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部位特異的脱硫酸化による硫酸化多糖の超分子形成機能の変換

通过位点特异性脱硫转化硫酸化多糖的超分子形成功能

基本信息

批准号：
06240233
负责人：
原三郎
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はトリメチルシリル化試薬であるN,O-ビストリメチルシリルアセトアミド(BTSA)が硫酸糖の6位特異的な脱硫酸化に有効であることを見いだしている。今回、BTSAを〈1〉硫酸化多糖の脱硫酸化に用いて構造決定に応用し、〈2〉ヘパリンの脱硫酸化に適用し、本処理による構造変化と超分子形成能の変化を考察した。〈1〉BTSAによる脱硫酸化の硫酸化多糖の構造解明への応用紅藻から得られる多糖は多くの場合→3)β-Gal(1→4)α-Gal(1→の2糖反復単位から構成され、この骨格が硫酸化された構造をとっている。今回、紅藻ハナフノリ(Gloiopeltis complanata)から得られた硫酸化多糖を常法通りメチル化分析した結果とBTSAにより脱硫酸してからメチル化分析した結果とを比較検討した。この結果、6位の硫酸基はBTSAにより特異的に脱離し、多糖中の6位に硫酸基が結合していたことが確証された。このように本脱硫酸化法は硫酸化多糖の構造決定にも有用であることが分かった。〈2〉BTSAによるヘパリンの部位特異的脱硫酸化ヘパリンは血液凝固系においてアンチトロンビンIII(ATIII)と相互作用し、トロンビンに対する阻害活性を増強する。ヘパリンとATIIIとの相互作用にはヘパリン中に特定の硫酸化されたATIII結合部位の存在することが必須である。ヘパリンをBTSAで処理し、処理前後の構造を組成分析、^<13>C-NMR、酸素消化後の2糖分析などにより比較したところ、予期した通り6位の硫酸基のみが脱離し、他のO-硫酸基やN-硫酸基は脱離しなかったが、通常の硫酸化多糖の場合とは異なり、6位の硫酸基の脱離は不完全であった。BTSAによる処理を反復しても、新たな硫酸基の脱離は認められなかったので、BTSA処理により6硫酸基はランダムに脱離するのではなく、特定の位置の6硫酸基のみが脱離するものと考えられた。処理前後のヘパリンのATIIIとのアフィニティークロマトグラフィーおよびヘパリン存在下でのATIIIのトロンビン阻害活性の比較より、BTSA処理により脱離した硫酸基はアンチトロンビンIIIとの結合に関与しないものであり、ATIII結合性の硫酸基には影響がないと示唆された。以上のようにBTSAのヘパリンの脱硫酸化に対する部位特異性を明らかにし、さらに有用な性質を持ったヘパリン誘導体を製造し得る可能性を見いだした。

I'm a 々はトリメチルシリル热斬であるN,O-ビストリメチルシリルアセトアミド(BTSA) The 6-position specific desulfation of sulfated sugar is effective in desulfation. This time, BTSA uses desulfation of sulfated polysaccharides according to を〈1〉 and determines the structure of sulfated polysaccharides, and 〈2〉ヘIt is suitable for desulfation of パリンのDesulfation, and this treatment is also suitable for structural modification and supramolecular formation energy modification. 〈1〉BTSA is a desulfated polysaccharide whose structure is elucidated and a red algae is used to obtain a polysaccharide from red algae. →3) β-Gal (1→4) α-G al(1→の2 sugar repeats the single position of the から composed of され, このbone が sulfated されたstructure をとっている. This time, red algae ハナフノリ(Gloiopeltis complanata)からgets sulfated polysaccharide をNormal method りメチルchemical analysis した results とBTSA により desulfation してからメチル oxidation analysis した results とを compares 検 Discussion した. As a result, the specific detachment of the sulfate group at position 6 of BTSA and the binding of sulfate group at position 6 of the polysaccharide were confirmed. This desulfation method is useful in determining the structure of sulfated polysaccharides. 〈2〉BTSA によるヘパリンの site-specific desulfation Chemical blood coagulation system においてアンチトロンビンIII (ATIII) and interaction し, トロンビンに対する blocking active を Increase strength する. The existence of a specific sulfated ATIII binding site in the ヘパリンとATIII interaction にはヘパリン is necessary. BTSA treatment, composition analysis of structure before and after treatment, ^<13>C-NMR, 2-sugar analysis after acid digestion, comparison of BTSA, 6 people expected to passのSulfate group のみが detachment, other のO-sulfate group やN-sulfate group は detachment しなかったが, normal sulfated polysaccharide のoccasion とはisoなり, 6-position sulfate group のdetachment は incomplete であった. The BTSA treatment is repeated, the new sulfate group is detached and recognized, and the BTSA treatment is done 6 sulfate group はランダムに is separated from the するのではなく, 6 sulfate group is separated from the specific position するものと卡えられた.のヘパリンのATIIIとのアフィニティ before and after treatment Comparison of the inhibitory activity of ATIII in the presence of ークロマトグラフィーおよびヘパリン, BTSA treatment and separation of したThe sulfate group binding properties of the sulfate group はアントロンビンIIIとのに关 and しないものであり, ATIII binding properties of the sulfate group には influence the sulfate group がないとshows the された. The above のようにBTSAのヘパリンのdesulfationに対するsite-specificを明らかにし, It has useful properties, it holds the inducer, and it is possible to make it.