食品の味覚の受容とシグナル伝達に関する分子生物学的解析

食物味觉和信号转导的分子生物学分析

• 批准号: 07456058
• 负责人: 荒井 綜一
• 金额: $ 4.29万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07456058/
• 关键词: Taste; Signal transduction; G protein; Receptor

本研究は、申請者自身が世界で初めて成功した味覚レセプターのクローニング[J.Biol Chem.,.268,12033-12039(1993)]を基盤に、共役するGTP結合タンパク質、エフェクター、第二メッセンジャー、イオンチャンネルの解析を通じ、外来情報の最初のしかも主要な受容部位である味細胞におけるシグナル変換からシナプス電流発生までの細胞内シグナル伝達のプロセスの分子レベルでの解明を目的として実施された。味覚の(主として甘味と苦味)の第二メッセンジャーとしてcAMPとIP3を生成することがすでに知られているが、この際に関与するGタンパク質はGsα、GqαおよびGiBγ分子種であると考えられている。申請者が味細胞に存在するGタンパク質を検索したところ、Gqαタイプの分子種G15-likeをラット舌ライブラリーよりクローン化することができた。このタンパク質の発現は味細胞にも観察されたことから、味覚のシグナル伝達、特にIP3の生成に関与しているものと推定している。またrサブユニットについてもその存在を検討してみたところ、舌に特異的ではないものの、新種の分子種のクローンを得ることができた。得られたクローンを培養細胞(バキュロウィルスを用いたSf9細胞)を用いて発現させ、リガンド(各種味物質)による第二メッセンジャー(cAMPあるいはIP3)の濃度変化の測定を行ったところ、舌由来のクローンを発現させたものにおいて、とくにIP3の濃度について有為な差が観察された。各種味物質のうちでは苦味に対しての反応性が大きく、得られたクローンが苦味のシグナル伝達に関与している可能性が示唆された。

This research is based on the success of the applicant's own world [J.Biol Chem.,.268,12033-12039(1993)]をbase plate, shared service GTP Combined with タンパク性, エフェクター, 二メッセンジャー, イオンチャンネルのanalytic を通じ, outside The first step of the information is to change the current of the main receptor parts of the taste cells.発生までの成シグナル伝达のプロセスのmolecule レベルでの解明をpurpose として実事された.禚の(Main としてsweet and bitter)の二メッセンジャーとしてcAMPとIP3をGeneration することがすでに知られThe molecular species of ているが, この记に关 and するGタンパク性はGsα, GqαおよびGiBγ molecular species であると卡えられている. Applicant's taste cells exist and Gqαタイプのmolecules Kind of G15-like をラットtongue ライブラリーよりクローン化することができた.このタンパク性の発appearsは odor cells にも観看されたことから、 丝覚のシグナル伝达, 特にIP3の成に关 and しているものと presumed している. Tongue Special ではないものの, new species のmolecule species のクローンを got ることができた. Used to obtain Sf9 cultured cells from Sf9いて発成させ、リガンド(various odor substances)による二メッセンジャー(cAMPあるいはIP3)のconcentration change measurement を行ったところ, tongue origin のクローンを発Now it's the same as させたものにおいて, and the とくにIP3のconcentration についてyouweiな difference が観看された. Various taste substances, bitter taste, irritation, irritability, large taste, and good taste.ローンがbitter tasteのシグナル伝达に关 and しているpossibilityがshows instigationされた.

项目成果

I.Matsumoto,et al.: "A putative digestive cysteine proteinase of an insect,Drosophila melanogaster,predominantly expressed in embryonic and larval midgut." Eur.J.Biochem.227. 582-587 (1995)

I.Matsumoto 等人：“一种假定的昆虫果蝇消化半胱氨酸蛋白酶，主要在胚胎和幼虫中肠中表达。”

H.Hosoyama et al.: "Introduction of a chimeric gene encoding an oryzacystain-β-glucuronidase fusion protein into rice protoplasts and regeneration of transformed plants." Plant Cell Rep.15. 174-177 (1995)

H.Hosoyama 等人：“将编码谷胱甘肽-β-葡萄糖醛酸酶融合蛋白的嵌合基因引入水稻原生质体并再生转化植物。”174-177（1995）。

M.Kuroda et al.: "Oryzacystatins exhibit growth-inhibitory and lethal effects on differnt species of bean insect pests,Callosobruchus chinesis(Coleoptera)and Riptortus clavatus(Hemiptera)." Biosci.Biotech.Biochem.60. 209-212 (1996)

M.Kuroda 等人：“Oryzacystatins 对不同种类的豆类害虫、Callosbruchus chinesis（鞘翅目）和 Riptortus clavatus（半翅目）表现出生长抑制和致死作用。”

T.Asakura et al.: "Rice aspartic proteinase,oryzasin,expressed during seed ripening and germination,has a gene organization distinct from those of animal and microbial aspartic proteinases." Eur.J.Biochem.232. 77-83 (1995)

T.Asakura 等人：“水稻天冬氨酸蛋白酶，oryzasin，在种子成熟和发芽过程中表达，具有与动物和微生物天冬氨酸蛋白酶不同的基因组织。”

Y.Michigami et al.: "Significance of the C-terminal domain of Erwinia uredovoraice nucleation-active protein(lnaU)." J.Biochem.118. 1279-1284 (1995)

Y.Michigami 等人：“欧文氏菌 uredovoraice 成核活性蛋白 (lnaU) C 末端结构域的意义。”