TNFファミリー分子及びサイトカインを介するアポトーシス増殖シグナル伝達機構解明

阐明TNF家族分子和细胞因子介导的凋亡增殖信号转导机制

• 批准号: 14028002
• 负责人: 宮崎 忠昭
• 金额: $ 4.29万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028002/
• 关键词: 遺伝子; 癌; シグナル伝達; 免疫学; アポトーシス

(1)細胞接着を阻害し、integrin receptor等の接着分子からのシグナルを抑制することにより、アポトーシス(接着依存性アポトーシス:anoikis)が誘導される。癌細胞の増殖および転移においてanoikisのメカニズムを解明することは癌治療のために重要であり、我々はこのanoikis誘導の機構においてDAP3 (death associated protein 3)が機能を有していることを見い出した。さらにこのDAP3の機能の制御はそのリン酸化によって行われていることを確認し、そのリン酸化を行うkinaseについても同定と解析を行った。(2)癌の発症、増殖および浸潤とDAP3との関連性を検討するため、胃癌患者の癌組織部においてDAP3の発現をwestern blottingおよび組織切片の免疫染色を行って検討した。その結果、胃癌の中では印環細胞癌、低分化腺癌、腺扁平上皮癌においてDAP3の発現が著しく亢進している例を認めたため、現在、その発現が亢進しているDAP3のアミノ酸変異の有無について解析を行っている。また、胃癌患者由来の組織を用いて作成したcDNAを使用して、DAP3のシークエンスをPCRにより確認したところ、アミノ酸置換が考えられるDNAの変異を確認した。(3)新たなアポトーシスを誘導する分子としてクローニングされたDeath Receptor 6 (DR6)のシグナル伝達機構を解明するため、DR6の細胞内領域に物理的に会合する分子を酵母two hybrid法によりスクリーニングした結果、その候補として18個の遺伝子産物をクローニングした。これらのうちクローニングされた頻度の高かった2個の遺伝子産物について哺乳類細胞内での会合を検討した結果、DR6との会合を確認した。(4)TDAG8 (T cell death associated gene 8)遺伝子の発現誘導は、グルココルチコイドによる胸腺細胞株のアポトーシス誘導と相関していた。TDAG8のトランスジェニックマウスを作製し解析した結果、TDAG8はcaspaseの活性化に関与していることが明らかとなった。

(1) cells then を resistance against し, integrin receptor の then molecules such as か ら の シ グ ナ ル を inhibit す る こ と に よ り, ア ポ ト ー シ ス (then dependency ア ポ ト ー シ ス : up) induced さ が れ る. Cancer cells の raised colonization お よ び planning move に お い て up の メ カ ニ ズ ム を interpret す る こ と は cancer treatment の た め に important で あ り, I 々 は こ の up induced の institutions に お い て DAP3 (death associated protein 3) The が function を has <s:1> て る る て とを とを とを as seen in る comes out of た た. さ ら に こ の DAP3 の function の suppression は そ の リ ン acidification に よ っ て line わ れ て い る こ と を confirm し, そ の リ ン acidification を line う kinase に つ い て も with fixed line analytical を と っ た. (2) carcinoma の 発 disease, raised colonization お よ び infiltrating と DAP3 と の masato even sex を beg す 検 る た め organization department, stomach cancer patients の carcinoma に お い て DAP3 の 発 を now western blotting お よ び biopsy の immune dyeing line を っ て beg し 検 た. そ の results, stomach の で は signet ring cell carcinoma and poorly differentiated squamous cell carcinoma adenocarcinoma, gland に お い て DAP3 の 発 が now the し く hyperthyroidism し て い る example を recognize め た た め, now, そ の 発 now が hyperthyroidism し て い る DAP3 の ア ミ ノ acid - have different の without に つ い て parsing line を っ て い る. ま た, origin の organization を gastric cancer patients with い て made し た cDNA を use し て, DAP3 の シ ー ク エ ン ス を PCR に よ り confirm し た と こ ろ, ア ミ ノ acid replacement が exam え ら れ る の DNA - different を confirm し た. (3) new た な ア ポ ト ー シ ス を induced す る molecular と し て ク ロ ー ニ ン グ さ れ た Death Receptor (DR6) 6 の シ グ ナ ル 伝 of institutions を interpret す る た め, DR6 に の cell field meet physical に す る two molecular を yeast Hybrid method に よ り ス ク リ ー ニ ン グ し た results, そ の alternate と し て 18 の heritage 伝 zi chan content を ク ロ ー ニ ン グ し た. こ れ ら の う ち ク ロ ー ニ ン グ さ れ た high frequency の か っ た 2 の heritage 伝 zi chan content に つ い て in mammalian cells で meet の を beg し 検 た results, DR6 と meet の を confirm し た. (4) TDAG8 (T cell death associated gene 8) posthumous son 伝 の 発 induced は, グ ル コ コ ル チ コ イ ド に よ る thymus cell lines の ア ポ ト ー シ ス induced phase と masato し て い た. TDAG8 の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を cropping し parsing し た results, TDAG8 は caspase の activeness に masato and し て い る こ と が Ming ら か と な っ た.