TGF-Bによる血管壁細胞の増殖調節機構の分子レベルでの解明

从分子水平阐明TGF-B调节血管壁细胞增殖的机制

• 批准号: 09281236
• 负责人: 川畑 正博
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09281236/
• 关键词: TGF-β; 血管; 動脈硬化; Smad; ショウジョウバエ; アポトーシス; 骨形成因子; 内皮細胞

TGF-βは血管平滑筋細胞や内皮細胞の増殖調節を通して動脈硬化の進展に重要な役割を果たしている。TGF-βのこれらの細胞に対する作用を分子レベルで明らかにするために以下の検討を行なった。(1)ショウジョウバエSmad遺伝子のI型レセプターThick veins(Tkv)に結合する蛋白としてDrosophila apoptosis inhibitor-1(DIAP1)を同定した。TGF-βスーパーファミリーの因子はアポトーシスに関与しており、今回の結果はその機構を解明するうえで重要である。(2)TGF-βスーパーファミリーのシグナル伝達因子であるSmadファミリーの新しいメンバーとしてSmad6を同定した。生化学的解析からSmad6はTGF-βレセプターと安定に結合し、TGF-βのシグナルを伝えるSmad2のリン酸化を抑制することを明らかにした。Smad6はさらに、Smad2のSmad4との複合体形成、TGF-βによる転写活性化を抑制した。一方、Smad6はTGF-βスーパーファミリーに属するBMPのシグナル伝達も抑制するとともに、BMPによりその発現が誘導されることが見い出された。したがって、Smad6はBMPのシグナル伝達においてnegative feedbackループを形成していることが明らかとなった。これまで、Smad2とSmad3はそれぞれがSmad4と複合体を形成し、独立にシグナルを伝えると考えられていたが、われわれはSmad2とSmad3がTGF-βに依存して結合することを示し、これらが共同してTGF-βのシグナルを伝える可能性があることを明らかにした。また、Smad2をbaitにしたtwo-hybridスクリーニングから複数のクローンを同定しており、現在その機能の解析を進めている。

TGF-β regulates proliferation of vascular smooth muscle cells and endothelial cells, and plays an important role in the progression of atherosclerosis. The role of TGF-β in cell interaction is discussed in detail below. (1)The type I heavy veins(Tkv) of the Smad protein are identified by Drosophila apoptosis inhibitor-1(DIAP1). TGF-β is the most important factor in the process of transformation. (2)TGF-β gene expression is the same as Smad gene expression. Biochemical analysis of Smad6 and TGF-β protein binding, TGF-β protein binding, Smad2 protein binding, and TGF-β protein binding Smad6, Smad2 and Smad4 complex formation, TGF-β gene activation were inhibited. The expression of TGF-β was detected in the expression of BMP-6. The expression of TGF-β was detected in the expression of BMP-6. Smad6 is a negative feedback loop. Smad2 and Smad 3 are both Smad4 and TGF-β dependent. Smad2 baits two-hybrid structure, multiple structures, and functions

项目成果

Beppu,H., Kawabata,M., Miyazono,K.,et al.: "cDNA cloning and genomic organization of the mouse BMP type II receptor." Biochem.Biophys.Res.Commun.235・3. 499-504 (1997)

Beppu, H.、Kawabata, M.、Miyazono, K. 等：“小鼠 BMP II 型受体的 cDNA 克隆和基因组组织。” Biochem.Biophys.Res.Commun.235・3。 1997）

Takase,M., Imamura,T., Miyazono,K.,et al.: "Induction of Smad6 mRNA by bone morphogenetic proteins." Biochem.Biophys.Res.Commun.(印刷中). (1998)

Takase, M.、Imamura, T.、Miyazono, K. 等人：“骨形态发生蛋白诱导 Smad6 mRNA”。Biochem.Biophys.Res.Commun.（出版中）。

Shimizu,A., Kato,M., Miyazono,K.,et al.: "Identification of receptors and Smad proteins involved in activin signaling in a human epidermal keratinocyte cell line." Genes to Cells. (印刷中). (1998)

Shimizu, A.、Kato, M.、Miyazono, K. 等人：“人表皮角质形成细胞系中参与激活素信号传导的受体和 Smad 蛋白的鉴定”（基因到细胞）。 ）

Imamura T., Takase,M., Miyazono,K.,et al.: "Smad6 inhibits signalling by the TGF-β superfamily." Nature. 389・6651. 622-626 (1997)

Imamura T.、Takase,M.、Miyazono,K. 等：“Smad6 抑制 TGF-β 超家族的信号传导。”Nature 389·6651。

Nakao,A.,Imamura,T.,Miyazono,K.,et al.: "TGF-β receptor-mediated signalling through Smad2, Smad3 and Smad4." EMBO.Journal. 16・17. 5353-5362 (1997)

Nakao, A.、Imamura, T.、Miyazono, K. 等人：“通过 Smad2、Smad3 和 Smad4 介导的 TGF-β 信号传导。”EMBO 16·17（1997）。