レンチウイルスベクターによる新規癌転移遺伝子の網羅的探索とその抑制法の開発研究

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cDNA発現レンチウイルスベクターを用いた実験系より、ケモカイン分子であるSDF-1のレセプター分子(CXCR4)の細胞膜上の発現を抑制する遺伝子(CD63dN)を得ることができた。このCXCR4は乳がん細胞の血行性肺転移の過程において重要な役割を果たしていることが、がん細胞転移評価実験により明らかとなっているので、レンチウイルスベクターを用いてCD63dNを乳がん細胞(MDA-MB-231)に導入し、その転移能を抑制することを目的とした実験を行った。がん転移評価実験系として、重度免疫不全マウスであるNOGマウスに上記の細胞を尾静脈から移植し、その転移能の変化をFACSおよびHE染色により解析した。また、SDF-1/CXCR4シグナルによるがん細胞のactin重合促進作用についても、Phalloidin染色により解析した。その結果、細胞移植後30日以内にNOGマウスから肺を摘出し、ヒト細胞を分画・回収したところ、CD63dN導入細胞を移植したものにおいては、CXCR4の発現が持続的に抑制されていることが確認された。また、肺組織のHE染色解析から、CD63dN導入細胞を移植したNOGマウスでは、導入していない細胞を移植したものに比して、肺への転移が顕著に抑制されていた。さらに、Phalloidin染色により、CD63dN導入細胞では、actin重合が有意に抑制されることが確認された。現在までのところ、MDA-MB-231細胞以外のがん細胞においても、CD63dN導入によりその転移能が抑制されるという結果が得られている。CD63dN導入によるin vitroにおける細胞毒性は確認されていないことからも、この方法ががんの遺伝子治療において有用な方法の一つとなり得ると考える。