CAMP依存性蛋白質リン酸化反応によるカルシウム情報伝達の制御機構

CAMP依赖性蛋白磷酸化反应控制钙信号传递的机制

• 批准号: 01641514
• 负责人: 田中 利男
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01641514/
• 关键词: cAMP; cAMP依存性蛋白質リン酸化酵素; カルモデュリン; カルポニン; カルシウム; Cキナ-ゼ; 平滑筋

cAMPはカルシウムイオンと共に重要な細胞内情報伝達物質であり、広範な細胞機能を調節している。細胞の刺激応答の発現においてcAMP系とカルシウム系は相互に作用しながら、精密な調節をしていると考えられている。しかしながら、これらの相互作用の分子機構については不明であるのが現状である。最近、平滑筋のミオシン軽鎖リン酸化酵素は、cAMP依存性にリン酸化されるとカルシウム-カルモデュリン複合体との親和性が減弱することや、心筋小胞体カルシウム輸送ATPaseの調節蛋白質であるホスホランバンはcAMP依存性蛋白質リン酸化酵素(Aキナ-ゼ)、カルモデュリン依存性蛋白質リン酸化酵素及び、プロテインキナ-ゼC(Cキナ-ゼ)によってリン酸化され、その結果小胞体へのカルシウム輸送が促進されることが報告されている。しかしながら、cAMP系とカルシウム系の相互作用を完全に理解するには至っていない。そこで申請者は、平滑筋及び非筋細胞からカルモデュリン結合蛋白質を調製し、これらの蛋白質のAクナ-ゼ及びCキナ-ゼによるリン酸化反応を検討したところ分子量3.5万のカルポニンがこの2つのキナ-ゼによりリン酸化されることが明らかとなった。カルポニンは、平滑筋や非筋細胞に多量に存在し、トロポミオシンやアクチンとも結合することが明らかにされている。そこで、平滑筋からカルポニンを精製し、2種類のキン-ゼによるリン酸化反応を詳細に検討したところ、Aキナ-ゼよりCキナ-ゼの方がよくリン酸化し少なくとも1モルpi/カルポニン1モルのリン酸化反応が認められた。さらにこれらのリン酸化反応はカルモデュリンによって抑制されてることが判明した。これらの結果は、細胞内のカルシウムイオンにより調節されている平滑筋や非筋細胞のアクトミオシン系がカルポニンを通じてCキナ-ゼによっても調節されていることが明らかになった。

cAMP与钙离子一起是重要的细胞内信号传导剂，并调节广泛的细胞功能。据信，营地系统和钙系统在细胞刺激反应的表达中相互作用并精确调节它们。但是，这些相互作用的分子机制目前尚不清楚。最近，据报道，当平滑肌肌球蛋白轻链磷酸酶以cAMP依赖性的方式磷酸化时，与钙 - 钙统治蛋白复合蛋白的亲和力减少了，并且磷酸磷脂是心肌内质钙的调节蛋白，一种由心肌内质钙的调节蛋白，是由钙化量的phosspase Atpase phospentation Atpase的磷酸化蛋白质依赖性蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质（phosphorationd）的蛋白质蛋白质蛋白（磷酸化蛋白质）蛋白质蛋白（磷酸化蛋白质）蛋白质蛋白（磷酸化蛋白质）蛋白质蛋白质蛋白（磷酸化蛋白质）蛋白质（钙调蛋白依赖性蛋白磷酸化酶和蛋白激酶C（C Quinase），从而促进钙转运到内质网。但是，我们尚未完全了解营地和钙系统之间的相互作用。因此，申请人从平滑肌和非肌肉细胞中制备了钙调蛋白结合蛋白，并通过A-核糖酶和C-激酶研究了这些蛋白质的磷酸化反应，并且揭示了这两种Quinass磷酸化的分子量35,000的Calponins磷酸化。发现钙蛋白在平滑肌和非肌肉细胞中大量存在，并已显示与肌动蛋白和肌动蛋白结合。因此，详细检查了两种类型的激酶，从平滑肌中纯化钙蛋白酶，并通过两种类型的激酶进行磷酸化反应。观察到C激酶磷酸化比激酶更好，并且观察到至少1摩尔的PI/1摩尔钙蛋白。此外，发现这些磷酸化反应被钙调蛋白抑制。这些结果表明，受细胞内钙离子调节的平滑肌和非肌肉细胞肌动球蛋白系统也受C Quinase通过calponin调节。

项目成果

T.Tanaka: "in Advances in second Messenger and phosphoprorein(Cyclic AMP phosphodiesterase form human heart and drug action.)" Eds.S.Strada,H.Hidaka,Raven press, inpress

T.Tanaka：“第二信使和磷酸蛋白的进展（环 AMP 磷酸二酯酶形成人类心脏和药物作用。）” Eds.S.Strada、H.Hidaka、Raven press、inpress

田中利男: "細胞内カルシウム情報伝達機構と薬物作用" 日本臨床. 47. 1740-1745 (1989)

Toshio Tanaka：“细胞内钙信息转导机制和药物作用”日本临床杂志 47. 1740-1745 (1989)。

H.Masuoka: "Effect of amrinone and enoximone on the subclass of cyclic AMP phosphodiesterase from human heart and kidney." J.Cardiovasc.Pharm.

H.Masuoka：“氨力农和依诺昔酮对人类心脏和肾脏的环 AMP 磷酸二酯酶亚类的影响。”

田中利男: "イノシト-ルリン脂質代謝回転と細胞内情報伝達機構" 日本臨床. 47. 2353-2358 (1989)

Toshio Tanaka：“肌醇磷脂周转和细胞内信号转导机制”日本临床杂志 47. 2353-2358 (1989)。

M.Naka: "Regulation of smooth muscle calponin by protein phosphorylation and calmodulin."

M.Naka：“通过蛋白质磷酸化和钙调蛋白调节平滑肌钙调蛋白。”