がん細胞がTGF-βの増殖抑制活性に対する応答性を失う責任異常分子の同定

鉴定导致癌细胞失去对 TGF-β 抗增殖活性反应性的异常分子

基本信息

批准号：
09254265
负责人：
加藤光保
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Transforming growth factor-β(TGF-β)は種々の正常細胞の増殖を抑制するが、がん細胞は反応性を消失している場合が多い。本研究は、この増殖抑制シグナルに関与する分子の同定と扁平上皮癌細胞における反応性消失の機序を解明することを目的とし、本年度は以下の点を明らかにした。(1)角化細胞上に発現し増殖抑制に関与するTGF-βレセプターはTβRIとTβRIIである。(2)TGF-β刺激はSmad2とSmad3のリン酸化を誘導する。アクチビンAはTGF-βのファミリー分子だが角化細胞に対する増殖抑制活性は弱い。このアクチビンAでは、主にSamd3がリン酸化され、Smad2のリン酸化の程度は弱く、さらにSmad蛋白の核移行の程度も弱い。(3)大腸癌細胞で見つかったSmad2のミスセンス変異を相同な部位に導入したSmad3D407Eは、増殖抑制シグナルをブロックした。この変異Smad3はTβRIに結合するがリン酸化されずレセプターから解離できないために、共存する野性型のSmad2とSmad3のリン酸化も抑制した。(4)扁平上皮癌細胞株15株でレセプターの欠損株は1株のみであった。また、これらの細胞の多くはSmad2遺伝子にも異常がないことが報告された。しかし、レセプターにもSmad2にも異常が認められない扁平上皮癌細胞株において、TGF-β刺激によるSmad2の核移行が認められず、Smad2の核移行にはレセプターとその直接の基質であるSamd2のみならず、何らかの因子が必要であり、扁平上皮癌においては、この分子に異常をきたしている可能性が示唆された。(5)TGF-βはHaCaTのc-myc遺伝子の発現を抑制したが、この細胞にc-myc遺伝子を強制発現させるとTGF-βによる増殖抑制がかからなくなることから、c-myc発現の低下にいたるシグナル経路が角化細胞の増殖抑制に必須であることが示唆された。(6)角化細胞においてTGF-β刺激で1時間以内に発現が誘導される新規遺伝子を発見した。

转化生长因子-β（TGF-β）抑制了各种正常细胞的增殖，但癌细胞通常会失去反应性。这项研究旨在鉴定参与该生长抑制信号的分子，并阐明鳞状细胞癌细胞中反应性丧失的机制，今年我们阐明了以下几点：（1）TGF-β受体在角质形成细胞上表达的TGF-β受体，并参与抑制增殖的这一点是TβRI和TβRII。（2）TGF-β刺激诱导SMAD2和SMAD3的磷酸化。活化素A是TGF-β的家族分子，但对角质形成细胞的增殖活性弱。在激活素A中，SAMD3主要是磷酸化的，SMAD2的磷酸化程度很弱，SMAD蛋白的核转运程度也很弱。（3）SMAD3D407E引入了在结肠癌细胞中发现的SMAD2的错义突变，阻止了生长抑制信号。该突变体SMAD3与TβRI结合，但未被磷酸化，不能与受体分离，因此抑制了共存的SMAD2和SMAD3共存野生形式的磷酸化。（4）15个鳞状细胞癌细胞系仅显示一个受体缺陷。还报道说，其中许多细胞在SMAD2基因中也没有异常。然而，在既未观察到受体和SMAD2异常的鳞状细胞癌细胞系中，TGF-β刺激并未观察到Smad2核易位，不仅受体及其直接底物SAMD2，而且某种因素是核转运所必需的，这表明这种鳞状细胞癌可能会导致这种分布中的鳞状细胞癌。（5）TGF-β抑制了HACAT的C-MYC基因的表达，但在该细胞中强行表达C-MYC基因可防止TGF-β抑制抑制TGF-β的增殖，这表明导致C-MYC表达降低的信号途径对于抑制Keratinocolocycycyte的生长至关重要。（6）我们发现了一个新的基因，其中通过刺激TGF-β在1小时内诱导角质形成细胞中的表达。