ES細胞を用いた包括的動静脈リンパ管分化多様化機構の解析

利用ES细胞全面分析动静脉淋巴管分化和多样化的机制

• 批准号: 18013030
• 负责人: 山下 潤
• 金额: $ 8.45万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18013030/
• 关键词: ES細胞; 血管; 動静脈; リンパ管; 腫瘍血管; 遺伝子プロファイル; Flk1; VEGF受容体; 動静脈分化; リンパ管分化; RNA干渉; ヒトES細胞

研究代表者等は、ES細胞を用いて血管および心臓の分化研究を行い、心血管分化過程を細胞レベルで経時的系統的に解析できる新しい分化システムを構築した(Nature,2000)。本研究は、我々の系統的ES細胞分化誘導システムを用いて、包括的に内皮細胞多様化機構を明らかにし、腫瘍血管リンパ管に対する新しい抗がん治療戦略を開発することを目的とする。1)動静脈リンパ管内皮特異的分化誘導法の確立、2)同分化系を用いた動静脈リンパ管分化機構の解析、3)内皮分化多様化過程における遺伝子プロファイリング、4)分化過程における遺伝子機能解析系の構築と同定候補遺伝子機能解析。5)同定遺伝子の腫瘍血管等における意義の解析、の5項目の研究を行う。昨年度までに、1)動静脈内皮細胞分化と動脈内皮分化の定量的評価及び誘導動脈内皮細胞の純化に成功した(Yurugi-Kobayashi,Arterioscler Thromb Vase Biol,2006)。2)リンパ管内皮分化誘導法の開発と純化に成功した(Kono,Arterioscler Thromb Vase Biol,2006)。本年度は、3)内皮分化多様化過程における遺伝子プロファイル:1)2)で純化した種々の細胞群からRNAを抽出し、遺伝子プロファイルを作製した。5)内皮細胞多様化機構の解明:昨年度4)にて構築したRNA干渉を用いたES細胞における遺伝子機能阻害のシステム(Hiraoka-Kanie,Biochem Biophys Res Commun,2006)を用いて、3)で同定した遺伝子群の機能解析を進めている。5)ヒトES細胞を用いた血管多様化機構の解析:ヒトES細胞を用いた実験を開始し、動静脈リンパ管内皮分化誘導系の構築を進めている。

Research representatives have conducted studies on the use of ES cells in vascular and cardiac differentiation, and on the analysis of the cardiovascular differentiation process and the construction of new differentiation systems in the cellular cycle (Nature,2000). The aim of this study is to develop a strategy for differentiation of ES cells, including endothelial cell differentiation mechanisms. 1)Establishment of differentiation induction method specific for arteriovenous endothelial cells, 2) Analysis of differentiation mechanism of arteriovenous endothelial cells in the use of isodifferentiation lines, 3) Gene differentiation in the process of endothelial differentiation, 4) Construction of gene function analysis system in the process of differentiation and analysis of isodifferentiation candidate gene function. 5)At the same time, the analysis of the significance of tumor blood vessels and other factors, and the study of 5 items were carried out. 1) Quantitative evaluation of arterial endothelial cell differentiation and purification of induced arterial endothelial cells (Yurugi-Kobayashi,Arterioscler Thromb Vase Biol,2006). 2) The development and purification of endothelial differentiation induction method was successful (Kono,Arterioscler Thromb Vase Biol,2006). This year, 3) Endothelial differentiation and differentiation process:1) Purification of seed cell population: RNA extraction, DNA purification and differentiation. 5)The mechanism of endothelial cell diversification: 4) Construction of RNA stem cells for use in ES cells for functional inhibition of gene expression (Hiraoka-Kanie,Biochem Biophys Res Commun,2006); 3) Functional analysis of isoproteomic gene expression. 5) Analysis of vascular diversity mechanism in ES cell application: The development of vascular endothelial differentiation induction system in ES cell application

项目成果

Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channels and T-Type calcium channels confer automaticity of embryonic stem cell-derived cardiomyocytes

• DOI: 10.1634/stemcells.2006-0388
• 发表时间: 2007-11-01
• 期刊: STEM CELLS
• 影响因子: 5.2
• 作者: Yanagi, Kentoku;Takano, Makoto;Yamashita, Jun K.
• 通讯作者: Yamashita, Jun K.

ES細胞を用いた構成的アプローチによる血管分化多様化機構の解析

使用 ES 细胞的组成型方法分析血管分化和多样化的机制

• 发表时间: 2007
• 作者: Fujita M.;et al.;芦原貴司;Kuwano K;山下潤
• 通讯作者: 山下潤

Prospective identification of cardiac progenitors

心脏祖细胞的前瞻性鉴定

• 发表时间: 2007
• 作者: Asakura M;Asanuma H;Kim J;Liao Y;Nakamaru K;Fujita M;Komamura K;Isomura T;Furukawa H;Tomoike H;Kitakaze M;Yamashita JK
• 通讯作者: Yamashita JK

Furuse M. Identification of adherens junction-associated GTPase activating proteins by the fluorescence localization-based expression cloning.

Furuse M. 通过基于荧光定位的表达克隆鉴定粘附连接相关的 GTP 酶激活蛋白。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Exp Cell Res (印刷中)
• 作者: Matsuda M;Kobayashi Y;Masuda S;Adachi M;Watanabe T;Yamashita JK;Nishi E;Tsukita S
• 通讯作者: Tsukita S

Adrenomedullin/cyclic AMP pathway induces notch activation and differentiation of arterial endothelial cells from vascular progenitors

• DOI: 10.1161/01.atv.0000234978.10658.41
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: ARTERIOSCLEROSIS THROMBOSIS AND VASCULAR BIOLOGY
• 影响因子: 8.7
• 作者: Yurugi-Kobayashi, Takami;Itoh, Hiroshi;Yamashita, Jun K.
• 通讯作者: Yamashita, Jun K.