯 直子
• 通讯作者: 楯 直子