造血細胞のチロシンキナーゼを介する情報伝達機構

造血细胞酪氨酸激酶介导的信息传递机制

• 批准号: 06277206
• 负责人: 花園 豊
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06277206/
• 关键词: GM-CSF; エリスロポエチン; インターロイキン(IL)-3; Grb2; Ash; Vav; チロシンキナーゼ; チロシンリン酸化; 細胞内情報伝達機構

我々は、造血因子依存性ヒト白血病細胞株(UT-7等)を用いて、顆粒球前駆細胞に作用する顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)や赤芽球前駆細胞に作用するエリスロポエチン(EPO)のシグナル伝達の研究を続けてきた。本年度の成果は以下の通りである。(1)Grb2/Ash共沈蛋白質pp94の解析-GM-CSF、IL-3、EPO依存性のヒト白血病細胞株UT-7をGM-CSF、IL-3、EPOで刺激すると、Grb2/Ashと複数のチロシンリン酸化蛋白質が共沈する。これらの共沈蛋白質のうち最も強くリン酸化される94kDのチロシンリン酸化蛋白質(pp94)の性状解析を進めた。pp94のチロシンリン酸化は造血細胞の造血因子と関係し、また、GST融合蛋白質を用いたin vitroの沈降実験から、pp94はGrb2/AshのSH2と結合することがわかった。(2)Vavの役割-造血細胞において実際にRasを活性化するguanine nucleotide exchange factor(GEF)として、我々はプロトオンコジーンであるVavに注目した。Vavは、最近になって、Rasを活性化するGEFであると報告された。UT-7からVavを免疫沈降してチロシンリン酸化レベルを調べると、VavはGM-CSF、IL-3、EPOの刺激でチロシンリン酸化される。さらに、GST融合蛋白質を用いたin vitroの沈降実験から、UT-7においてVavがGrb-2/AshのSH3と結合することを明らかにした。造血細胞におけるRasの活性化経路の一つとして、チロシンキナーゼ→Grb2/Ash→Vav→Rasの可能性があり興味深い。

We have been studying the role of EPO in the development of hematopoietic factor-dependent leukemia cell lines (UT-7, etc.), granulocyte promyelocytic cells, and granulocyte promyelocytic cells. The results of this year are as follows: (1) Analysis of Grb2/Ash co-precipitated protein pp94-GM-CSF, IL-3, EPO dependent leukemia cell line UT-7, GM-CSF, IL-3, EPO stimulated, Grb2/Ash co-precipitated protein. The analysis of the properties of 94kD co-precipitated protein (pp94) pp94 protein binding with Grb2/Ash and SH2 in vitro (2)Vav's activation-Ras in hematopoietic cells is a concern for Vav. Vav, Ras, GEF, etc. UT-7, VAV, and GM-CSF stimulate the immune response to VAV. GST-fusion protein is used in vitro protein binding, UT-7 protein binding, Vav-2 protein binding and SH-3 protein binding. Hematopoietic cell activation pathway of Ras is interesting.