血管内皮由来の平滑筋収縮物質および弛緩物質の作用機作に関する研究ー細胞内Ca量および情報伝達系への作用ー

血管内皮来源的平滑肌收缩和舒张物质的作用机制研究 - 对细胞内Ca含量和信息传导系统的影响 -

• 批准号: 03268208
• 负责人: 唐木 英明
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03268208/
• 关键词: EDRF; 血管内皮細胞; エンドセリン; 細胞内Ca^<2+>量

血管内皮細胞からは内皮依存性弛緩物質(EDRF)、内皮依存性収縮物質(EDCF)、内皮依存性過分極物質(EDHF)およびプロスタサイクリン(PGI_2)などが産生され、血管の機能調節に重要な働きをしていると考えられている。特に、近年発見させたEDCFの一つであるエンドセリンは血管平滑筋を収縮させるだけでなく、内皮細胞にも作用してEDRFを放出させることが知られており、これらの相互作用の生理的意義についても多くの注目を集めている。そこで、本研究ではカルバコ-ルやエンドセリンなどのEDRFを産生させる作動薬を用いて、血管内皮細胞からのEDRF遊離機構における細胞内遊離Ca^<2+>([Ca^<2+>]_i)の役割を明らかにするため、血管内皮細胞あるいは平滑筋細胞の[Ca^<2+>]_i変化と平滑筋収縮の変化をCa^<2+>蛍光指示薬fura‐2を用いて経時的に同時測定した。カルバコ-ル、ヒスタミン、エンドセリン1および3はいずれも内皮細胞の[Ca^<2+>]_iを増加させるが、カルバコ-ルとヒスタミンは[Ca^<2+>]_iの増加が持続するのに対して、エンドセリンによる[Ca^<2+>]_iの増加は一過性であった。この内皮細胞の[Ca^<2+>]_i動態はノルエピネフリン収縮に対する内皮依存性の弛緩作用とよく対応し、カルバコ-ルおよびヒスタミンは持続的な収縮抑制を生じるが、エンドセリンによる収縮抑制作用は一過性であった。さらに外液のCa^<2+>を除去した実験系から、これらの内皮細胞の[Ca^<2+>]_iの増加は小胞体からのCa^<2+>遊離と外液からのCa^<2+>流入によることが明かとなった。さらにCa^<2+>チャンネル阻害薬であるベラパミルは内皮細胞の[Ca^<2+>]_iの増加にほとんど影響しなかったことから外液からのCa^<2+>流入は電位依存性Ca^<2+>チャネルを介していないことが示唆された。N^Gモノメチル‐L‐アルギニン(LNMMA)はL‐アルギニンからのNO産生を阻害することが知られているが、カルバコ-ル、エンドセリン1および3による内皮依存性弛緩作用に対して内皮細胞の[Ca^<2+>]_iの増加には影響せずに抑制した。以上のことから内皮細胞からのEDRF遊離には内皮細胞の[Ca^<2+>]_iの増加が必要であり、この[Ca^<2+>]_iは小胞体からのCa^<2+>遊離と電位依存性Ca^<2+>チャネル以外のCa^<2+>流入経路を介した外液からのCa^<2+>流入に依存していることが明らかにされた。また、EDRFの本体であると考えられているNOの合成系を阻害するアルギニンの誘導体 LNMMAは、作動薬による内皮細胞の[Ca^<2+>]_iの増加には影響せずに、直接NOの合成系を抑制することにより内皮依存性の平滑筋収縮抑制を阻害することが示唆された。

