ヒトES細胞を用いたヒト発生および細胞分化解析システム

使用人类ES细胞的人类发育和细胞分化分析系统

• 批准号: 16027225
• 负责人: 山下 潤
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16027225/
• 关键词: ヒトES細胞; 細胞分化; 心筋分化; 血管分化; Flk1; RNA干渉; 心血管発生; 幹細胞; 前駆細胞; RNAi; 動静脈分化; リンパ管分化

我々は、マウスES細胞を用いた心血管分化研究を行ってきた。本研究は、ヒトES細胞においても系統的心血管細胞分化誘導できる新しい分化系を構築することにより、ヒトの発生および細胞分化機構を解明することを目的とする。本年度は、年度計画に従い以下の研究を行った。1)ヒトES細胞維持培養系の確立:ヒトES細胞使用計画「ヒトES細胞を用いた心血管細胞分化機構に関する研究」が文部科学大臣の確認を受け、ヒトES細胞の使用が可能となった。ヒトES細胞の培養を開始した。2)ヒトES細胞の中胚葉細胞(Flk1陽性細胞)への分化誘導:京都大学内分泌代謝内科との共同研究により、マウスES細胞とほぼ同様の条件により、ヒトES細胞をFlk1陽性細胞へ分化できることが明らかになっている。(曽根ら投稿中)3)ヒトES細胞由来中胚葉細胞からの心血管細胞の分化誘導:ヒトES細胞を種々の支持細胞上において培養することにより、2次元培養下に自己拍動する心筋細胞を分化誘導することに成功した。4)ヒトES細胞への遺伝子導入システムの構築と心筋純化法の開発:レンチウィルスを用いた遺伝子導入システムを構築中である。5)ヒト心血管細胞分化における遺伝子プロファイル作り:マウスES細胞を用いて、心筋及び血管リンパ管分化における分化各段階の細胞を分化誘導するとともに純化し(Yamashita, FASEB J,2005;万木ら投稿中;河野ら投稿中)、分化過程における遺伝子発現プロファイルを作製するとともに、分化に関与する遺伝子の網羅的同定を行った。6)siRNAを用いた機能阻害実験系の構築:誘導性shRNAを用いた新しいEs細胞における遺伝子機能解析系の構築を行った。内皮分化に必須であるFlk1遺伝子発現を抑制することにより、内皮細胞分化を阻害することに成功した。(平岡ら平成17年日本分子生物学会)。

I conducted a research on the cardiovascular differentiation of 々 々 and ウスES cells using 々 た to study を and って た た. は, this study ヒ ト ES cells に お い て も system of cardiovascular cell differentiation induced で き る new し い differentiation is を build す る こ と に よ り, ヒ ト の 発 raw お よ び cell differentiation institutions を interpret す る こ と を purpose と す る. For this year, に従 and the annual plan に従 に従 will study を lines った below. 1) ヒ ト ES cells maintain training の established: ヒ ト ES cells using project "ヒ ト を ES cells with い た cardiovascular cell differentiation institutions に masato す る research" が's science minister の determined を け, ヒ ト の ES cells may use が と な っ た. Youdaoplaceholder0 ES cell <s:1> culture を begins た た. 2) ヒ ト ES cells の mesoderm cells (Flk1 positive cells) へ の induction: endocrine metabolism of Kyoto university medical と の joint research に よ り, マ ウ ス ES cells と ほ ぼ with others の conditions に よ り, ヒ ト ES cells を Flk1 positive cells へ で き る こ と が Ming ら か に な っ て い る. Contribute (back ら) 3) ヒ ト ES cell origin mesoderm か ら の の cardiovascular cell differentiation induced: ヒ ト を kind of ES cells 々 の support cells に お い て cultivate す る こ と に よ り, 2 yuan culture に flapping their next す る を heart muscle cells differentiation inducing す る こ と に successful し た. 4) ヒ ト ES cells へ の posthumous son 伝 import シ ス テ ム の build と heart muscle and purification method of の open 発 : レ ン チ ウ ィ ル ス を with い た posthumous son 伝 import シ ス テ ム を building in で あ る. 5) ヒ ト cardiovascular cell differentiation に お け る posthumous son 伝 プ ロ フ ァ イ ル り : マ ウ ス を ES cells with い て, heart muscle and び vascular リ ン パ tube differentiation に お け る を の cell differentiation inducing differentiation paragraphs order す る と と も に purification し (Yamashita, FASEB J, 2005; thousands of wooden ら contribute; Kono ら submissions), differentiation に お け る heritage 伝 son 発 now プ ロ フ ァ イ ル を cropping す る と と も に, differentiation に masato and す る heritage 伝 son の snare set を row っ た. 6) siRNA を with い た function resistance against be 験 の construct: induced shRNA を with い た new し い Es cells に お け る heritage 伝 sub function resolution is の line build を っ た. Endothelial differentiation に must で あ る Flk1 heritage 伝 son 発 now を inhibit す る こ と に よ り, endothelial cell differentiation を resistance against す る こ と に successful し た. (Hiraoka ら Japan Molecular Biology Society, Heisei 17)

项目成果

Roles of thromboxane A2 and prostacyclin in development of atherosclerosis in apoE-deficient mice.

血栓素 A2 和前列环素在 apoE 缺陷小鼠动脉粥样硬化发展中的作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Clin Invest 114
• 作者: Marian R.Goldsmith;Toru Shimada;Hiroaki Abe;Kobayashi T
• 通讯作者: Kobayashi T

Cardiovascular cell differentiation from ES cells. In : Mori H, Matsuda H. Cardiovascular Regeneration Therapies Using Tissue Engineering Approaches.Chapter 2.

ES细胞分化为心血管细胞。

• 发表时间: 2004
• 作者: Yamashita J;Nishikawa SI.;Yamashita J
• 通讯作者: Yamashita J

nicheにおける未分化性の維持

维持生态位的未分化状态

• 发表时间: 2004
• 期刊: 遺伝子医学MOOK「再生医療へのブレイクスルー」田畑泰彦編
• 作者: Marian R.Goldsmith;Toru Shimada;Hiroaki Abe;Kobayashi T;Suzuki Y;Yamashita JK;山下 潤;山下 潤;山下 潤;山下 潤;山下 潤
• 通讯作者: 山下 潤

Embryonic stem cell-derived endothelial cells. In : Augustin H.Springer Lab Manual.Methods in Endothelial Cell Biology Chapter 4.

胚胎干细胞衍生的内皮细胞。

• 发表时间: 2004
• 作者: Yamashita J;Nishikawa SI.;Yamashita J;Yamashita J
• 通讯作者: Yamashita J

再生医療と血管分化制御機構

再生医学与血管分化控制机制

• 发表时间: 2004
• 期刊: 分子血管病 5
• 作者: Marian R.Goldsmith;Toru Shimada;Hiroaki Abe;Kobayashi T;Suzuki Y;Yamashita JK;山下 潤;山下 潤
• 通讯作者: 山下 潤