β蛋白の精製とその分子種のマススペクトロメトリーによる解析

β蛋白的纯化及其分子种类的质谱分析

• 批准号: 06254201
• 负责人: 玉岡 晃
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06254201/
• 关键词: β蛋白; アルツハイマー病; 家族性アルツハイマー病; β蛋白前駆体; アミロイド; マススペクトロメトリー; ELISA

β淡白1-40とβ蛋白1-42/43を識別する断端特異的な抗体を用いたELISAやマススペクトロメトリーにより、孤発性のアルツハイマー病(AD)やβ蛋白前駆体(APP)717のValがIleに変異した家族性アルツハイマー病(familial Alzheimer's disease;FAD)脳のβ蛋白分子種の解析を行なった。FAD脳と孤発性のAD脳とでは、β蛋白の分子種は基本的には同様であったが、FAD脳ではC末端の長いβ蛋白1-42/43の割合が増加していた。このことは、同様なAPPの変異を発現させた培養細胞の上清中のβ蛋白においても確認できた。β蛋白1-42/43はβ蛋白1-40より重合しやすいことより、このことがFADの発症機序に関与している可能性がある。即ち、APP717の変異(Val-Ile)はβ蛋白のC末端のprocessingに影響を及ぼすことによってFADを発症するものと推測できる。孤発性のAD脳においてβ蛋白1-42/43の割合は多様であったが、β蛋白の総量の少ないものではβ蛋白1-42/43の割合が高く、多くなればなるほど、β蛋白1-40の割合が高くなる傾向が認められた。この事実も、β蛋白1-42/43がアミロイド線維形成時の核となり、β蛋白1-40がその周囲に重合し、アミロイド線維が増生していく、という"nucleation-dependent mechanism of the β amyloid deposition"を支持している。一方、び慢性老人斑に富み、脳血管アミロイドを含まないAD小脳より、β蛋白を抽出し、それを上記のELISAにてβ蛋白の分子種を解析した。その結果、び慢性老人斑は主としてβ蛋白1-42/43より構成されることが明らかとなった。

β-white 1-40 and β-protein 1-42/43 are used for ANA antibodies that recognize する end-specific antibodies, and ELISA is used for やマススペク トロメトリーにより, solitary 発性のFamilial AD disease Alzheimer's disease; FAD) analysis of molecular species of beta protein. FAD's unique molecular species, AD's basic properties, and beta protein's molecular species are the same as the basic ones.が, FAD 脳では C-terminal long いβ protein 1-42/43 cleavage and addition していた.このことは、 Same as 様なAPPの変different を発appears させたThe β protein in the supernatant of cultured cells においてもconfirmationできた. β-protein 1-42/43 and β-protein 1-40 are overlapped with each other, and FAD is a disease mechanism sequence and the possibility is the same. That is, it is speculated that the C-terminal processing of APP717's different (Val-Ile) β protein will affect the processing of the disease. Solitary 発性のAD脳においてβprotein 1-42/43の合は多様であったが,βproteinの総quantityの小ないものではβ egg White 1-42/43 is cut and combined, and the number is high and high, and beta protein is 1-40, and the cut and combine is high, and the tendency is high and high.この事実も, β-protein 1-42/43 がアミロイド线dimensional formation time の Kernel となり, β-protein 1-40 がそのweek Nucleation-dependent mechanism of the β amyloid deposition"をsupportしている. On one side, chronic age spots are rich, and blood vessels are small, and beta protein is extracted, and beta protein is extracted and analyzed by ELISA.そのRESULTS, びchronic age spotsは主としてβprotein 1-42/43より constitutes されることが明らかとなった.

项目成果

A.Tamaoka: "APP 717 missense mutation effects the vatic at amyloid protein specie 5(Aβ1-42/43 and Aβ1-40) in familial Alzheimer's disease brain." J.Biol.Chem.269. 32721-32724 (1994)

A.Tamaoka：“APP 717 错义突变影响家族性阿尔茨海默病大脑中淀粉样蛋白 5（Aβ1-42/43 和 Aβ1-40）的 Vatic。”J.Biol.Chem.269（1994）。

玉岡 晃: "アルツハイマー病の分子遺伝学" 臨床医. (発売予定).

Akira Tamaoka：“阿尔茨海默病的分子遗传学”临床医生（预定发布）。

玉岡 晃: "家族性Alzheimer病" 臨床医. 19. 476-479 (1993)

Akira Tamaoka：“家族性阿尔茨海默病”临床医生。19. 476-479 (1993)

A.Tamaoka: "Biochemical evidence for the long-tail form (Aβ1-42/43) of amyloid β plotein as a seed molecule in cevebral deposits of Alzheimer's disease" Biochem.Biophys.Res.Commun.205. 834-842 (1994)

A.Tamaoka：“淀粉样β蛋白的长尾形式（Aβ1-42/43）作为阿尔茨海默病大脑沉积物中种子分子的生化证据”Biochem.Biophys.Res.Commun.205（1994） ）

玉岡 晃: "ミオクローヌスてんかん 最近の進歩" 宮武正(科学評論社), 186 (1994)

Akira Tamaoka：“肌阵挛性癫痫的最新进展” Tadashi Miyatake (Kagaku Hyoronsha)，186 (1994)