B型肝炎ウイルス発癌モデルでの肝臓での特異的発現遺伝子の包括的検索

乙型肝炎病毒致癌模型中肝脏差异表达基因的全面寻找

• 批准号: 14021035
• 负责人: 向田 直史
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021035/
• 关键词: B型肝炎; トランスジェニックマウス; ディファレンシャルディスプレイ; DNAアレイ; diethylnitrosamine; pim-3; RT-PCR法; セリン・スレオニン・キナーゼ

HBs抗原で免疫した野生型のマウス骨髄細胞を、骨髄細胞を枯渇させたHBsトランスジェニックマウスに移植することによって、急性肝炎→慢性肝炎→前癌状態→肝癌と発症するモデルを用いて、前癌状態において選択的に発現が変化する遺伝子群を、蛍光ディファレンシャル・ディスプレイ(FDD)法にて包括的に検索し、同定した。その結果、(1)5種類の未知遺伝子ならびに、19種類の既知遺伝子の発現が増強していたのに対して、19種類の既知遺伝子の発現が低下していた。(2)5種類の未知遺伝子を定量的RT-PCR法にて検討したところ、このモデルのみならず、diethylnitrosamine投与による肝癌発症モデルでの前癌状態においても、これらの遺伝子発現が肝臓内で発現が増強していることを確認した。(3)このモデルの前癌状態で発現が増強していた既知遺伝子のうち、機能の詳細が不明であるセリン・スレオニン・キナーゼ、pim-3の発現様式について検討した結果、HBs-Tgマウスでの肝癌発症モデルとdiethylnitrosamine投与による肝癌発症モデルとの両者において、前癌状態においてpim-3の発現が増強していることを、半定量的RT-PCR法にて確認した。(4)ヒトpim-3の塩基配列の報告がなかったため、ヒトpim-3の完全長cDNAをクローニングして、その塩基配列を決定した。ヒトpim-3cDNAは全長約2.4kbで、981bp(326アミノ酸)からなるopen reading frameを保有していて、これまでに報告されているマウス・ラットpim-3とアミノ酸レベルで94%一致していることが明らかになった。さらに、ヒト肝癌細胞株でpim-3が恒常的に発現していることも確認した。

HBs antigen is immune to wild-type, bone marrow cells, bone marrow cells, liver transplantation, acute hepatitis, chronic hepatitis, precancerous status, liver cancer, and development. The results showed that: (1) the occurrence of 5 unknown genes, 19 known genes increased, and the occurrence of 19 known genes decreased. (2)5 RT-PCR method for quantitative detection of unknown gene types was used to detect and confirm the presence of increased gene expression in liver cancer. (3)The occurrence of this gene in precancerous state increased, the function of the gene was unknown, the expression of pim-3 was examined, the results of HBsAg-Tg analysis showed that the occurrence of liver cancer was increased, and the occurrence of pim-3 in precancerous state was confirmed by semi-quantitative RT-PCR. (4)The complete cDNA sequence of Pim-3 was determined. The full length of pim-3 cDNA is about 2.4kb, 981bp(326 bp), and the open reading frame is maintained. The report is 94% identical. In this study, we confirmed that Pim-3 is a constant expression of Pim-3 in hepatoma cell line.

项目成果

Lu P, Nakamoto Y, Nemoto-Sasaki Y, Fujii C, Wang H, Hashii M, Ohmoto Y, Kaneko S, Kobayashi K, Mukaida N.: "Potential interaction between CCR1 and CCL3, induced by endogenously produced interleukin-1, in human hepatomas"American Journal of Pathology. (in

Lu P、Nakamoto Y、Nemoto-Sasaki Y、Fujii C、Wang H、Hashii M、Ohmoto Y、Kaneko S、Kobayashi K、Mukaida N.：“由内源性产生的白细胞介素 1 诱导的 CCR1 和 CCL3 之间的潜在相互作用，

Kitamura K., Nakamoto Y, Akiyama A, Kondo T, Kobayashi K, Kaneko S, Mukaida N.: "Pathogenic roles of tumor necrosis factor receptor p55-mediated signals in dimethylnitrosamine-induced murine liver fibrosis"Laboratory Investigation. 82. 571-583 (2002)

Kitamura K.、Nakamoto Y、Akiyama A、Kondo T、Kobayashi K、Kaneko S、Mukaida N.：“肿瘤坏死因子受体 p55 介导的信号在二甲基亚硝胺诱导的小鼠肝纤维化中的致病作用”实验室研究。

Mukaida N, Ketlinsky SA, Matsushima K.: "Interleukin-8 and other CXC chemokines In Cytokine Handbook (Thomson A and Lotze MT eds.)"Academic Press (in press).

Mukaida N、Ketlinsky SA、Matsushima K.：“细胞因子手册中的白细胞介素 8 和其他 CXC 趋化因子（Thomson A 和 Lotze MT 编辑）”学术出版社（正在印刷中）。

Wang H, Nemoto-Sasaki Y, Kondo T, Akiyama M, Mukaida N.: "Potential involvement of monocyte chemoattractant protein (MCP)-1/CCL2 in IL-4-mediated tumor immunity through inducing dendritic cell migration into the draining"International Immunopharmaology. (

Wang H、Nemoto-Sasaki Y、Kondo T、Akiyama M、Mukaida N.：“单核细胞趋化蛋白 (MCP)-1/CCL2 通过诱导树突状细胞迁移至引流管，可能参与 IL-4 介导的肿瘤免疫”国际

Kitakata H, Nemoto-Sasaki Y, Takahashi Y, Kondo T, Mai M, Mukaida N: "Essential roles of tumor necrosis factor receptor p55 in liver metastasis of intrasplenic administration of colon 26 cells"Cancer Research. 62. 6682-6687 (2002)

Kitakata H、Nemoto-Sasaki Y、Takahashi Y、Kondo T、Mai M、Mukaida N：“肿瘤坏死因子受体 p55 在结肠 26 细胞脾内给药肝转移中的重要作用”癌症研究。