味覚修飾タンパク質クルクリンの機能発現メカニズムの解明とその応用

味觉修饰蛋白仙茅素功能表达机制的阐明及其应用

• 批准号: 17651126
• 负责人: 加藤 晃一
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17651126/
• 关键词: クルクリン; 味覚修飾; 蛋白質; バイオテクノロジー; 構造生物学

クルクリンは甘味タンパク質であると同時に酸味を甘く感じさせる味覚修飾活性を有するタンパク質であり、相同性の高い2つのサブユニット(クルクリン1およびクルクリン2)からなるヘテロダイマーとして活性を発現する。ヘテロダイマーとクルクリン1ホモダイマーの立体構造を比較した結果、主鎖構造の違いはC末端付近のループのみであり、それ以外の部分のr.m.s.d.は0.54Åと計算され、両者はほぼ同じ立体構造を形成していた。またNMRによる動的構造解析からC末端付近のループが高い運動生を有することが明らかとなった。部位特異的変異を導入した変異型クルクリンを作製しその活性を評価した結果、変異により甘味活性および味覚修飾活性がほぼ消失するアミノ酸残基を見出した。この中にはC末端付近のループを形成する残基が含まれており、このループがクルクリンの活性発現に重要なことが明らかとなった。この他、主に甘味活性のみに影響する残基、あるいは味覚修飾活性のみに影響する残基が存在することが判明した。このうち、甘味活性発現に重要な残基をクルクリンの立体構造上に配置すると、それらの残基は分子上の一つの面に局在しており、この面が甘味活性発現に関与すると予想された。一方、甘味活性は保持しているが味覚修飾活性のみが消失するという活性変化をもたらすアミノ酸残基は甘味活生発現に関与する面には含まれていなかった。すなわち、クルクリンの甘味および味覚修飾活性がそれぞれ異なるファルマコフォアを介して発現することが明らかとなった。活性発現に重要と判明した残基が甘味受容体との相互作用部位に含まれるという制限を加味して、クルクリンと甘味受容体とのドッキングモデルを構築した。以上の活性発現に関する構造情報は、クルクリンの甘味および味覚修飾活性発現メカニズムの解明において重要な知見を与えるものである。

The activity of taste modification is expressed in the following ways: (1) the quality of taste is high,(2) the identity is high, and (3) the activity is high. The results of the comparison of the three-dimensional structure of the main lock structure, the calculation of the r.m.s.d. of the part other than the C-terminal, and the formation of the same three-dimensional structure. The structural analysis of NMR movements-near the C-terminal and high-middle movements-has been carried out. site-specific variation is introduced into the system and the activity is evaluated. As a result, variation is observed in the activity of sweet taste and taste modification. Among them, the residue that forms the nucleus near the C-terminal is contained, and it is clear that this nucleus is important for the development of the activity of the nucleus. The presence of residues affecting the activity of other, main and modified flavors was identified. The residue is important for the development of sweet taste activity. It is expected that the residue will be arranged on the surface of the molecule. The activity of one side and one side of the sweet taste remains unchanged. The taste of the fruit and the taste modification activity of the fruit are different. The activity is important to identify residues that are involved in the interaction of the sweet receptor and the structure of the sweet receptor The structural information related to the above activity development is the important information for the understanding of the activity development.

项目成果

味覚修飾タンパク質クルクリンの構造・機能解析

调味蛋白仙茅素的结构和功能分析

• 发表时间: 2006
• 期刊: バイオサイエンスとインダストリー Vol.64・No.7
• 作者: 石田 秀治;木曽 眞;栗本英治
• 通讯作者: 栗本英治

Structural basis for recognition of the nonclassical MHC molecule HLA-G by the leukocyte Ig-like receptor B2 (LILRB2/LIR2/ILT4/CD85d)

• DOI: 10.1073/pnas.0605228103
• 发表时间: 2006-10-31
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Shiroishi, Mitsunori;Kuroki, Kimiko;Maenaka, Katsumi
• 通讯作者: Maenaka, Katsumi

バイオテクノロジーによる味覚修飾タンパク質クルクリンの産生と甘味料としての応用

生物技术生产矫味蛋白仙茅素及其作为甜味剂的应用

• 发表时间: 2005
• 期刊: 化学と工業 第58巻・第7号
• 作者: 石田 秀治;木曽 眞;栗本英治;Shiroishi M.;栗本 英治
• 通讯作者: 栗本 英治