Vascular endothelial cell か ら は endothelial dependency atony substance (EDRF), endothelial dependence 収 shrinkage (EDCF), endothelial dependence excessively material (EDHF) お よ び プ ロ ス タ サ イ ク リ ン (PGI_2) な ど が produce さ れ, blood vessels, の functional regulation に important な 働 き を し て い る と exam え ら れ て い る. に, in recent years, see 発 さ せ た EDCF の a つ で あ る エ ン ド セ リ ン は vascular smooth muscle を 収 shrinkage さ せ る だ け で な く, endothelial cells, に も role し て EDRF を release さ せ る こ と が know ら れ て お り, こ れ ら の interaction の physiological significance に つ い て も more く の attention を set め て い る. そ こ で, this study で は カ ル バ コ - ル や エ ン ド セ リ ン な ど の EDRF を produce さ せ る actuation 薬 を with い て, vascular endothelial cells か ら の EDRF free agency に お け る intracellular free Ca ^ 2 + < > ([Ca ^ 2 + < >] _i) cut を の service Ming ら か に す る た め, vascular endothelial cells あ る い は の smooth muscle cells [C A ^ 2 + > <] _i variations change と smooth muscle 収 shrinkage の variations change を Ca ^ 2 + < > 蛍 light indicator 薬 fura ‐ 2 を with い て 経 に when simultaneous determination し た. カ ル バ コ ル, ヒ ス タ ミ ン, エ ン ド セ リ ン 1 お よ び 3 は い ず れ の も endothelial cells [Ca ^ 2 + < >] _i を raised plus さ せ る が, カ ル バ コ - ル と ヒ ス タ ミ ン は [Ca ^ 2 + < >] _i の raised が requirement by holding 続 す る の に し seaborne て, エ ン ド セ リ ン に よ る [Ca ^ 2 + > <] _i の raised は requirement by transient で あ Youdaoplaceholder0. の こ の endothelial cells [Ca ^ 2 + > <] _i dynamic は ノ ル エ ピ ネ フ リ ン 収 shrinkage に す seaborne る endothelial dependency の relaxation effect と よ く 応 seaborne し, カ ル バ コ - ル お よ び ヒ ス タ ミ ン は hold 続 な 収 shrinkage inhibit を raw じ る が, エ ン ド セ リ ン に よ る 収 shrinkage inhibition は transient で あ っ た. さ ら に outside liquid の Ca ^ 2 + < > を remove し た be 験 department か ら, こ れ ら の の endothelial cells [Ca ^ 2 + < >] _i の raised with small cell body は か ら の Ca ^ 2 + < > free と outside liquid か ら の Ca ^ 2 + > < inflows に よ る こ と が Ming か と な っ た. さ ら に Ca ^ 2 + < > チ ャ ン ネ ル resistance against 薬 で あ る ベ ラ パ ミ ル の は endothelial cells [Ca ^ 2 + < >] _i の raised plus に ほ と ん ど influence し な か っ た こ と か ら outside liquid か ら の Ca ^ 2 + < > inflows は potential dependency Ca ^ 2 + < > チ ャ ネ ル を interface し て い な い こ と が in stopping さ れ た. N ^ G モ ノ メ チ ル ‐ ‐ L ア ル ギ ニ ン (LNMMA) は L ‐ ア ル ギ ニ ン か ら の NO produce を resistance against す る こ と が know ら れ て い る が, カ ル バ コ ル, エ ン ド セ リ ン 1 お よ び 3 に よ る endothelial dependency relaxation effect に し seaborne の て endothelial cells [Ca ^ 2 + > <] _i の raised plus に は influence せ ず に inhibit し た. Above の こ と か ら endothelial cells か ら の EDRF free に の は endothelial cells [Ca ^ 2 + > <] _i の raised が necessary requirement by で あ り, こ の [Ca ^ 2 + > <] _i は small cell body か ら の Ca ^ 2 + > < free と potential dependency Ca ^ 2 + > < チ ャ ネ ル outside の Ca ^ 2 + > < inflows 経 road を interface し た outside liquid か ら の Ca ^ <2+> flows into に dependency て る る る とが Ming ら にされた にされた にされた. Youdaoplaceholder0, EDRF <s:1> ontology であると to investigate えられて る るNO <s:1> synthetic を inhibition するア ギニ ギニ ギニ <s:1> <s:1> inducers LNMMA は, actuation 薬 に よ の る endothelial cells [Ca ^ 2 + < >] _i の raised plus に は influence せ ず に, direct NO の GeChengXi を inhibit す る こ と に よ り endothelial dependency の smooth muscle 収 shrinkage inhibit を resistance against す る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

H.Karaki(Ed.)Sperelakis and Kuriyama: "Ca^<2+>‐regulation of vascular smooth msucle and release of endothelium‐derived relaxing factor.In:Ion channels of vascular smooth muscle cells and endothelial cells." Elsevier Science Publishing company (NewYork.),

H.Karaki（编辑）Sperelakis 和 Kuriyama：“血管平滑肌的 Ca^2+ 调节和内皮衍生舒张因子的释放。见：血管平滑肌细胞和内皮细胞的离子通道”。公司（纽约），

K.Sato,H.Ozaki and H.Karaki.: "Differential effects of carbachol on cytosolic calcium levels in vascular smooth muscle" J.Pharmacol.Exp.Ther.255. 114-119 (1990)

K.Sato、H.Ozaki 和 H.Karaki.：“卡巴胆碱对血管平滑肌胞质钙水平的不同影响”J.Pharmacol.Exp.Ther.255。

H.Karaki,S.‐A.Sudjiarwo,M.Hori,Y.Urade,M.Takai and T.Okada.: "Effects of a novel and selective agonist of endothelin B receptor,IRL1620,on vascular dendothelium and smooth muscle." Japan.J.Pharmacol.58. P113 (1992)

H.Karaki、S.-A.Sudjiarwo、M.Hori、Y.Urade、M.Takai 和 T.Okada：“新型选择性内皮素 B 受体激动剂 IRL1620 对血管树皮和平滑肌的影响。 " Japan.J.Pharmacol.58.P113 (1992)

K.Sakata and H.Karaki.: "Phorbol ester‐induced release release of endothelium‐derived relaxing factror" Eur.J.Pharmacol.179. 207-210 (1990)

K.Sakata 和 H.Karaki.：“佛波酯诱导的内皮衍生松弛因子的释放”Eur.J.Pharmacol.179 (1990)。