脳海馬シナプス伝達長期増強に関する分子生物学的研究

大脑海马突触传递长期增强的分子生物学研究

• 批准号: 06260233
• 负责人: 宮本 英七
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06260233/
• 关键词: 記憶; シナプス伝達長期増強; カルシウム動員; テタヌス刺激; 海馬切片; グルタミン酸受容体; 錐体細胞; CaMキナーゼII

昨年度に引き続き海馬CA1領域におけるLTP誘導とCaMキナーゼII活性化反応を調べた。海馬放線状層(stratum radiatum)のCA1領域入力線維2ヶ所に刺激電極をおき,テタヌス性電気刺激を与えた。この刺激で,LTPが誘導された。対照は,同じ部位を低頻度の同じ強さの電気刺激を与えた。LTP誘導後,CA1錐体細胞部分をパンチアウト(約0.5mg組織量)し,トリトンX-100を含む緩衝液でホモジェナイズし,遠心沈殿後,上清分画についてCaMキナーゼII酵素活性を測定した。1)LTP誘導後,時間的経過で,CaMキナーゼII Ca^<2+>非依存性活性を測定すると,0時間,対照に比較して有意に上昇していた。興味深いことには,Ca^<2+>/CaM依存性活性も,LTP誘導の早い時間的経過の中で,増加していたことである。2)あらかじめ,NMDA受容体拮抗薬であるAP5とインキュベイトした海馬切片を用いると,LTP誘導およびCaMキナーゼII活性化反応が阻害された。また,蛋白質基質であるシナプシンIを用いても同様の結果が得られた。3)生後4日目ラット海馬切片を分離し,切片そのものを培養して,約10日後実験に使用した。このような培養切片においても同様の結果を示した。4)海馬切片をあらかじめ^<32>P-燐酸でラベルしておき,LTPを誘導すると,CaMキナーゼII自己燐酸化反応が確認された。以上の結果は,LTP誘導がNMDA受容体刺激によって惹起され,CaMキナーゼII活性化反応が関与している可能性を強く示唆しているものと結論される。今後,CaMキナーゼII活性化反応に続く基質の燐酸化反応とLTP維持反応との関係およびグルタミン酸受容体刺激,LTP誘導後に,CaMキナーゼIIの遺伝子発現刺激効果への関与について明らかにしていきたいと考えている。

Last year, we introduced the CA1 domain information system (LTP) to guide the II activation and anti-II response. Marine radiation (stratum radiatum) CA1 field input in the field of electrical stimulation, sexual electrical stimulation and electrical stimulation. The LTP stimulates the pain, and it leads the stimulation. After exposure to light, the low temperature of the same site was the same as that of intensive electrical stimulation. After LTP treatment, CA1 cells were partially purified (about 0.5mg content), and 100% 0.5mg solution was used to determine the activity of II enzyme. 1) after the LTP has passed, CaM changes the II Ca ^ & lt;2+> independent activity test, and within 0 time, according to the comparison, you intend to install the device. The flavor is very strong. CA ^ & lt;2+>/CaM is dependent on the activity. LTP guides the morning time to pass the lunch, and add the flavor to the store. 2) the NMDA receptor antagonized the activation of CaM by blocking the activity of II and blocking the activity of II. The protein base was used to obtain the same result. 3) on the 4th day after birth, the puffin slices were separated, and the slices were isolated and used about 10 days later. The results show that the results are the same as the results. 4) Seafood slices, such as ^ & lt;32>P- acid, LTP, CaM, II, acid, acid In the above results, LTP induces NMDA receptor stimulation and induces II activation. The possibility of II activation and response is strongly indicative of instigation of receptor stimulation. In the future, CaM has been activated by II reactivating reactionaries, acidified by reactionaries, maintained by reactionaries, reactionized by LTP, which has been stimulated by the volume of acid. After the LTP has been induced, the CaM has been induced to induce reaction.There is a significant difference in the results of stimulation and response.

项目成果

M.Tsutsui: "Correlation of activation of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase II with catecholamine secretion and tyrosine hydroxylase activation in cultured bovine adrenal medullary cells." Mol.Pharmacol.46. 1041-1047 (1994)

M.Ttsutsui：“培养的牛肾上腺髓质细胞中Ca^2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II的激活与儿茶酚胺分泌和酪氨酸羟化酶激活的相关性。”

S.Goto: "Cellular localization of type II calcium/calmodulin-dependent protein kinase in the rat basal ganglia and intrastriatal grafts derived from the fetal striatal primordia,in comparison with that of Ca^<2+>/calmodulin-regulated protein phosphatase,c

S.Goto：“大鼠基底神经节和源自胎儿纹状体原基的纹状体内移植物中 II 型钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶的细胞定位，与 Ca^2/钙调蛋白调节蛋白磷酸酶的细胞定位相比，c

S.Yano: "Activation of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase II and phosphorylation of intermediate filament proteins by stimulation of glutamate receptors in cultured rat cortical astrocytes" J.Biol.Chem.269. 5428-5439 (1994)

S.Yano：“通过刺激培养的大鼠皮质星形胶质细胞中的谷氨酸受体来激活Ca 2+ /钙调蛋白依赖性蛋白激酶II和中间丝蛋白的磷酸化”J.Biol.Chem.269。