肝細胞がんで過剰発現するガンキリンを標的とする抗がん剤の開発

开发针对肝细胞癌中过度表达的gankyrin的抗癌药物

• 批准号: 17016039
• 负责人: 藤田 潤
• 金额: $ 2.82万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17016039/
• 关键词: ガンキリン; 肝臓がん; p53; Rb; アポトーシス; Mdm2; 抗がん剤

ガンキリンは、肝細胞がん全例で発現が亢進しているがん遺伝子産物である。がん抑制蛋白質Rb、Cdk4、26SプロテアソームのサブユニットS6ATPアーゼ、MAGE-A4等と細胞内で複合体を形成する。さらに、Mdm2に結合してそのユビキチンリガーゼ活性を促進させることにより、がん抑制蛋白質p53の分解も促進する。本研究では、ガンキリンの発現抑制がどのようながんに対して治療効果を示す可能性があるか、ガンキリンは悪性形質の維持に必要かという点をあきらかにする。さらに、ガンキリンの構造に基づいた創薬のため、Mdm2あるいはS6とガンキリンとの複合体の構造を解明する。1.細胞内でガンキリンに対するRNAiを産生するプラズミド及びレトロウイルスを作成し、がん細胞株でガンキリンの発現を抑制した。p53が野生型である腫瘍細胞株でアポトーシスを誘導することが出来た。p53に変異がある場合及びp53の分解がMdm2非依存性に促進している腫瘍細胞株では抗腫瘍効果が弱かったが、有意な効果が得られた。これは、ガンキリンがMdm2結合を介して、p53だけではなくRbの分解をも促進しており、その抑制による抗腫瘍効果であろうと考えた。2.ヒトのいろいろながん組織のRNAをブロットしたものを購入してノーザンブロットを行った。さらにガンキリンの発現状態を免疫組織化学的に調べられるように、モノクローナル抗体を作成し、組織アレーによりいろいろながん組織での発現を解析した。3.Mdm2と結合するガンキリン部位の構造をX線結晶解析で明らかにし、阻害剤をデザインするため、Mdm2断片を大腸菌や昆虫細胞で発現させた。ガンキリンとの共結晶化を試みている。4.肝細胞特異的にガンキリンを過剰発現させるトランスジェニックマウスを作成し、ヘテロを3系統得た。現在観察中である。

ガ ン キ リ ン は, liver cell が ん all cases で 発 now が hyperthyroidism し て い る が ん heritage 伝 zi chan content で あ る. が ん inhibit protein Rb, Cdk4, 26 s プ ロ テ ア ソ ー ム の サ ブ ユ ニ ッ ト S6ATP ア ー ゼ, MAGE - A4 で complex を と cell formation す る. さ ら に, Mdm2 に combining し て そ の ユ ビ キ チ ン リ ガ ー を ゼ promote さ せ る こ と に よ り, が ん inhibit protein p53 の decomposition も promote す る. This study で は, ガ ン キ リ ン の 発 now inhibit が ど の よ う な が ん に し seaborne て treatment services fruit を す possibility in が あ る か, ガ ン キ リ ン は 悪 sexual character の maintain に necessary か と い う point を あ き ら か に す る. さ ら に, ガ ン キ リ ン の に basis づ い た gen 薬 の た め, Mdm2 あ る い は S6 と ガ ン キ リ ン と の complex の tectonic を interpret す る. 1. The intracellular で ガ ン キ リ ン に す seaborne る RNAi を produce す る プ ラ ズ ミ ド and び レ ト ロ ウ イ ル ス を し, consummate が ん cell lines で ガ ン キ リ ン の 発 を inhibit し now た. p53が wild-type である abscess cell line でアポト が シスを induces する とが とが とが とが to た. P53 に - different が あ る occasions and び p53 の decomposition が Mdm2 non dependency に promote し て い る swollen sores cell lines で は resistance swollen sores unseen fruit が weak か っ た が, intentionally な fruit comes unseen が ら れ た. こ れ は, ガ ン キ リ ン が Mdm2 combining を interface し て, p53 だ け で は な く Rb の decomposition を も promote し て お り, そ の inhibit に よ る resistance swollen sores unseen fruit で あ ろ う と exam え た. 2. ヒ ト の い ろ い ろ な が ん organization の RNA を ブ ロ ッ ト し た も の を buy し て ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト を line っ た. さ ら に ガ ン キ リ ン の 発 now state を immunohistochemical に adjustable べ ら れ る よ う に, モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody を made し, organization ア レ ー に よ り い ろ い ろ な が ん organization で の 発 now を parsing し た. 3. Mdm2 と combining す る ガ ン キ リ ン の structure analytical で を X-ray crystal bright ら か に し, resistance against tonic を デ ザ イ ン す る た め, Mdm2 fragment を coliform や insect cell で 発 now さ せ た. Youdaoplaceholder0 キリ キリ と と <s:1> co-crystallization を try みて る る る. 4. Hepatocellular specific にガ, キリ, キリ, を overoccur させるトラ, スジェニッ, スジェニッ, ウスを ウスを to form the <s:1>, ヘテロを3 system た. Now 観 cha zhong である.

项目成果

The oncoprotein gankyrin negatively regulates both p53 and RB by enhancing proteasomal degradation

• DOI: 10.4161/cc.4.10.2107
• 发表时间: 2005-10-01
• 期刊: CELL CYCLE
• 影响因子: 4.3
• 作者: Higashitsuji, H;Liu, Y;Fujita, J
• 通讯作者: Fujita, J

The oncoprotein gankyrin binds to MDM2/HDM2, enhancing ubiquityration and degradation of p53.

癌蛋白 gankyrin 与 MDM2/HDM2 结合，增强 p53 的泛素化和降解。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Cancer Cell 8・1
• 作者: Nakata H;et al.;Higashitsuji H
• 通讯作者: Higashitsuji H

Gankyrin : ubiquitin-dependent proteolysis and major tumour suppressors.

Gankyrin ：泛素依赖性蛋白水解和主要肿瘤抑制因子。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Trends in Cell Biology (印刷中)
• 作者: F.D.Mahmoud;C.Ogino;S.Matsumura;N.Shimizu;Watanabe H;Sakurai T;Higashitsuji H
• 通讯作者: Higashitsuji H

Low temperature protects mammalian cells from apoptosis initiated by various stimuli in vitro

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2005.06.002
• 发表时间: 2005-10-01
• 期刊: EXPERIMENTAL CELL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Sakurai, T;Itoh, K;Fujita, J
• 通讯作者: Fujita, J

ガンキリンの発現抑制による悪性腫瘍の増抑制

通过抑制 gankyrin 表达来抑制恶性肿瘤生长

• 发表时间: 2005