ブロメラインインヒビターの3次元構造解析とそれに基づく阻害剤の開発
菠萝蛋白酶抑制剂的三维结构分析及基于其的抑制剂开发
基本信息
- 批准号:09267204
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ブロメラインインヒビター(BI)は、パイナップルの茎に存在する蛋白質性のシステインプロテアーゼインヒビターである。我々はBIを単離精製し、アイソタイプVI(BI-VI)の2次元NMRスペクトルを測定解析して、溶液3次元構造を決定した。その結果、この蛋白質はβシートにより形成されるドメイン2個からなり、各ドメインは3本鎖の逆平行βシートからなることがわかった。BIのトリプシンならびにキモトリプシンに対する阻害活性を測定したところ、このインヒビターはセリンプロテアーゼ阻害活性も有することが明らかとなった。本研究では、BI-VIをタンパク質工学的に種々修飾あるいは置換して有用なインヒビターを開発することを目的として、発現系の構築と遺伝子のクローニングを試みた。BI-VIは2本鎖のタンパク質であるが、構造から軽鎖のC末端と重鎖のN末端が空間的に近く、軽鎖のC末端が酵素阻害部位であることが分かったので、軽鎖-重鎖の順に並んだペプチドを発現する遺伝子を合成した。大腸菌で発現した蛋白質はすべて封入体となったので、種々の条件で巻き戻しを試みたが、活性のあるインヒビターを得ることはできなかった。BIには何らかのプロ配列が存在する可能性が示唆されたので、遺伝子のクローニングを行った。これまでに、genomicDNAから約1kbの断片がクローニングされ、重鎖、軽鎖、重鎖、軽鎖というように重鎖、軽鎖の配列が繰り返され、軽鎖と重鎖の間には5残基の、重鎖と軽鎖の間には19残基のアミノ酸が挿入されていることが判明した。この挿入配列は一般的なイントロン則には当てはまらないので、イントロンではなくBI遺伝子の1部であり、プロ配列に当たると考えている。今後、BI遺伝子の全構造を明らかにし、プロ配列を含む遺伝子配列に基づいて発現系を再構築し、上記の目的の変異体BIの作成を目指す。
There is a protein in the stem of BI. There is a protein in the stem. We analyze BI, VI (BI-VI) 2-dimensional NMR, solution 3-dimensional determination and determination. According to the results of the experiment, the β-chain of protein was used to form two cycles, and each of them was reverse-paralleled, and the β-chain was used in reverse parallelism. BI
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Suzuki,Y.ラ: "Hydrolysis of AMPPNP by the motor domain of ncd,a kinesin-related protein." FEBS Lett.409・1. 29-32 (1997)
Suzuki, Y. La:“NCD 的运动结构域对 AMPPNP 的水解,一种驱动蛋白相关蛋白。” FEBS Lett.409·1 (1997)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Ichikawa,T.ラ: "Crystallization and preliminary crystallographic analysis of the sarcosine oxidase from Bacillus sp.NS-129." J.Struct.Biol.120. 109-111 (1997)
Ichikawa, T. La:“芽孢杆菌 NS-129 肌氨酸氧化酶的结晶和初步晶体学分析。J.Struct.Biol.120 (1997)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Sato,K.ラ: "Crystallization and preliminary crystallographic studies of dimethyl sulfoxide reductase from Rhodobacter sphaeroides f.sp.Denitrificans." Proc.Japan Acad.73B・2. 30-32 (1997)
Sato, K. La:“来自球形红细菌 f.sp.Denitificans 的二甲基亚砜还原酶的结晶和初步晶体学研究。Proc.Japan Acad.73B·2 (1997)”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Suzuki,Y.ラ: "Modulatin of actin filament sliding by mutations of the SH2 cysteine in Dictyostelium myosin II." Biochem.Biophys.Res.Commuu.234・3. 701-706 (1997)
Suzuki, Y. La:“盘基网柄菌肌球蛋白 II 中 SH2 半胱氨酸的突变调节肌动蛋白丝滑动。Biochem.Biophys.Res.Commuu.234·3 (1997)”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
田之倉 優其他文献
ヒトReticulocalbin-1のカルシウム依存的構造変化
人 Reticulocalbin-1 的钙依赖性结构变化
- DOI:
- 发表时间:
2014 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
鈴木 七緒;陳 思思;今井 ファビアナ リカ;澤野 頼子;宮川 拓也;田之倉 優;米澤 直人 - 通讯作者:
米澤 直人
リン酸存在下での乾燥加熱による卵白タンパク質のリン酸化-とリン酸基の結合様式について
磷酸存在下干热加热蛋清蛋白的磷酸化及磷酸基团的结合模式
- DOI:
- 发表时间:
2008 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
林 葉子;李 ソウ鵬;胡 芳宇;澤野 頼子;田之倉 優;青木 孝良 - 通讯作者:
青木 孝良
植物の活性酸素種生成酵素 Rboh のCa2+ とリン酸化を介した活性制御機構とその進化
植物活性氧生成酶Rboh通过Ca2+和磷酸化的活性控制机制及其演化
- DOI:
- 发表时间:
2019 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
橋本貴史;橋本研志;板橋 武;宮川拓也;田之倉 優;朽津和幸 - 通讯作者:
朽津和幸
腸間膜リンパ節樹状細胞およびT細胞のレチノイン酸に関わる応答の加齢による変化
肠系膜淋巴结树突状细胞和 T 细胞视黄酸相关反应的年龄相关变化
