インスリン分泌制御におけるPI3キナーゼの役割の解析
インスリン分泌制御におけるPI3キナーゼの役割の解析
批准号:
07671103
负责人:
宮崎 純一
金额:
$1.41万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份:
1995
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1995 至 --
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英文摘要
我々が樹立した膵β細胞体MIN6はグルコースに反応性のインスリン分泌を示す。細胞内シグナル伝達に重要な役割をもつと考えられるphosphatidylinositol 3-kinase(PI-3K)とミオシン軽鎖リン酸化酵素(MLCK)の阻害剤であるwortmanninを用いてMIN6細胞からのインスリン分泌を検討し、その結果に基づきインスリン分泌制御におけるMLCKとPI-3Kの役割を詳細に検討した。まず、MIN6細胞を培養し、2日後にさまざまな濃度(1nM〜10μM)に希釈したwortmannin中で処理し、15mMグルコースの存在下でのインスリン分泌を測定した。インスリン分泌と最も増加させる濃度のwortmanninでMIN6細胞を処理した後、2〜25mMグルコースに反応性のインスリン分泌を測定した。その結果、高い濃度ではインスリン分泌が阻害されるが、低い濃度では逆にグルコース依存性インスリン分泌が顕著に増加することが示された。グルコースによる細胞内Ca^<++>の増加はwortmanninに影響されなかった。wortmannin処理によりPI-3K活性は顕著に低下していた。wortmanninで処理したMIN6細胞を、抗wortmannin抗体で免疫沈降し、western blotにより解析したところ、供沈される蛋白がPI-3KあるいはMLCKと一致した。MIN6細胞をIGF-1で刺激するとインスリン分泌が大きく低下したが、これはwortmanninにより回復した。これらの結果から、MLCKはインスリン分泌に直接関与していること、PI-3Kはβ細胞では分泌したインスリンからのnegative feedbackのシグナルを伝えるのに関与していることが推定された。
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Araki,K.et al.: "Site-specific recombination of a transgene in fertilized eggs by transient expression of Cre recombinase." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.92. 160-164 (1995)
Araki,K.et al.:“通过 Cre 重组酶的瞬时表达,在受精卵中进行转基因的位点特异性重组。”
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Sakai, K. et al.: "Efficient regulation of gene expression by adenovirus-mediated delivery of the Cre recombinase." Biochem. Biophys. Res. Commun.217. 393-401 (1995)
Sakai, K. 等人:“通过腺病毒介导的 Cre 重组酶递送来有效调控基因表达。”
DOI:
--
发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Hagiwara, S. et al.: "An inhibitory role for phosphatidylinositol 3-kinase in insulin secretion from pancreatic b cell line MIN6." Biochem. Biophys. Res. Commun.214. 51-59 (1995)
Hagiwara, S. 等人:“磷脂酰肌醇 3-激酶对胰腺 b 细胞系 MIN6 分泌胰岛素的抑制作用。”
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Katagiri, H. et al.: "A novel isoform of syntaxin-binding protein homologous to yeast Secl expressed ubiquitously in mammalian cells." J. Biol. Chem.270. 4963-4966 (1995)
Katagiri, H. 等人:“一种新的突触融合蛋白结合蛋白亚型,与在哺乳动物细胞中普遍表达的酵母 Secl 同源。”
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Ohgawara, H. et al.: "Assessment of pore size of a semipermiable membrane for immunoisolation on xenoimplantation of pancreativc B cell using a diffusion chamber." Transpal. Proc.27. 3319-3320 (1995)
Ohkawara, H. 等人:“使用扩散室评估用于胰腺 B 细胞异种移植免疫隔离的半透膜的孔径大小。”
DOI:
--
发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
共 6 条
Functional analysis of a novel membrane protein involved in the quality control of insulin in pancreatic beta cells
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批准号:21K06856
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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资助金额:$2.66万
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财政年份:2021
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
バイオマテリアルを利用した幹細胞分化システムの開発
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批准号:06F06227
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.54万
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财政年份:2006
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
ES細胞からのインスリン産生細胞分化誘導法の確立
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批准号:05F05490
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.54万
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财政年份:2005
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
膵ベータ細胞における核内レセプターの機能の研究
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批准号:15659075
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2003
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
発生工学を用いた膵島移植における免疫拒絶反応制御の研究
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批准号:09877197
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.02万
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财政年份:1997
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
I型糖尿病モデルマウスの膵島浸潤Tリンパ球のクローナリティーの解析
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批准号:08671131
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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资助金额:$1.54万
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财政年份:1996
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
マウス発生工学を用いた核内レセプターRXRの機能解析
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批准号:08265202
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.3万
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财政年份:1996
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
マウス発生工学を用いた核内レセプターRXRの機能解析
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批准号:08265202
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.3万
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财政年份:1996
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
トランスジェニックマウスを用いた自己免疫性糖尿病発症機構の解析
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批准号:08282201
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.92万
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财政年份:1996
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
マウス発生工学を用いた核内レセプターRXRの機能解析
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批准号:07273206
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.56万
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财政年份:1995
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
胚幹細胞への欠失変異導入法の開発
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批准号:07260201
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1995
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
トランスジェニックマウスを用いたI型糖尿病発症機構の解析
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批准号:07257201
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.56万
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财政年份:1995
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
グルコース反応性β細胞株MIN6を用いたグルコースセンシング機構の解析
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批准号:06671010
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项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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资助金额:$1.54万
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财政年份:1994
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
マウス発生工学を用いた核内レセプターRXRの機能解析
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批准号:06281215
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.43万
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财政年份:1994
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
トランスジェニックマウスを用いたI型糖尿病発症機構の解析
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批准号:06265209
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.6万
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财政年份:1994
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
胚幹細胞への欠失変異導入法の開発
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批准号:06268204
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.92万
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财政年份:1994
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
胚幹細胞への欠失変異導入法の開発
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批准号:05275204
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.56万
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财政年份:1993
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
MODY型糖尿病のモデルマウス作製による発症機構の解析
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批准号:05253205
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1993
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
MHCトランスジェニックマウスを用いたI型糖尿病発症機構の解析
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批准号:05272210
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.6万
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财政年份:1993
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
発生異常の分子機構のジーントラッピング法による解析
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批准号:04260206
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.6万
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财政年份:1992
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负责人:宮崎 純一
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依托单位:
海外基金