PDZドメインをもつZO-1ファミリーの細胞極性形成と接着制御における役割

具有PDZ结构域的ZO-1家族在细胞极性形成和粘附调节中的作用

• 批准号: 11780510
• 负责人: 伊藤 雅彦
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780510/
• 关键词: タイトジャンクション; クローディン; JAM; ZO-1; PAR-3; PDZドメイン

本年度は、タイトジャンクションの分子構築について新たな知見を得た。これまでタイトジャンクションに存在する膜タンパク質として4回膜貫通型分子であるオクルディン、クローディンが同定されていた。これらの分子を線維芽細胞に発現させた結果ストランド構造が構築されることから、これらがタイトジャンクションストランドの主要な構成因子であることが明らかにされている。一方、新たに同定された膜タンパク質JAMはそれらと異なる構造をとる、イムノグロプリンスーパーファミリーに属する一回膜貫通型分子である。そこで、JAMのタイトジャンクション構造における位置付けおよび機能について解析することを目的として実験を行った。線維芽細胞にJAMを発現させると細胞間の接着部位にJAMは濃縮した。蛍光抗体レベルでは、JAMの染色は線状というよりむしろ面状であり、クローディンを発現させた場合に近いものであった。ついでfreeze fracture法による観察を行ったが、ストランド構造の形成は認められず、その代わり、膜内粒子が存在しないような領域が認められた。JAMに対する抗体で免疫標識して観察すると、これらの領域にJAMが局在していた。この結果は、JAMがlateralに結合し平面上に集合体を形成する性質を持つことを示唆するものである。さらに、JAMと膜裏打ちタンパク質との相互作用について蛍光抗体法による観察とin vitroの結合実験により解析を行った。クローディンの場合同様JAMもZO-1との相互作用が認められたが、クローディンと相互作用しないPAR-3相互作用することが明らかになった。PAR-3は線虫初期発生における非対称分裂に必須な因子として知られる分子あり、今回PAR-3を細胞膜につなぎ止める分子を同定できたことは重要な知見であると考えられる。

This year, we will learn more about the new information we have received. There are some common molecules in the membrane, which is the same as that of the membrane. The molecular line maintenance germ cell was used to observe the results. The results show that the main factors are the main factors that affect the quality of the cells. On the other hand, the new membrane is the same as that of the membrane. The new membrane is the same as that of the JAM membrane. Please tell me that the location of the car is not available. The purpose of the JAM is to determine the cost of the location. In the JAM, you can see that the cells are connected to the JAM cells. Light antibody staining, JAM staining, staining and staining. The freeze fracture method is used to observe the formation of the particles in the film, and the existence of the particles in the film. The immune marker of JAM antibody is in the field of JAM in the field of monitoring. The results showed that JAM lateral combined with the aggregates on the plane to form a sexual anomaly. The JAM membrane was used to detect the interaction between each other. The photoantibody method was used to observe the in vitro and to analyze the interaction. The market contract, JAM, ZO-1, interactions, interactions, interactions and interactions. In the early stage of PAR-3 parasites, it is necessary to know the molecular weight in the early stage of cell division. This time, the molecular weight in the cell membrane of the PAR-3 worm is the same as that in the cell membrane.

项目成果

Tsukita S,et al.: "Structural and signalling molecules come together at tight junctions"Current Opinion in Cell Biology. 11・5. 628-633 (1999)

Tsukita S 等人：“结构分子和信号分子在紧密连接处聚集”细胞生物学最新观点 11・5 (1999)。

Itoh M,et al.: "Direct binding of three tight-junction-associated MAGUKs, ZO-1, ZO-2, and ZO-3 with the COOH termini of Claudins"J Cell Biology. 147・6. 1351-1363 (1999)

Itoh M 等人：“三种紧密连接相关的 MAGUK、ZO-1、ZO-2 和 ZO-3 与 Claudins 的 COOH 末端的直接结合”J Cell Biology 147·6（ 1999）

Itoh M,et al.: "Characterization of ZO-2 as a MAGUK family member associated with tight as well as adherens junction with a binding affinify to *dudin and X cafein"Journal of Biological Chemistry. 274・9. 5981-5986 (1999)

Itoh M 等人：“ZO-2 作为 MAGUK 家族成员的特征，与 *dudin 和 X 咖啡因的结合亲和力相关”Journal of Biological Chemistry 274・9（ 1999）