転写調節による造血分化制御

通过转录调控控制造血分化

• 批准号: 10181102
• 负责人: 仲野 徹
• 金额: $ 125.5万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10181102/
• 关键词: 血液細胞; 細胞分化; 転写因子; 赤血球; マスト細胞; T細胞; 幹細胞; 造血幹細胞; 骨髄形成; 遺伝子ターゲティング; GATA転写因子; アポトーシス; 白血球; 白血病

マウス胚性幹細胞から血液細胞への分化誘導法と、テトラサイクリンによるコンデイショナル遺伝子発現系を組み合わせて、GATA-2の機能解析をおこなった。その結果、GATA-2は未分化な造血前駆細胞の増殖を亢進させること、また赤血球・巨核球への分化を促進することがあきらかになった。また、GATA-1の機能ドメインを解析するために、GATA-1ノックダウンマウスの致死性をGATA-1遺伝子の発現制御領域制御下に種々のGATA-1変異体を発現するトランスジェニックマウスにより相補する実験をおこなった。その結果、Cフィンガー,Nフィンガーは両方とも個体レベルでのGATA-1機能に必須であることがあきらかになった。mi遺伝子座がコードするbasic-helix-loop-helix leucine zipper型転写因子(MITF)はbasic domainの1アミノ酸の異常では抑制性の機能をもつのに対し、大半のアミノ酸を欠損することであらゆる機能を失った。また、MITFと結合するタンパク質としてzinc finger domainをもつMAZRを単離した。MAZRはマスト細胞で高発現しているプロテアーゼ遺伝子の転写活性をMITFと相乗的に高めていた。また、骨芽細胞分化、破骨細胞分化、骨形成におけるCbfa1の機能およびB細胞分化におけるBach1の機能を明らかにした。AML1の成体における機能を明らかにするため、AML1のコンディショナル・ノックアウトマウスを作製し、T細胞特異的AML1欠損マウスおよびB細胞特異的AML1欠損マウスの解析を行った。T細胞特異的AML1欠損マウスは著しい胸腺低形成を示し、CD4,8陰性(DN)分画内ではCD25陽性CD44陰性(DN3)分画に細胞が蓄積し、それ以降の分化が抑制されていた。また、B細胞特異的AML1欠損マウスにおいてもB細胞の分化障害を認めた。以上のように、種々の血液細胞系列における転写因子の機能を明らかにすることができた。

マ ウ ス embryonic stem cells か ら blood cells へ の differentiation candidated と, テ ト ラ サ イ ク リ ン に よ る コ ン デ イ シ ョ ナ ル posthumous son 伝 発 now is を group み close わ せ て, GATA - 2 の functional analytic を お こ な っ た. そ の results, GATA - 2 は undifferentiated な 駆 before hematopoietic cells の raised colonization を hyperthyroidism さ せ る こ と, ま た red blood cell, giant nuclear ball へ の を promote differentiation す る こ と が あ き ら か に な っ た. ま た の function, GATA - 1 ド メ イ ン を parsing す る た め に, GATA - 1 ノ ッ ク ダ ウ ン マ ウ ス の deadly を GATA - 1 heritage 伝 son の 発 now under the suppression field suppression に kind 々 の GATA - 1 - variant を 発 now す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス に よ り phase fill す る be 験 を お こ な っ た. そ の results, C フ ィ ン ガ ー, N フ ィ ン ガ ー は struck party と も individual レ ベ ル で の GATA - 1 function に must で あ る こ と が あ き ら か に な っ た. mi 伝 subseat がコ ドする ドするbasic-helix-loop-helix leucine zipper type 転 write factor (MITF) 伝 basic Domain の 1 ア ミ ノ acid の abnormal で は inhibitory function of の を も つ の に し, most of the seaborne の ア ミ ノ acid を owe loss す る こ と で あ ら ゆ る function を lost っ た. ま た, MITF と combining す る タ ン パ ク qualitative と し て any zinc finger domain を も つ MAZR を 単 from し た. High cell で MAZR は マ ス ト 発 now し て い る プ ロ テ ア ー ゼ posthumous son 伝 の planning write activity を MITF と phase 乗 に high め て い た. ま た, bone bud differentiation, osteoclast differentiation and bone formation に お け る Cbfa1 の function お よ び B cell differentiation に お け る Bach1 の function を Ming ら か に し た. Function of AML1 の adult に お け る を Ming ら か に す る た め, AML1 の コ ン デ ィ シ ョ ナ ル · ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を AML1 owe of し, T cells specific loss マ ウ ス お よ び B cell specific AML1 owe loss マ ウ ス の parsing line を っ た. T cells specific AML1 owe loss マ ウ ス は the し い thymus low formation を し, CD4, 8 negative (DN) within the painting で は CD25 positive CD44 negative cells (DN3) draw に が accumulation し, そ れ in の が inhibit differentiation さ れ て い た. Youdaoplaceholder0, B-cell-specific AML1 deficiency また ウスにお て て また b-cell <s:1> differentiation disorder を recognition めた. The above <s:1> ように, various 々 <s:1> blood cell series における転 writing factors <s:1> functions を indicate ら にする にする にする とがで た た た.

项目成果

H. Enomoto, M. Enomoto-Iwamoto, Y. Kitamura, T. Kishimoto, T. Komori: "Cbfa1 is a positive regulatory factor in chondrocyte maturation"J. Biol. Chem. (in press). (2000)

H. Enomoto、M. Enomoto-Iwamoto、Y. Kitamura、T. Kishimoto、T. Komori：“Cbfa1 是软骨细胞成熟的正调节因子”J.

K. Maki, K. Mitani, T. Yamagata, Y. Kanda, Y Yazaki, H. Hirai: "Transcriptional inhibition of p53 by the MLL/MEN chimeric protein found in myeloid leukemia"BLOOD. 93. 3216-3224 (1999)

K. Maki、K. Mitani、T. Yamagata、Y. Kanda、Y Yazaki、H. Hirai：“髓系白血病中发现的 MLL/MEN 嵌合蛋白对 p53 的转录抑制”BLOOD。

N. Motoyama,T. Kimura,T. Takahashi,T. Watanabe,T. Nakano: "bcl-x Prevents Apoptotic cell Death of Both Primitive and Definitive Erythrocytes at the End of Maturation"J Exp Med. 189. 1691-1698 (1999)

N.本山，T.

Morii E, (3), Sakuma T, Nomura S, Esko JD, Handa H, Kitamura Y: "Inhibitory effect of MITF encoded by the mutant mi allele on GABP-mediated transcript expression in mouse mast cells"BLOOD. 97. 3032-3039 (2001)

Morii E, (3)、Sakuma T、Nomura S、Esko JD、Handa H、Kitamura Y：“突变 mi 等位基因编码的 MITF 对小鼠肥大细胞中 GABP 介导的转录物表达的抑制作用”BLOOD。

T.Era,Y.Takagi,T.Takahashi,J.C.Bories,T.Nakano: "Characterization of hematopoietic lineage specific gene expression by ES cell in vitro differentiation induction system"Blood. 95. 870-878 (2000)

T.Era，Y.Takagi，T.Takahashi，J.C.Bories，T.Nakano：“ES细胞体外分化诱导系统对造血谱系特异性基因表达的表征”血液。