权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

生殖始原細胞の増殖分化に作用する新規サイトカインの探索

寻找影响生殖祖细胞增殖和分化的新型细胞因子

基本信息

批准号：
09264205
负责人：
原孝彦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までの本研究で、OSMがゴナドで発現しゴナド移動後のPGCを増殖刺激すること、OSM受容体はLIF受容体と重複していないこと、OSMは新生マウス精巣でセルトリ細胞のオートクライン増殖因子として作用すること、を報告してきた。上記のOSM特異的な生物活性の分子機序を知るために、マウスOSM受容体ベータ鎖(OSMRβ)のcDNAを新規にクローニングした。それは、LIF受容体ベータ鎖に類似の構造をしていたが、gp130とともに細胞表面に発現させると、OSMに高親和性で結合しLIFには結合しなかった。これで、OSM/LIF受容体についてのマウスとヒトとの違いが分子レベルで証明された。初期PGCに対してはLIFのみ作用してOSMは刺激しないこと、また、新生セルトリ細胞に対するOSM特異的効果は、OSMRβの細胞特異的発現で説明される。LIF・OSMどちらを用いた場合でもPGCを長期培養することはできないが、もしPGC分化に伴い受容体ベータ鎖の消失がおこるならば、OSMRβをレトロウイルスやトランスジェニック法で構成的にPGCに発現させることでPGC長期培養系が可能になるかもしれない。一方、OSM以外にゴナドで発現する新規サイトカインの探索は、発現クローニング法やPCR法ではいずれも成功しなかった。そこで最近開発された、シグナル配列を有する遺伝子産物を酵母でスクリーニングするシグナルトラップ法を、PGCに発現する分泌性蛋白質と膜蛋白質の網羅的クローニングに応用する準備を開始した。モデル系として血管内皮系細胞株を用いて、スクリーニングを行なったところ、高頻度でVCAM-1などの複数の内皮系特異的膜蛋白質をコードするcDNA断片が単離された。PGCは少量しか得られないため、PCRによるLibraryを構築する必要があるが、シグナルトラップ法は次年度の有効なアプローチとして期待できる。

In this study, OSM was found to stimulate the proliferation of PGC after migration, and OSM receptor LIF was found to repeat, and OSM was found to act as a growth factor in the regeneration of PGC cells. The molecular mechanism of OSM-specific biological activity described above is known, and the cDNA of OSM-receptor (OSMRβ) is known. A similar structure is found on the cell surface of the receptor, and OSM binds with high affinity. The OSM/LIF receptor has been proved to be a perfect match for the molecule. The effect of PGC on LIF and OSM on OSM-specific effects and cell-specific manifestations of OSMR on newborn cells were explained. In the case of LIF, OSM and OSM, PGC long-term culture may be possible. A new method of discovery, discovery and PCR was successfully developed in addition to OSM The preparation of secretory proteins and membrane proteins for yeast production has recently been developed. VCAM-1 and a number of endothelial-specific membrane proteins were isolated from vascular endothelial cell lines with high frequency. PGC has a small amount of information, PCR Library construction is necessary, and the next year's information is expected.