ES細胞を用いた新しい構成的発生生物学による分化におけるゲノム機能の網羅的解析

使用 ES 细胞利用新的组成发育生物学全面分析分化中的基因组功能

• 批准号: 18016013
• 负责人: 山下 潤
• 金额: $ 5.5万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18016013/
• 关键词: ES細胞; 血管; 動静脈; リンパ管; 心臓; 遺伝子プロファイル; 分化; Flk1; 動静脈分化; リンパ管分化; RNA干渉; ヒトES細胞; 分化メカニズム

研究代表者等は、ES細胞(胚性幹細胞)を用いて血管および心臓の分化研究を行い、心血管分化過程を細胞レベルで経時的系統的に解析できる新しい分化システムを構築した(Nature, 2000; FASEB J, 2005)。本研究は、ヒトを含めた哺乳動物の発生及び細胞分化過程を構成的に再現し、その過程におけるゲノム機能のダイナミズムを細胞レベルで解析・提示できる新たな研究基盤の構築を目的とする。研究期間内においては、1)我々の新しいES細胞分化系を用いた心血管細胞分化過程における細胞レベルでの遺伝子プロファイルの作製、2)心血管分化における機能遺伝子の網羅的同定、3)同機能遺伝子群による構成的細胞分化の再現を行う。また、4)分化過程におけるゲノム構造変遷の可視化と5)同定遺伝子発現制御機構の解析により、個々の細胞分化におけるゲノム機能の経時的系統的解析を試みる。さらには6)ヒトES細胞を用いた構成的ヒト発生学の構築を試みる。本年度は、1)動静脈分化における遺伝子プロファイルの作製:誘導した動静脈リンパ管内皮細胞を純化し遺伝子発現プロファイルを作製した。数々の動静脈リンパ管内皮特異的遺伝子を同定した。2)心筋分化における遺伝子プロファイルの作製:心筋及び心筋前駆細胞特異的遺伝子群を同定。3)心筋ペースメーカー細胞分化機構の解析(Yanagi, Stem Cells, 2007)。4)ヒトES細胞血管分化誘導システムの構築(Sone, Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2007)。5)マウス人工多能性幹細胞(iPS細胞)を用いた心血管分化誘導システムの構築6)ヒトiPS細胞を用いた心血管分化誘導。

Research representatives such as the research on vascular and cardiac differentiation of ES cells (embryonic stem cells), analysis of cardiovascular differentiation process, and construction of new differentiation system during cell cycle (Nature, 2000; FASEB J, 2005). This study includes the reproduction of mammalian development and cellular differentiation processes, analysis of cellular differentiation processes, and suggestions for the construction of new research substrates. During the study period, there were three aspects: 1) the development of new ES cell differentiation lines in cardiovascular cell differentiation process, 2) the identification of functional genes in cardiovascular differentiation, 3) the regeneration of cell differentiation composed of functional genes. 4) Visualization of structural transition during differentiation 5) Analysis of regulatory mechanisms for the development of isozymes and analysis of systems for the functional transition during differentiation of cells. 6) ES cells were used to construct the cell biology. This year, 1) Arteriovenous differentiation, purification and development of endothelial cells: induction and purification of endothelial cells. The number of arteriovenous vessels and endothelial cells is also determined. 2)The mechanism of differentiation of cardiac muscle cells: the differentiation of cardiac muscle cells and cardiac muscle cells is identical. 3)Analysis of the mechanism of differentiation of cardiac muscle cells (Yanagi, Stem Cells, 2007). 4) Construction of vascular differentiation induction system of ES cells (Sone, Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2007). 5) Artificial pluripotent stem cells (iPS cells) are used to induce cardiovascular differentiation. 6) iPS cells are used to induce cardiovascular differentiation.

项目成果

Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channels and T-Type calcium channels confer automaticity of embryonic stem cell-derived cardiomyocytes

• DOI: 10.1634/stemcells.2006-0388
• 发表时间: 2007-11-01
• 期刊: STEM CELLS
• 影响因子: 5.2
• 作者: Yanagi, Kentoku;Takano, Makoto;Yamashita, Jun K.
• 通讯作者: Yamashita, Jun K.

ES細胞を用いた構成的アプローチによる血管分化多様化機構の解析

使用 ES 细胞的组成型方法分析血管分化和多样化的机制

• 发表时间: 2007
• 作者: Fujita M.;et al.;芦原貴司;Kuwano K;山下潤
• 通讯作者: 山下潤

Prospective identification of cardiac progenitors

心脏祖细胞的前瞻性鉴定

• 发表时间: 2007
• 作者: Asakura M;Asanuma H;Kim J;Liao Y;Nakamaru K;Fujita M;Komamura K;Isomura T;Furukawa H;Tomoike H;Kitakaze M;Yamashita JK
• 通讯作者: Yamashita JK

Furuse M. Identification of adherens junction-associated GTPase activating proteins by the fluorescence localization-based expression cloning.

Furuse M. 通过基于荧光定位的表达克隆鉴定粘附连接相关的 GTP 酶激活蛋白。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Exp Cell Res (印刷中)
• 作者: Matsuda M;Kobayashi Y;Masuda S;Adachi M;Watanabe T;Yamashita JK;Nishi E;Tsukita S
• 通讯作者: Tsukita S

Adrenomedullin/cyclic AMP pathway induces notch activation and differentiation of arterial endothelial cells from vascular progenitors

• DOI: 10.1161/01.atv.0000234978.10658.41
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: ARTERIOSCLEROSIS THROMBOSIS AND VASCULAR BIOLOGY
• 影响因子: 8.7
• 作者: Yurugi-Kobayashi, Takami;Itoh, Hiroshi;Yamashita, Jun K.
• 通讯作者: Yamashita, Jun K.