細胞内Ca^<2+>作用に関する分子薬理学的研究

细胞内Ca^<2+>作用的分子药理学研究

• 批准号: 01480141
• 负责人: 宮本 英七
• 金额: --
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01480141/
• 关键词: カルシウムイオン; カルモデュリン依存性蛋白質燐酸化酵素; 基質蛋白質; P_<400>蛋白質; コフィリン; 小脳培養細胞

ある種のホルモン、神経伝達物質、増殖因子などの細胞刺激因子は、細胞内にcAMP、cGMPの上昇、細胞膜のイノシト-ル燐脂質代謝回転の促進、細胞内へのCa^<2+>動員の増加を惹起することにより、種々の細胞機能発現に関与している。これらの細胞内調節因子は、その作用を発揮するに際しては、すべてではないが、それぞれに固有のプロテインキナ-ゼを活性化し、蛋白質燐酸化反応を介して、その効果を発揮している。私達はCa^<2+>に焦点をしぼり、その作用と作用機構を検索している。カルモデュリンは細胞内Ca^<2+>作用を伝達する重要因子である。カルモデュリンの脳内における作用のいくつかは、新しく見出された高分子量を示すCa^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナ-ゼII(CaMキナ-ゼII)によって伝達されている。私達は本酵素の性質について数年来研究を続けてきた。本研究では、CaMキナ-ゼIIの機能的意義を調べる目的で、基質蛋白質を調べた。1.小脳プルキンエ細胞に局在するP_<400>蛋白質は、イノシト-ル1,4,5トリス燐酸(IP_3)の受容蛋白質であることがわかった。IP_3が細胞貯蔵部位からのCa^<2+>放出をおこすことから、P_<400>蛋白質は小胞体のCa^<2+>放出チャネルである可能性が示唆されている。私達は本蛋白質がCaMキナ-ゼIIの基質として役立つことを明らかにした。(1)精製したP_<400>蛋白質は脳CaMキナ-ゼIIによって燐酸化された。(2)脳膜標本を調製し、脳CaMキナ-ゼIIと反応させると、P_<400>蛋白質の燐酸化を認めた。(3)小脳培養細胞を放射性正燐酸とインキュベイトすると、本蛋白質の燐酸化を認めた。2.in vitroの実験で、調べた範囲の酵素の中で、CaMキナ-ゼIIのみによって燐酸化されるコフィリンは、熱ショックを与えると、細胞核内に移行する。この反応には、本蛋白質の脱燐酸化反応の伴っていることがわかった。上記のいずれの研究もさらに検索を続けている。

あるkind of のホルモン, 神経伝达 substance, proliferation factor などのcell stimulating factor は, intracellular にcAMP, cGMP のrise, cell membrane のイノシト- The promotion of lipid metabolism and the mobilization of Ca^<2+> in the cells cause the growth of lipids and the occurrence and development of cell function.これらの intracellular regulatory factor は, その Effect を発 するに间しては, すべてではないが, それぞれにInherent のプロテインキナ-ゼをactivationし, protein acidification reaction をmediated して, そのeffect を発动している.はCa^<2+>に Focus をしぼり、 その Effect と Effect Mechanism を検SO している. The intracellular Ca^<2+> function of カルモデュリンは is an important factor in を伝达する.カルモデュリンの脳内におけるeffectのいくつかは、新しく见出されたHigh molecular weight をshowすCa^<2+> /カルモデュリンdependencyプロテインキナ-ゼII(CaMキナ-ゼII)によって伝达されている. I have been studying the properties of this enzyme for several years. This study is about the significance and purpose of the function of CaMキナ-ゼII and the purpose of the matrix protein. 1. Small ンプルキンエcell structure in するP_<400>protein は, イノシト-ル1,4,5 Toroic acid (IP_3) is a compatible protein. IP_3がCell storage siteからのCa^<2+>releaseをおこすことから、P_<40 0>Protein and small cell bodyのCa^<2+>It is possible to release the protein and it indicates the possibility of release. The original protein of this protein is the CaMキナ-ゼII matrix and the base is the same as the original protein. (1) Purified したP_<400> Protein は脳CaMキナ-ゼII によって琐釐燐された. (2) Modulation of membrane specimens, preparation of membrane specimens, detection of acidification of P_<400> protein. (3) The radioactive orthodioic acid of the cultured cells of the small cell membrane is detected and the protein is oxidized. 2.in vitroの実験で, adjuvant fan囲の中で, CaMキナ-ゼIIのみによThermal acidification of sulfonate, thermal sulfonate and sulfonate, and the migration of sulfonate into the cell nucleus. This protein's dephosphorylation and anti-reaction protein are combined with the same protein. The above is a study of のいずれの.

项目成果

Yoshiki Saitoh: "Characterization of polyclonal antibodies to brain protein phosphatase 2A and immunohistochemical localization of the enzyme in rat brain" Brain Research. 489. 291-301 (1989)

Yoshiki Saitoh：“脑蛋白磷酸酶 2A 多克隆抗体的表征以及该酶在大鼠脑中的免疫组织化学定位”《大脑研究》。

Hideyuki Yamamoto: "Phosphorylation of P_<400> protein by cyclic AMP-dependent protein kinase and Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase II" Journal of Neurochemistry. 53. 917-923 (1989)

Hideyuki Yamamoto：“环AMP依赖性蛋白激酶和Ca^2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II对P_<400>蛋白的磷酸化”《神经化学杂志》。

Yasutaka Ohta: "Dephosphorylation of cofilin accompanies heat shock-induced nuclear accumulation of cofilin" Journal of Biological Chemistry. 264. 16143-16148 (1989)

Yasutaka Ohta：“cofilin 的去磷酸化伴随热休克诱导的 cofilin 核积累”《生物化学杂志》。