γ-セクレターゼの阻害剤の探索と光アフィニティーラベル法による構造解析

利用光亲和标记法寻找γ-分泌酶抑制剂并进行结构分析

• 批准号: 15016026
• 负责人: 菅 敏幸
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15016026/
• 关键词: アルツハイマー病; β-アミロイド; γ-セクレターゼ; DAPT; コンビナトリアル合成; 合成ライブラリー; 光アフィニティーラベル; クロスリンク実験

アルツハイマー病の発症の要因であるβ-アミロイド(amyloid β-protein, Aβ)は、前駆体タンパク(amyloid precursor protein, APP)のβ-セクレターゼ及びγ-セクレターゼによる2段階の切断を受けて生成することが知られている。これらセクレターゼに対する強力な阻害剤はアルツハイマー病治療薬として期待される。本研究は、多様なγ-セクレターゼ阻害剤の合成とその合成化合物を用いた機能の解明を目指している。強力なγ-セクレターゼ阻害剤として知られるDAPTをリード化合物として選択し、部分構造を可変した化合物を検討したところ、C端のブチルエステル部分をアミドにしたものには活性が保持されることがわかった。その結果を基にして、我々が独自に開発した固相を活用したコンビナトリアル合成へと展開した。合成ライブラリーの活性評価の結果、ベンゾフェノンアミドとした化合物は活性がDAPTの10〜100倍程度増強されることが明らかとなった。この結果により光アフィニティーラベル研究への展開も可能となった。すなわち、ベンゾフェノン基は光照射により近傍の官能基とクロスリンクが容易なため、光アフィニティーラベルの親和性基としても多用されている。さらに、我々はリガンド分子に光親和性基とビオチンタグを簡便に導入する新規合成方法論を独自に開発することで、DAPT誘導体の光アフィニティープローブ合成に成功した。現在、膜蛋白各分(γ-セクレターゼ)とのクロスリンク実験の結果、22Kdaの蛋白の検出を達成している。

ア ル ツ ハ イ マ ー disease の の 発 disease by で あ る beta ア ミ ロ イ ド (amyloid beta protein, A beta) は, former 駆 タ ン パ ク (amyloid we protein, APP) の beta セ ク レ タ ー ゼ and び gamma セ ク レ タ ー ゼ に よ る 2 paragraph order の cut を け て generated す る こ と が know ら れ て い る. こ れ ら セ ク レ タ ー ゼ に す seaborne る powerful な resistance against tonic は ア ル ツ ハ イ マ ー disease treatment 薬 と し て expect さ れ る. は, many others in this study な gamma セ ク レ タ ー ゼ resistance against tonic の synthetic と そ の を synthetic compounds with い た function の interpret を refers し て い る. Powerful な gamma セ ク レ タ ー ゼ resistance against tonic と し て know ら れ る DAPT を リ ー ド compound と し て sentaku し, partial tectonic を can - し た compound を beg し 検 た と こ ろ, C end の ブ チ ル エ ス テ ル part を ア ミ ド に し た も の に は activity was が さ れ る こ と が わ か っ た. そ の results を に し て, I 々 が に alone open 発 し た solid-phase を use し た コ ン ビ ナ ト リ ア ル synthetic へ と expand し た. Synthetic ラ イ ブ ラ リ ー の activity evaluation 価 の results, ベ ン ゾ フ ェ ノ ン ア ミ ド と し た compound は active が DAPT の 10 to 100 times the level raised strong さ れ る こ と が Ming ら か と な っ た. The <s:1> によ results of the によ によ light アフィニティ アフィニティ ラベ ラベ へ study へ へ development アフィニティ may be となった. す な わ ち, ベ ン ゾ フ ェ ノ ン base は light に よ り nearly alongside の functionality と ク ロ ス リ ン ク が easy な た め, light ア フ ィ ニ テ ィ ー ラ ベ ル の affinity base と し て も multi-purpose さ れ て い る. さ ら に, I 々 は リ ガ ン ド molecule に light affinity と ビ オ チ ン タ グ を simple に import す る を に alone open new rules synthesis methodology 発 す る こ と で, DAPT induced の light ア フ ィ ニ テ ィ ー プ ロ ー ブ synthetic に successful し た. It and membrane protein (gamma セ ク レ タ ー ゼ) と の ク ロ ス リ ン ク be 験 の results, 22 kda protein の の 検 out を reached し て い る.

项目成果

T.Kan et al.: "An Efficient Synthesis of Optically Active trans-2-Aryl-2,3 -dihydrobenzofuran-3 -carboxylic Acid Esters via C-H Insertion Reaction"Synlett. 1028 (2003)

T.Kan 等人：“通过 C-H 插入反应高效合成光学活性反式-2-芳基-2,3-二氢苯并呋喃-3-羧酸酯”Synlett。

T.Kan et al.: "Ns Strategies: A Highly Versatile Synthetic Method for Amines"Chem Commun. 353 (2004)

T.Kan 等人：“Ns 策略：一种高度通用的胺合成方法”Chem Commun。

T.Kan et al.: "Solid-Phase Synthesis of Photoaffinity Probes: Highly Efficient Incorporation of Biotin-tag and Cross-linking group."Chem Commun. 2244 (2003)

T.Kan 等人：“光亲和探针的固相合成：生物素标签和交联基团的高效掺入。”Chem Commun。

T.Kan: "Total Synthesis of Potent Antitumor Alkaloid Ecteinascidin 743."J.Syn.Org.Chen., Jpn,. 61. 949 (2003)

T.Kan：“强效抗肿瘤生物碱 Ecteinascidin 743 的全合成”。J.Syn.Org.Chen.，Jpn，。

T.Kan et al.: "Sulindac sulfide is a non-competitive g-secretase inhibitor that preferentially reduces Ab42 generation"J.Bio.Chem.. 278. 18664 (2003)

T.Kan 等人：“Sulindac sulfide 是一种非竞争性 g-分泌酶抑制剂，优先减少 Ab42 的产生”J.Bio.Chem.. 278. 18664 (2003)