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インスリン分泌制御におけるPI3キナーゼの役割の解析

インスリン分泌制御におけるPI3キナーゼの役割の解析
PI3激酶调节胰岛素分泌的作用分析
批准号:
07671103
负责人:
宮崎 純一
金额:
$1.41万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份:
1995
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1995 至 --

项目摘要

项目成果

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我々が樹立した膵β細胞体MIN6はグルコースに反応性のインスリン分泌を示す。細胞内シグナル伝達に重要な役割をもつと考えられるphosphatidylinositol 3-kinase(PI-3K)とミオシン軽鎖リン酸化酵素(MLCK)の阻害剤であるwortmanninを用いてMIN6細胞からのインスリン分泌を検討し、その結果に基づきインスリン分泌制御におけるMLCKとPI-3Kの役割を詳細に検討した。まず、MIN6細胞を培養し、2日後にさまざまな濃度(1nM〜10μM)に希釈したwortmannin中で処理し、15mMグルコースの存在下でのインスリン分泌を測定した。インスリン分泌と最も増加させる濃度のwortmanninでMIN6細胞を処理した後、2〜25mMグルコースに反応性のインスリン分泌を測定した。その結果、高い濃度ではインスリン分泌が阻害されるが、低い濃度では逆にグルコース依存性インスリン分泌が顕著に増加することが示された。グルコースによる細胞内Ca^<++>の増加はwortmanninに影響されなかった。wortmannin処理によりPI-3K活性は顕著に低下していた。wortmanninで処理したMIN6細胞を、抗wortmannin抗体で免疫沈降し、western blotにより解析したところ、供沈される蛋白がPI-3KあるいはMLCKと一致した。MIN6細胞をIGF-1で刺激するとインスリン分泌が大きく低下したが、これはwortmanninにより回復した。これらの結果から、MLCKはインスリン分泌に直接関与していること、PI-3Kはβ細胞では分泌したインスリンからのnegative feedbackのシグナルを伝えるのに関与していることが推定された。
期刊论文(7)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Araki,K.et al.: "Site-specific recombination of a transgene in fertilized eggs by transient expression of Cre recombinase." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.92. 160-164 (1995)
Araki,K.et al.:“通过 Cre 重组酶的瞬时表达,在受精卵中进行转基因的位点特异性重组。”
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Katagiri, H. et al.: "A novel isoform of syntaxin-binding protein homologous to yeast Secl expressed ubiquitously in mammalian cells." J. Biol. Chem.270. 4963-4966 (1995)
Katagiri, H. 等人:“一种新的突触融合蛋白结合蛋白亚型,与在哺乳动物细胞中普遍表达的酵母 Secl 同源。”
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
6
    Functional analysis of a novel membrane protein involved in the quality control of insulin in pancreatic beta cells
    • 批准号:
      21K06856
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额:
      $2.66万
    • 财政年份:
      2021
    • 负责人:
      宮崎 純一
    • 依托单位:
    バイオマテリアルを利用した幹細胞分化システムの開発
    • 批准号:
      06F06227
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额:
      $1.54万
    • 财政年份:
      2006
    • 负责人:
      宮崎 純一
    • 依托单位:
    ES細胞からのインスリン産生細胞分化誘導法の確立
    • 批准号:
      05F05490
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额:
      $1.54万
    • 财政年份:
      2005
    • 负责人:
      宮崎 純一
    • 依托单位:
    膵ベータ細胞における核内レセプターの機能の研究
    • 批准号:
      15659075
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额:
      $2.11万
    • 财政年份:
      2003
    • 负责人:
      宮崎 純一
    • 依托单位:
    海外基金