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X線構造解析の手法を用いた脳特異的カルシウム受容タンパク質S100の構造と機能相関

X射线结构分析法研究脑特异性钙受体蛋白S100的结构和功能关系

基本信息

批准号：
08260211
负责人：
井上豪
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08260211/
关键词：
ウシ脳カルシウム結合タンパク質 S100b X線構造解析構造精密化

项目摘要

細胞周期や細胞の種類に特異的なカルシウム信号のメディエーターの1つと考えられているS100タンパク質の生化学的な機能として、1.カルシウム依存的に微小管の解離や集合阻害を助長する。2.微小管結合性蛋白質であるタウ蛋白質のリン酸化をカルシウム依存的に阻害する。3.キナーゼCの主な基質である87kDaの蛋白質のリン酸化も特異的に阻害する。などが知られているが、これら機能を研究する上で3次元立体構造を明らかとすることは必須の条件である。そこで、これら機能とS100蛋白質の3次元立体構造との相関関係を解明する目的で結晶学的研究に取り組み、ウシ脳からカルシウム非結合型のS100蛋白質の精製方法を確立し、カルシウム非依存下または存在下で結晶化を行ったところのカルシウム存在下でX線構造解析に適した結晶が得られ、分子置換法による構造解析に成功した。また、その後の構造精密化を1.7Å分解能という高分解能でほぼ終了し、米国ブルックヘブン研究所のProtein Data Bankに登録手続きを行っているところである。構造解析の結果、カルシウム存在下では、EF-Handドメインが収縮することによって疎水結合領域を露出することによって相手のタンパク質であるタウタンパク質との疎水相互作用を強め、複合体を形成する機構を発見することができた。この機構をより詳細に証明するためには、カルシウムイオン非存在下での構造解析を行う必要があり、現在それに取り組んでいる。以上の新規結果を含む構造解析に関する論文作成に着手している。

Cell cycle and cell type-specific signaling and detection of S100-related biochemical functions: 1. Cell type-dependent microtubule dissociation and collective inhibition 2. Microtube-binding protein is a protein dependent inhibitor of acidification. 3. The main matrix of C is 87kDa protein, which is specifically inhibited by acidification. A study on the three-dimensional structure is necessary. The purpose of this study is to clarify the three-dimensional structure and correlation of S100 protein. The method of purification of S100 protein in the presence of X-ray structure analysis is successful in the analysis of structure by molecular substitution method. 1.7 "Decomposition energy" High decomposition energy "End of life" Protein Data Bank of the Institute of Technology of the United States " As a result of structural analysis, EF-Hand interaction is found in the presence of a complex. This mechanism is proved in detail. It is necessary to analyze the structure without existence. It is necessary to select the group. The results of the new regulation include structural analysis and paper preparation.