エフェクター前駆細胞へのHIV抑制因子の遺伝子導入による新たな治療法の開発

通过将 HIV 抑制基因导入效应祖细胞来开发新的治疗方法

• 批准号: 15019008
• 负责人: 小柳 義夫
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019008/
• 关键词: HIV; レンチウイルスベクター; エイズ; cDNAライブラリ; siRNA; CPE; CXCR4; CD14

HIVそのものを改良したレンチウイルスベクターはヒトTリンパ球へ遺伝子導入効率が優れている。このベクターを用いてHIVの増殖を抑制する遺伝子治療法を確立することを目的とした。今年度の成果はHIVのコレセプター分子であるCXCR4のmRNA発現を切断する小分子RNAであるsmall interfering RNA(siRNA)を発現するウイルスベクターを開発し、このベクターの導入により、HIVの感染を抑制できるようになったことである。さらに、ラムダファージインテグレースを利用した部位特異的組換え反応が可能なレンチウイルスベクター系を開発し、これを利用して効率よくcDNAライブラリを発現するレンチウィルスベクター実験系を確立した。そして、HIV感染よる細胞障害性を抑制する遺伝子の同定を試み、ヒト白血球cDNAライブラリよりCD14がその細胞障害性を強力に抑制することがわかった。今回のsiRNA発現レンチウイルスベクター、ならびに、cDNAライブラリ発現レンチウイルスベクターはいずれも新規のベクター系であり、さらに強力なHIVへの抑制活性を示す遺伝子導入系への改良が期待できる。また、レンチウイルスベクターは血液幹細胞を含んだ種々の細胞に遺伝子導入が可能であり、新規遺伝子治療法として期待されている。さらに、他の分子のsiRNAならびにCD14以外のHIV増殖性ならびに細胞障害性の長期的に抑制する遺伝子分離同定をめざしている。

HIV virus infection rate is improved by improving HIV infection rate. The aim of this study is to establish a strategy for the suppression of HIV proliferation. This year's results include hiv gene expression, cxcr4 mRNA expression, small interfering RNA(siRNA) expression, hiv gene initiation, hiv gene introduction, hiv infection suppression, and hiv gene expression inhibition. In this paper, the use of site-specific components of the gene expression system to develop and establish the gene expression system is described. HIV infection is strongly inhibited by inhibition of cellular damage caused by DNA sequencing, leukocyte cDNA sequencing, and CD14. The siRNA-based gene expression system is expected to improve the ability of siRNA expression systems to inhibit HIV activity. It is possible to introduce new gene therapy methods into blood stem cells, including seed cells. In addition, siRNAs for other molecules inhibit the proliferation of HIV other than CD14 and the long-term inhibition of cell damage.

项目成果

Miura Y, Koyanagi Y, Mizusawa H: "TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) induces neuronal apoptosis in HIV-encephalopathy."J.Med.Dental Sci.. 50・1. 17-25 (2003)

Miura Y、Koyanagi Y、Mizusawa H：“TNF 相关凋亡诱导配体 (TRAIL) 诱导 HIV 脑病中的神经元凋亡。”J.Med.Dental Sci.. 17-25 (2003)。

Ichiyama K, Yokoyama-Kumakura S, Tanaka Y, Tanaka R, Hirose K, Bannai K, Edamatsu T, Yanaka M, Niitani Y, Miyano-Kurosaki N, Takaku H, Koyanagi Y, Yamamoto N: "A duodenally absorbable CXC chemokine receptor 4 antagonist, KRH-1636, exhibits a potent and se

Ichiyama K、Yokoyama-Kumakura S、Tanaka Y、Tanaka R、Hirose K、Bannai K、Edamatsu T、Yanaka M、Niitani Y、Miyano-Kurosaki N、Takaku H、Koyanagi Y、Yamamoto N：“十二指肠可吸收 CXC 趋化因子受体

Miura Y, Misawa N, Kawano Y, Okada H, Inagaki Y, Yamamoto N, Ito M, Yagita H, Okumura K, Mizusawa H, Koyanagi Y: "Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand induces neuronal death in a murine model of HIV central nervous system infection."Pro

Miura Y、Misawa N、Kawano Y、Okada H、Inagaki Y、Yamamoto N、Ito M、Yagita H、Okumura K、Mizusawa H、Koyanagi Y：“肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在小鼠模型中诱导神经元死亡

Zahidunnai D M, Terashima K, Taruishi M, Hasegawa H, Ito M, Tanaka Y, Mori N, Sata T, Koyanagi Y, Okayama A, Fujii M, Yamamoto N: "Rapid tumor formation of human T-cell leukemia virus type 1-infected cell line in novel NOD/SCID/ gammac(null) mice(NOG) mic

Zahidunnai D M、Terashima K、Taruishi M、Hasekawa H、Ito M、Tanaka Y、Mori N、Sata T、Koyanagi Y、Okayama A、Fujii M、Yamamoto N：“人类 T 细胞白血病病毒 1 型的快速肿瘤形成

Suzuki Y, Misawa N, Sato C, Ebina H, Masuda T, Yamamoto N, Koyanagi Y: "Quantitative analysis of human immunodeficiency virus type 1 DNA dynamics by real-time PCR : Integration efficiency in stimulated and unstimulated peripheral blood mononuclear cells."

Suzuki Y、Misawa N、Sato C、Ebina H、Masuda T、Yamamoto N、Koyanagi Y：“通过实时 PCR 定量分析人类免疫缺陷病毒 1 型 DNA 动态：刺激和未刺激的外周血单核细胞的整合效率。”