タイトジャンクションの膜タンパク質クローディンの機能解析

点击翻译按钮获取中文摘要

1クローディン2を強制発現させたMDCK I細胞の解析 クローディン2をMDCK I細胞に強制発現させると、細胞シートのタイトジャンクション(TJ)のバリア機能がイオン透過に関して著しく低下する現象を前年度明らかにしたが、本年度はこの系において電子顕微鏡によるTJの形態観察と可溶性トレーサーの透過性測定を詳細に行った。その結果、この実験系におけるイオン透過性に対するTJ機能の低下は、TJ構造の減少や破綻を伴わないことが明らかになった。つまり、少なくともイオンの透過に関しては、発現するクローディンの組合わせがTJのバリア機能を決定しているという非常に興味深い結果を得た。これはクローディンファミリーを同定して以来、私たちが唱えていた仮説を支持するものであり、これらのデータをもって論文を作製して投稿した。2 クローディン欠失マウスの作出 前年度からの続きで、今年度はクローディン1遺伝子欠失をヘテロにもつマウス(独立に2系統)の作出に成功した。ヘテロマウス同士の交配によるノックアウトマウスの作出も進行中であるが、ノックアウトマウスの表現型の詳細な解析は今後の研究課題である。またクローディン1に続いて、ジーンターゲッティング法によりクローディン3遺伝子の欠失をヘテロにもつマウスを1系統樹立した。クローディン1と同様、ノックアウトマウスの作出を試みるために交配を行っており、表現型の解析は今後に持ち越される。