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DNAメチル化異常をきたすマウスの作成とその病態解析

DNA甲基化异常小鼠的创建及其病理学分析

基本信息

批准号：
21659101
负责人：
仲野徹
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

PGC7/Stellaはマウス線維芽細胞において、DNAのメチル化を阻害すること、また、PGC7/Stella遺伝子をマウス線維芽細胞に発現させると、DNAメチル化レベルが低下するだけでなく、高率にトランスフォーメーションが生じることも明らかにしている。本研究では、臓器特異的にPGC7/SEellaを発現させることができるトランスジェニックマウスを作成し、それぞれの臓器におけるがん化や変性疾患の発症を解析することを目的とした。まず、肝臓特異的に発現するアルブミンのプロモーター制御下にPGC7/Stella-IRES-EGFP-polyAを組み込んだトランスジェニックマウス、皮膚特異的に発現するケラチン5のプロモーター制御下にPGC7/Stella-IRES-EGFP-polyAを組み込んだトランスジェニックマウスを作製した。それぞれのマウスにおいて複数のラインが得られ、サザンプロットにより、トランスジーンの挿入が確認できた。しかし、全てのマウスにおいて、EGFPの蛍光およびPGC7/Stellaタンパク質の発現は認められなかった。そこで、よりプロモーター活性の強いCAGプロモーターの制御下に、loxP-neo-polyA-loxP-PGC7-IRES-EGFP-polyAを組み込んだトランスジェニックマウスを作製した。得られたトランスジェニックマウスから、胎児線維芽細胞を採取し、Creリコンビナーゼを発現させることにより、PGC7/Stellaの発現を誘導したが、発現は認められなかった。これらの結果は、残念ながら、何らかの理由によりPGC7/Stellaのin vivoでの強制発現が極めて困難であることを示唆している。

PGC7/Stella line dimensional bud cell line The appearance of vitamin B cells and the reduction of DNA content , high-rate にトランスフォーメーションが生じることも明らかにしている. In this study, the device-specific PGC7/SEella was discovered and tested.マウスを成し、それぞれの臓器におけるがん化や変 Sexual Diseases の発 syndromeをANALYSIS することをPurposeとした.まず, Liver-specific に発 appear するアルブミンのプロモーターcontrolled にPGC7/Stel la-IRES-EGFP-polyA み込んだトランスジェニックマウス, skin Skin-specific PGC7/Stella-I RES-EGFP-polyA was produced by RES-EGFP-polyA group.それぞれのマウスにおいて plural のラインが得られ、サザンプロットにより、トランスジーンのINSERT がconfirmationできた.しかし、全てのマウスにおいて、EGFPの蛍光およびPGC7/Stellaタンパク性の発成はcognizeめられなかった. loxP-neo-polyA-l oxP-PGC7-IRES-EGFP-polyAをGroup み込んだトランスジェックマウスを was produced. Get られたトランスジェニックマウスから, fetal line vitreous bud cell をtake し, Creリコンビナーゼを発Now it's out, PGC7/Stella's show is out, it's out, PGC7/Stella's show is out, it's out. PGC7/Stellaのin Vivo's forced appearance is extremely difficult and difficult.