ES細胞の分化誘導系を用いた造血システム発生・分化機構の解析

利用ES细胞分化诱导系统分析造血系统发育和分化机制

• 批准号: 09250208
• 负责人: 仲野 徹
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09250208/
• 关键词: 胚性幹細胞; 幹細胞; 赤血球; 細胞分化; アポトーシス

造血細胞産生の制御においては、アポトーシスが非常に重要な役割を果たしていることが知られている。マウス胚性幹細胞(ES細胞から血液細胞への分化誘導システム(OP9法)を用いて、赤血球系細胞のアポトーシスについて解析を行った。二次造血において産生される成体型赤血球は、CFU-Eの分化段階においてその生存にエリスロポエチン(EPO)依存性であることが知られているが、一次造血における胚型赤血球については全く研究されていなかった。OP9法を用いて産生した胚型赤血球を用いて、胚型赤血球におけるEPOの役割についての解析を行ったところ、成体型赤血球とは異なり、胚型赤血球の場合は赤血球に分化した後においてもEPO依存性であること、また、その依存性は幼弱な胚型赤血球のみであり、完全に成熟した胚型赤血球では認められないことが明らかになった。BCL-XはBCL-2ファミリーの遺伝子であり、その発現パターンから赤血球のアポトーシスにおいて何らかの機能を有するのではないかと推定されていた。BCL-X遺伝子を破壊したES細胞をOP9法により赤血球へと分化誘導することにより、赤血球系の分化・細胞死におけるBCL-Xの機能解析を行った。その結果、成体型赤血球においても胚型赤血球においても、最終分化段階においてBCL-X遺伝子を破壊された細胞はアポトーシスにより細胞死することがあきらかとなった。また、EPOの除去とBCL-X遺伝子の破壊効果は少なくとも相加的であった。これらの結果から、赤血球系の細胞のアポトーシスの抑制には、初期分化段階においてはEPOが、後期分化段階においてはBCL-Xが機能していることがあきらかとなった。

The regulation of hematopoietic cell production is very important. Embryonic stem cells (ES cells), erythroid cells (erythroid cells) and differentiation induction system (OP9 method) were analyzed. Secondary hematopoiesis is produced in the embryonic erythrocytes. The differentiation stage of CFU-E is developed in the embryonic erythrocytes. EPO dependency is studied in the embryonic erythrocytes. The OP9 method is used to generate embryonic red blood cells, embryonic red blood cells, EPO service analysis, adult red blood cells, embryonic red blood cells, erythroid differentiation, EPO dependence, complete maturation, embryonic red blood cells, etc. BCL-X is a BCL-2 gene that generates and generates red blood cells. BCL-X gene expression in ES cells was analyzed by OP9 method for the induction of erythroid differentiation, erythroid differentiation and cell death. As a result, adult erythrocytes are in the middle of embryonic erythrocytes, and the final differentiation stage is in the middle of BCL-X erythrocytes. To remove EPO from BCL-X, the effect of adding EPO to BCL-X is reduced. As a result, erythroid cell differentiation is inhibited by EPO in the early differentiation stage and BCL-X in the late differentiation stage.

项目成果

J.L.de la Pompa, T.Nakano, et al: "Conservation of the Notch signalling pathway in mammalian neurogenesis." Development. 124. 1139-1148 (1997)

J.L.de la Pompa、T.Nakano 等人：“哺乳动物神经发生中 Notch 信号通路的保守”。

T.Aoki, T.Nakano, et al: "Induction of Bip mRNA upon programmed cell death of differentiated PC12 cells as well as rat sympathetic neurons." J Biochem. 121. 122-127 (1997)

T.Aoki、T.Nakano 等人：“分化的 PC12 细胞以及大鼠交感神经元程序性细胞死亡时 Bip mRNA 的诱导”。

T.Aoki, T.Nakano, et al: "Rat TAFII31 gene is induced upon programmed cell death in differentiated PC12 cells deprived of NGF." BBRC. 234. 230-234 (1997)

T.Aoki、T.Nakano 等人：“在缺乏 NGF 的分化 PC12 细胞中，大鼠 TAFII31 基因在程序性细胞死亡时被诱导。”

T.Yamane, T.Nakano, et al: "Development of osteoclasts from embryonic stem cells through a pathway that is c-Fms,but not c-Kit dependent." Blood. 90. 3516-3573 (1997)

T.Yamane、T.Nakano 等人：“通过 c-Fms 而非 c-Kit 依赖性途径从胚胎干细胞发育破骨细胞。”

T.Era, T.Nakano, et al: "Thrombopoietin enhances proliferation and differentiation of murine yolk sac erythroid progenitors." Blood. 89. 1207-1213 (1997)

T.Era、T.Nakano 等人：“血小板生成素增强小鼠卵黄囊红系祖细胞的增殖和分化。”