がん細胞がTGF-βの増殖抑制活性に対する応答性を失う責任異常分子の同定

鉴定导致癌细胞失去对 TGF-β 抗增殖活性反应性的异常分子

• 批准号: 09254265
• 负责人: 加藤 光保
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09254265/
• 关键词: transforming growth factor-β; Smad蛋白; 角化細胞; 増殖抑制; 重層扁平上皮癌

Transforming growth factor-β(TGF-β)は種々の正常細胞の増殖を抑制するが、がん細胞は反応性を消失している場合が多い。本研究は、この増殖抑制シグナルに関与する分子の同定と扁平上皮癌細胞における反応性消失の機序を解明することを目的とし、本年度は以下の点を明らかにした。(1)角化細胞上に発現し増殖抑制に関与するTGF-βレセプターはTβRIとTβRIIである。(2)TGF-β刺激はSmad2とSmad3のリン酸化を誘導する。アクチビンAはTGF-βのファミリー分子だが角化細胞に対する増殖抑制活性は弱い。このアクチビンAでは、主にSamd3がリン酸化され、Smad2のリン酸化の程度は弱く、さらにSmad蛋白の核移行の程度も弱い。(3)大腸癌細胞で見つかったSmad2のミスセンス変異を相同な部位に導入したSmad3D407Eは、増殖抑制シグナルをブロックした。この変異Smad3はTβRIに結合するがリン酸化されずレセプターから解離できないために、共存する野性型のSmad2とSmad3のリン酸化も抑制した。(4)扁平上皮癌細胞株15株でレセプターの欠損株は1株のみであった。また、これらの細胞の多くはSmad2遺伝子にも異常がないことが報告された。しかし、レセプターにもSmad2にも異常が認められない扁平上皮癌細胞株において、TGF-β刺激によるSmad2の核移行が認められず、Smad2の核移行にはレセプターとその直接の基質であるSamd2のみならず、何らかの因子が必要であり、扁平上皮癌においては、この分子に異常をきたしている可能性が示唆された。(5)TGF-βはHaCaTのc-myc遺伝子の発現を抑制したが、この細胞にc-myc遺伝子を強制発現させるとTGF-βによる増殖抑制がかからなくなることから、c-myc発現の低下にいたるシグナル経路が角化細胞の増殖抑制に必須であることが示唆された。(6)角化細胞においてTGF-β刺激で1時間以内に発現が誘導される新規遺伝子を発見した。

Transforming growth factor-β(TGF-β) inhibits the proliferation of normal cells, and there are many occasions when cell anti-proliferation disappears. The aim of this study is to clarify the molecular identity of these growth inhibitors and the mechanism of their disappearance in squamous cell carcinoma. (1)Growth inhibition in keratinocytes is related to TGF-β and TβRII. (2)TGF-β stimulation induced Smad2 and Smad3 phosphorylation. The growth inhibitory activity of TGF-beta molecules in keratinocytes is weak. The degree of Smad protein nuclear migration is weak, and the degree of Smad protein nuclear migration is weak. (3)Colorectal cancer cells can be seen in different parts of Smad3D407E, which is introduced into the same site. This variant of Smad3 binds to TβRI and is dissociated from the host cell, inhibiting the free acidification of the wild forms of Smad2 and Smad3. (4)15 squamous cell carcinoma cell lines were isolated and 1 was damaged. The number of cells in the Smad2 gene is abnormal. Smad2 nuclear migration in squamous cell carcinoma cell lines stimulated by TGF-β was identified. Smad2 nuclear migration in squamous cell carcinoma cell lines stimulated by TGF-β was identified. Smad2 nuclear migration in squamous cell carcinoma cell lines stimulated by TGF-β was identified. (5)TGF-β inhibits the expression of c-myc gene in HaCaT cells under stress, and TGF-β inhibits the proliferation of keratinocytes under stress. (6)Keratinized cells were stimulated by TGF-β and induced within 1 hour.

项目成果

Shimizu A. et al.: "Identification of receptors and Smad proteins involved in activin-induced differentiation of human epidermal keratinocytes." Genes to Cells.(in press).

Shimizu A. 等人：“鉴定参与激活素诱导的人表皮角质形成细胞分化的受体和 Smad 蛋白。”

Furue M. et al.: "Dysregulated expression of transforming growth factor β(TGF-β)and its type I and type II receptors in basal cell carcinoma." Int.J.Cancer. 71. 505-509 (1997)

Furue M. 等人：“基底细胞癌中转化生长因子 β (TGF-β) 及其 I 型和 II 型受体的表达失调。”Int.J.Cancer 71. 505-509 (1997)

Okochi H. et al.: "Expression of tetra-spans transmembran family(CD9,CD37,CD53,CD63,CD81 and CD82)in normal and neoplastic human keratinocytes:an association of CD9 with α3β1 integrin." Br.J.Dermatol.137. 856-863 (1997)

Okochi H. 等人：“正常和肿瘤性人类角质形成细胞中四跨跨膜家族（CD9、CD37、CD53、CD63、CD81 和 CD82）的表达：CD9 与 α3β1 整合素的关联。” 137.856-863 (1997)

Yonemori K. et al.: "Bone morphogenetic protein receptors and activin receptors are highly expressed in ossified ligamenttissues of patients with ossification of the posterior longitudinal ligament." Am.J.Pathol.150. 1335-1347 (1997)

Yonemori K.等人：“骨形态发生蛋白受体和激活素受体在后纵韧带骨化患者的骨化韧带组织中高度表达。”

Nakajima Y. et al.: "Extracellular fibrillar structure of latent TGBβ binding protein-l:role in TGFβ-dependent endothelialmesenchymal transformation during endocardial cushion tissue formation in mouse embryonic heart." J.Cell Biol.136. 193-204 (1997)

Nakajima Y. 等人：“潜在 TGBβ 结合蛋白-1 的细胞外纤维结构：在小鼠胚胎心脏心内膜垫组织形成过程中 TGFβ 依赖性内皮间质转化中的作用”，J.Cell Biol.193-204。