- DOI:
- 发表时间:
2017 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
高野 智弘;上滝 隆太郎;宮川 拓也;朴 知賢;塩河 亜弥;好田 正;足立 (中嶋) はるよ;田之倉 優;八村 敏志 - 通讯作者:
八村 敏志
食餌性リジンによる筋肉イミダゾールジペプチド量および代謝遺伝子発現量への影響
膳食赖氨酸对肌肉咪唑二肽水平和代谢基因表达水平的影响
- DOI:
- 发表时间:
2015 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
高野 智弘;上滝 隆太郎;宮川 拓也;朴 知賢;塩河 亜弥;好田 正;足立 (中嶋) はるよ;田之倉 優;八村 敏志;鎌田拓也・寺尾怜史・原 崇・久保田真敏・大谷 元・加藤久典・藤井幹夫・藤村 忍・門脇基二;甲斐慎一・渡邊源哉・久保田真敏・門脇基二・藤村 忍 - 通讯作者:
甲斐慎一・渡邊源哉・久保田真敏・門脇基二・藤村 忍
田之倉 優的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('田之倉 優', 18)}}的其他基金
NMRを用いたメタボロミクス分析法の開発及び応用
NMR代谢组学分析方法的开发与应用
- 批准号:
12F02090 - 财政年份:2012
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
WWドメインの機能と特異性に関する総合理解を目指した構造構能相関研究
结构-结构相关性研究旨在全面了解WW域的功能和特殊性
- 批准号:
15657024 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
発光細菌の発光反応関連酵素群のX線結晶構造解析
发光细菌发光反应相关酶的X射线晶体结构分析
- 批准号:
11169206 - 财政年份:1999
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
ブロメラインインヒビターの3次元構造解析とそれに基づく阻害剤の開発
菠萝蛋白酶抑制剂的三维结构分析及基于其的抑制剂开发
- 批准号:
10163205 - 财政年份:1998
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
X線とNMRによるクロコウジカビ酸性プロテアーゼAの折れたたみ機構の解析
利用 X 射线和 NMR 分析黑曲霉酸性蛋白酶 A 的折叠机制
- 批准号:
10157201 - 财政年份:1998
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
キネシンとncdのNMRによる動的構造の解析
NMR 分析驱动蛋白和 NCD 的动态结构
- 批准号:
09279210 - 财政年份:1997
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
NMRとX線によるクロコウジカビ酸性プロテアーゼAの折れたたみ機構の解析
利用 NMR 和 X 射线分析黑曲霉酸性蛋白酶 A 的折叠机制
- 批准号:
09261205 - 财政年份:1997
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
NMRとX線によるクロコウジカビ酸性プロテアーゼAの折れたたみ機構の解析
利用 NMR 和 X 射线分析黑曲霉酸性蛋白酶 A 的折叠机制
- 批准号:
08272203 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
NMRとX線によるクロコウジカビ酸性プロテアーゼAの折れたたみ機構の解析
利用 NMR 和 X 射线分析黑曲霉酸性蛋白酶 A 的折叠机制
- 批准号:
08272203 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
NMRとX線小角散乱によるクロコウジカビ酸性プロテアーゼAの折れたたみ機構の解析
利用NMR和小角X射线散射分析黑曲霉酸性蛋白酶A的折叠机制
- 批准号:
07280203 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
相似海外基金
Search for new preventive medicine by regulating oral flora to treat opportunistic infections - Focus on proteins in saliva
通过调节口腔菌群来治疗机会性感染寻找新的预防药物 - 关注唾液中的蛋白质
- 批准号:
19K10426 - 财政年份:2019
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
The third role of effector proteins secreted by fungal phytopathogen
真菌植物病原体分泌的效应蛋白的第三个作用
- 批准号:
17H05022 - 财政年份:2017
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
Proteomics Analysis of Secretory Cysteine Protease Inhibitors and their Practical Application on Oral Health
分泌型半胱氨酸蛋白酶抑制剂的蛋白质组学分析及其在口腔健康中的实际应用
- 批准号:
15591981 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Studies on the production and practical use of engineered human salivary type cystatins.
工程人唾液型半胱氨酸蛋白酶抑制剂的生产和实际应用研究。
- 批准号:
12671817 - 财政年份:2000
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
多機能性蛋白としてのキニノゲンの生体内における役割に関する研究
多功能蛋白激肽原的体内作用研究
- 批准号:
07772242 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
神経内分泌細胞におけるシステインプロテアーゼインヒビターの機能解析
半胱氨酸蛋白酶抑制剂在神经内分泌细胞中的功能分析
- 批准号:
06770018 - 财政年份:1994
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
ヒトメラノーマ中のシステインプロテアーゼインヒビターに関する研究
半胱氨酸蛋白酶抑制剂在人黑色素瘤中的研究
- 批准号:
63770741 - 财政年份:1988
- 资助金额:
$ 1.34万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)