ES細胞のインビト口分化誘導系を用いた赤血球の発生・分化に関する研究

利用ES细胞体外分化诱导系统研究红细胞的发育和分化

• 批准号: 07269208
• 负责人: 仲野 徹
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07269208/
• 关键词: 発生学; 細胞分化; 造血

マウスES細胞をマクロファージコロニー刺激因子を欠損するストロマ細胞株であるOP9と共生培養すると、効率よく骨髄系・Bリンパ系の細胞に分化誘導できるシステムを開発してきた。この方法を用いることにいより、分化誘導10日以後に成体型赤血球(definitive erythrocyte: EryD)が出現することを報告してきたが、本年度の研究により、それ以前に胚型赤血球(primitiveerythrocyte: EryD)がマウス個体発生と非常に類似した時系列をもって発生してくることが明らかとなった。そこで、個体発生において最初に発生してくるEryP発生の性格付けならびにEryDとの細胞系列の異同についての検討をおこなった。EryP数は分化誘導後7日目にピークを抑え、その後急激に減少する。OP9分化誘導系ではエリスロポエチン(EPO)遺伝子の発現が認められないこと、またEPOの添加によりEryPの減少を解除することが可能であったことから、(1)EryPの発生にはEPOが不要であること、しかし、(2)EryPの生存にはEPOが必須であること、が明らかとなった。また、c-kitの阻止抗体であるACK2を分化誘導時に添加したところEryDの出現は完全にブロックされたが、EryPの出現は全く影響をうけなかった。さらに、EryPの前駆細胞の出現とEryDの前駆細胞の出現を限界希釈法を用いて検討したところ、それぞれの前駆細胞は異なった細胞系列に属するとの結論を得た。この結果は古来からの造血発生上の問題に終止符をうつものである。

ES cell line OP9 and symbiotic culture system This method was used to induce the development of embryonic erythrocytes (EryD) after 10 days of differentiation. The difference between the two cell series is discussed. EryP number decreased 7 days after differentiation. OP9 differentiation-inducing lines are not only able to produce EPO but also to eliminate EPO gene production,(1)EryP gene production is not necessary,(2)EryP gene survival is necessary. The presence of EryD and EryP is completely affected by the addition of c-kit to prevent the formation of ACK2. In this paper, we discuss the relationship between the appearance of EryP cells and the appearance of EryD cells, and conclude that EryP cells belong to different cell series. The result of this is that the problem of hematopoiesis has been solved since ancient times.

项目成果

M.Shirozu et al.: "Structure and chromosomal localization of the human stromal cell-derived factor 1(SDF-1)gene" Genomics. 28. 495-500 (1995)

M.Shirozu 等人：“人类基质细胞衍生因子 1 (SDF-1) 基因的结构和染色体定位”基因组学。

T.Nakano et al.: "In vitro development of primitive and definitive erythrocytes from different precursors." Science. (in press).

T.Nakano 等人：“来自不同前体的原始红细胞和定形红细胞的体外发育。”

H.Nishimura et al.: "Developmentally regulated expression of the PD-1 protein on the surface of double negative (CD4^-,CD8^-) thymocytes." Int.Immunol.(in press).

H.Nishimura 等人：“PD-1 蛋白在双阴性 (CD4^-,CD8^-) 胸腺细胞表面的发育调节表达。”

T.Nakamura et al.: "The murine lymphotoxin-b receptor cDNA; isolation by the signal sequence trap and chromosomal mapping." Genomics. 30. 312-319 (1995)

T.Nakamura 等人：“鼠淋巴毒素-b 受体 cDNA；通过信号序列捕获和染色体作图进行分离。”

K.Tasiro et al.: "Signal sequence trap: expression cloning methods for secreted proteins and type 1 membrane proteins." Methods in Molecular Biology,. (in press).

K.Tasiro 等人：“信号序列陷阱：分泌蛋白和 1 型膜蛋白的表达克隆方法。”