部位特異的脱硫酸化による硫酸化多糖の超分子形成機能の変換

通过位点特异性脱硫转化硫酸化多糖的超分子形成功能

• 批准号: 08219228
• 负责人: 原 三郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08219228/
• 关键词: 硫酸化多糖; ヘパリン; 脱硫酸化; 硫酸化; 部位特異性; 超分子形成

シリル化試薬であるN-メチル-N-トリメチルシリルトリフルオロアセトアミド(MTSTFA)を用いることによりグリコサミノグリカンの6位硫酸基を位置特異的にかつ効率よく脱離する反応を前年度までに開発してきた。今年度はこの方法によって得られた6-O-脱硫酸化ヘパリンおよび既知の方法で得られる2-O-脱硫酸ヘパリンとN-脱硫酸化ヘパリンを用い、神経細胞などの成長・分化に重要な役割を果たしているミッドカインがヘパリンと相互作用する際に必要なヘパリン側の構造を明らかにしようとした。その結果、ミッドカインがヘパリンと結合してその活性を発揮し、さらに構造安定化されるには2-O-、6-OおよびN-硫酸基がいずれも必要であるが、とりわけN-硫酸基が大きな役割を果たしていることがわかった。さらに各種の位置特異的な脱硫酸化法や硫酸化法を組み合わせて任意の位置に硫酸基を結合した各種のヘパリン(6-O-脱硫酸化、2-O-脱硫酸化、N-脱硫酸化、2,6-O-脱硫酸化、6-O-,N-脱硫酸化、2-O-,N-脱硫安化、完全脱硫酸化、6-O-硫酸化)を作成し、それらと血漿中および脳細胞内の各種タンパク質との相互作用を明らかにしようとした。ウシ血漿中よりヘパリン結合性の数種のタンパク質を同定し、そのうちハプトグロビンが6-O-,N-硫酸化(2-O-脱硫酸化)ヘパリンと相互作用することを見いだした。これよりこの相互作用には6位およびN位の硫酸基が必要であることがわかった。また、ウシ脳組織のヘパリン結合性タンパク質のうち、フルクトースジリン酸アルドラーゼが6-O-硫酸化(2-O-,N-脱硫酸化)ヘパリンと親和性を示した。これより同酵素とヘパリンの相互作用には6位の硫酸基が関与しているものと考えられた。

The N-terminal-N-terminal-N This year, the method has been developed to obtain 6-O-sulfation and N-sulfation. The method has been used in the growth and differentiation of neurons. The structure of 6-O-sulfation and N-sulfation is necessary. As a result, the activity of 2-O-, 6-O-, and N-sulfate groups is stable, and the N-sulfate group is stable. All kinds of position-specific desulfurization and acidification methods and sulfation methods are combined to form sulfuric acid groups at any position.(6-O-sulfation, 2-O-sulfation, N-sulfation, 2,6-O-sulfation, 6-O-, N-sulfation, 2-O-, N-sulfation, complete sulfation, 6-O-sulfation) are produced, and various kinds of interactions between plasma and intracellular substances are clearly observed. The binding properties of several kinds of compounds in plasma are identical, and the interaction between 6-O-, N-sulfated (2-O-sulfated) and 6-O-, N-sulfated is also discussed. The interaction between the 6-position and the N-position is necessary. 6-O-sulfated (2-O-, N-sulfated) 6-O-sulfated (2-sulfated) 6-O-sulfated (2-O-sulfated) 6-O-sulfated (2 The interaction between isoenzymes and sulfate groups at position 6 is related to the interaction between isoenzymes and sulfate groups.

项目成果

Ryo Takano: "Structure of a Water-soluble Polysaccharide Sulfate from the Red Seaweed Joculator maximus Manza" Botanca Marina. 39. 95-102 (1996)

Ryo Takano：“来自红海藻 Joculator maximus Manza 的水溶性多糖硫酸盐的结构”Botanca Marina。

Ryo Takano: "Sulfation of Polysaccharides with Sulfuric Acid Mediated by Dicyclohexylcarbodiimide" Journal of Carbohydrate Chemistry. 15(4). 449-457 (1996)

Ryo Takano：“二环己基碳二亚胺介导的硫酸多糖的硫酸化”碳水化合物化学杂志。

Norio Kaneda: "Structural Characteristics of Heparin-like Domain Required for Interaction of Midkine with Embryonic Neurons" Biochemical and Biophysical Research Communication. 220. 108-112 (1996)

Norio Kaneda：“中期因子与胚胎神经元相互作用所需的类肝素结构域的结构特征”生物化学和生物物理研究交流。

Yasumasa Matsuda: "Limited Proteolysis by Chymotrypsin of Midkine and Inhibition by Heparin Binding" Biochemical and Biophysical Research Communication. 228. 176-181 (1996)

Yasumasa Matsuda：“胰凝乳蛋白酶对中期因子的有限蛋白水解和肝素结合的抑制”生物化学和生物物理研究通讯。