权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

コートカラーではgerm lineに伝わるが導入遺伝子は伝わらないキメラの解析

毛色传递至种系但不传递至转基因的嵌合体的分析

基本信息

批准号：
16045213
负责人：
荒木喜美
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16045213/
关键词：
キメラマウス ES細胞 Germline transmission

项目摘要

ES細胞を用いた遺伝子トラップを行う過程で得られた3つのトラップクローン、Ayu17-125,Ayu17-131,Ayu17-735は、それらのキメラマウスの仔の毛色はES由来であるにもかかわらず、トラップベクターは伝わらないという現象を示す。しかし、キメラ精子を用いた体外授精で得られた受精卵を胚盤胞まで培養、PCRでトラップベクターの有無を調べると、2-6割の確率でベクターを持つ胚が存在した。その原因解析のため、まず、Ayu17-125の体外受精で得られた胚盤胞を培養、ES細胞の樹立を試みた。267個の胚盤胞を培養、そのうちG418選択下でESとして樹立できたものは4クローンのみであった。これは、以前のPCRで得られた胚盤胞でのトラップベクター陽性率より著しく低い。これらのES細胞からキメラを作製すると、ベクターが伝わるキメラが多数得られた。この結果は、胚盤胞で行ったPCRの結果を疑わせるものである。また、トラップクローンに薬剤耐性遺伝子を導入して得られたサブクローンを調べる、という実験から、元のクローンにはトラップベクターをもっていない細胞が混入していることも明らかになった。そこで、Ayu17-131,Ayu17-735を用い、トラップベクターのβgeo遺伝子を部位特異的組換えシステムを用いてIRES-βgeo遺伝子に置換、その置換クローンでベクターが伝わるか解析を行った。その結果、両クローンともベクターが伝わるキメラが得られた。しかし、Ayu17-735(脂肪酸伸長遺伝子であるelov16をトラップしている)由来のキメラは生殖効率が非常に悪く、精子は精巣上体に十分数存在するものの、体外受精の際、HTF溶液での前培養の段階で精子の活動性が非常に落ちることがわかった。現在、この表現型がどの程度の浸透率で子孫に伝わるのかを検討中である。

In the course of the procedure, the ES cell received the following information: Ayu17-125, Ayu17-131, Ayu17-735, Ayu17-131, Ayu17-735, Ayu17-131, The embryo cells of fertilized eggs were obtained by in vitro insemination (IVF). The embryos of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryos of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryos of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryos of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryos of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured in vitro, the embryo cells of fertilized eggs were cultured, and the accuracy rate of 2-6 cleavage was found. Analysis of the causes: embryo culture and ES cell culture were obtained by in vitro fertilization (IVF) with Ayu17-125.The results were as follows: 1. A total of 267 embryos were cultured and selected by ES

项目成果

期刊论文数量（20）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Myopathy phenotype in transgenic mice expressing mutated PABPN1 as a model of oculopharyngeal muscluar dystrophy.

表达突变 PABPN1 的转基因小鼠的肌病表型作为眼咽肌营养不良症模型。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Hum.Mol.Genet. 13
影响因子：
0
作者：
Hino;H.;et al.
通讯作者：
et al.

A novel murine gene, Sickle tail (Skt), linked to the Danforth's short tall (Sd) locus, is required for normal development of the intervertebral disc.

一种新的鼠类基因镰尾（Skt）与丹福斯矮高（Sd）基因座相关，是椎间盘正常发育所必需的。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Genetics 172
影响因子：
0
作者：
Semba;K;et al.
通讯作者：
et al.

Autophagic cell death of pancreatic acinar cells in serine protease inhibitor Kazal type 3-deficient mice

DOI：
10.1053/j.gastro.2005.05.057
发表时间：
2005-08-01
期刊：
GASTROENTEROLOGY
影响因子：
29.4
作者：
Ohmuraya, M;Hirota, M;Yamamura, K
通讯作者：
Yamamura, K

Characterization of an exchangeable gene trap using pU‐17 carrying a stop codon‐βgeo cassette

DOI：
10.1111/j.1440-169x.2005.00792.x
发表时间：
2005-04
期刊：
Development
影响因子：
4.6
作者：
Takuya Taniwaki;Kyoko Haruna;Hiroshi Nakamura;T. Sekimoto;Y. Oike;Takashi Imaizumi;Fumiyo Saito;Mayumi Muta;Yumi Soejima;Ayako Utoh;N. Nakagata;M. Araki;K. Yamamura;K. Araki
通讯作者：
Takuya Taniwaki;Kyoko Haruna;Hiroshi Nakamura;T. Sekimoto;Y. Oike;Takashi Imaizumi;Fumiyo Saito;Mayumi Muta;Yumi Soejima;Ayako Utoh;N. Nakagata;M. Araki;K. Yamamura;K. Araki

Loss of PGC-specific expression of the orphan nuclear receptor ERR-β results in reduction of germ cell number in mouse embryos