細胞内Ca^<2+>作用に関する分子薬理学的研究

细胞内Ca^<2+>作用的分子药理学研究

• 批准号: 01480141
• 负责人: 宮本 英七
• 金额: --
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01480141/
• 关键词: カルシウムイオン; カルモデュリン依存性蛋白質燐酸化酵素; 基質蛋白質; P_<400>蛋白質; コフィリン; 小脳培養細胞

ある種のホルモン、神経伝達物質、増殖因子などの細胞刺激因子は、細胞内にcAMP、cGMPの上昇、細胞膜のイノシト-ル燐脂質代謝回転の促進、細胞内へのCa^<2+>動員の増加を惹起することにより、種々の細胞機能発現に関与している。これらの細胞内調節因子は、その作用を発揮するに際しては、すべてではないが、それぞれに固有のプロテインキナ-ゼを活性化し、蛋白質燐酸化反応を介して、その効果を発揮している。私達はCa^<2+>に焦点をしぼり、その作用と作用機構を検索している。カルモデュリンは細胞内Ca^<2+>作用を伝達する重要因子である。カルモデュリンの脳内における作用のいくつかは、新しく見出された高分子量を示すCa^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナ-ゼII(CaMキナ-ゼII)によって伝達されている。私達は本酵素の性質について数年来研究を続けてきた。本研究では、CaMキナ-ゼIIの機能的意義を調べる目的で、基質蛋白質を調べた。1.小脳プルキンエ細胞に局在するP_<400>蛋白質は、イノシト-ル1,4,5トリス燐酸(IP_3)の受容蛋白質であることがわかった。IP_3が細胞貯蔵部位からのCa^<2+>放出をおこすことから、P_<400>蛋白質は小胞体のCa^<2+>放出チャネルである可能性が示唆されている。私達は本蛋白質がCaMキナ-ゼIIの基質として役立つことを明らかにした。(1)精製したP_<400>蛋白質は脳CaMキナ-ゼIIによって燐酸化された。(2)脳膜標本を調製し、脳CaMキナ-ゼIIと反応させると、P_<400>蛋白質の燐酸化を認めた。(3)小脳培養細胞を放射性正燐酸とインキュベイトすると、本蛋白質の燐酸化を認めた。2.in vitroの実験で、調べた範囲の酵素の中で、CaMキナ-ゼIIのみによって燐酸化されるコフィリンは、熱ショックを与えると、細胞核内に移行する。この反応には、本蛋白質の脱燐酸化反応の伴っていることがわかった。上記のいずれの研究もさらに検索を続けている。

These factors are related to the development of cell function, such as the increase of intracellular cAMP and cGMP, the promotion of lipid metabolism in cell membrane, the increase of intracellular Ca^<2+> mobilization. These intracellular regulatory factors play an important role in the development of protein phosphorylation and protein phosphorylation. The focus of the study is on the role of the study. Ca2 + is an important factor in the intracellular Ca^<2+> function. The high molecular weight of Ca^<2+>/Ca^<2+>/Ca ^<2+>/ The properties of this enzyme have been studied for several years. The purpose of this study is to investigate the function of CaM-II and to investigate the regulation of matrix proteins. 1. The <400>protein receptor of IP_3 in small cells is called P_3. Since IP_3 is involved in Ca^&lt;2+&gt; release from cell storage sites, it is possible that P_<400>protein is involved in Ca^&lt;2+&gt; release from small cell bodies. The protein of this gene is CaM-2 and its matrix is CaM-2. (1)Purified P_<400>protein is phosphorylated by CaM_II. (2)P-protein <400>phosphorylation is recognized by protein phosphorylation. (3)Small cell cultures are known for their radioactive orthophosphate and phosphorylation of proteins. 2.in Vitro's implementation, regulation of enzymes, CaM-II phosphorylation, heat transfer, nuclear migration This protein is dephosphorylated by the enzyme. The above is a summary of the results of the study.

项目成果

Yoshiki Saitoh: "Characterization of polyclonal antibodies to brain protein phosphatase 2A and immunohistochemical localization of the enzyme in rat brain" Brain Research. 489. 291-301 (1989)

Yoshiki Saitoh：“脑蛋白磷酸酶 2A 多克隆抗体的表征以及该酶在大鼠脑中的免疫组织化学定位”《大脑研究》。

Hideyuki Yamamoto: "Phosphorylation of P_<400> protein by cyclic AMP-dependent protein kinase and Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase II" Journal of Neurochemistry. 53. 917-923 (1989)

Hideyuki Yamamoto：“环AMP依赖性蛋白激酶和Ca^2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II对P_<400>蛋白的磷酸化”《神经化学杂志》。

Yasutaka Ohta: "Dephosphorylation of cofilin accompanies heat shock-induced nuclear accumulation of cofilin" Journal of Biological Chemistry. 264. 16143-16148 (1989)

Yasutaka Ohta：“cofilin 的去磷酸化伴随热休克诱导的 cofilin 核积累”《生物化学杂志》。