活性酸素消去酵素の細胞選択的ターゲティング・遺伝子導入によるがん転移抑制

通过细胞选择性靶向活性氧清除酶和基因转移抑制癌症转移

• 批准号: 15025233
• 负责人: 橋田 充
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025233/
• 关键词: 癌転移; 活性酵素消去酵素; マトリックスメタロプロテアーゼ; デリバリー; カタラーゼ; ルシフェラーゼ; マクロファージ

カタラーゼ(CAT)の標的部位選択的デリバリーによる癌転移抑制メカニズムの解明ならびに癌転移治療法の確立を目的として、マウスメラノーマ細胞B16-BL6にホタルルシフェラーゼ遺伝子をコードしたプラスミドDNAを導入することにより、ルシフェラーゼを安定に発現する癌細胞株B16-BL6/Lucを作成した。作成した癌細胞株のルシフェラーゼ活性を指標に、定量的かつ速度論的に評価可能な新規癌転移解析法を開発し、CAT誘導体による転移抑制機構の解明ならびに治療効果の増大を試みた。B16-BL6/Luc細胞をマウスfootpadに移植し、肺への遠隔転移を生じる自然転移モデルにおいて、投与24時間後にはすでに肺中に癌細胞が検出され、その数は経時的に増大した。このとき、癌原発部位を切除することにより肺微小転移巣の癌細胞の急激な増殖が認められたが、癌原発部位切除直前にCAT誘導体、特に血中滞留型PEG-CATの投与により著明な癌細胞増殖抑制効果が認められた。癌原発巣の切除により、異所腫瘍組織での血管新生は亢進したが、これもPEG-CAT投与により顕著に抑制された。また、培養したマウス結腸癌細胞colon26とマウスから採取した肝実質細胞およびマクロファージとを共培養することで、マクロファージから大量の活性酸素が生成することが示され、これに伴い肝実質細胞がMMP-9を過剰に産生することが明らかとなった。このとき、CATを添加することでMMP活性の上昇は著しく抑制された。

The cancer cell line B16-BL6/Luc was established for the purpose of establishing a cancer metastasis therapy method for the selection of target sites of CAT. To establish a new method for evaluating the activity of tumor cell lines, quantitative analysis of tumor migration, development of CAT inducer, analysis of migration inhibition mechanism, and enhancement of therapeutic effects. B16-BL6/Luc cells were transplanted to the footpad, lung metastasis occurred naturally, and cancer cells in the lung were detected and increased 24 hours after implantation. The expression of CAT inducer and PEG-CAT specifically retained in the blood was detected by detecting the effect of tumor cell proliferation inhibition in lung micrometastasis. The angiogenesis of tumor tissue was stimulated and inhibited by PEG-CAT. Colon26 cells were cultured and co-cultured with hepatic stromal cells to produce a large amount of active acid. MMP-9 was produced by hepatic stromal cells. The increase of MMP activity was inhibited by the addition of CAT.

项目成果

S.Fumoto et al.: "Analysis of hepatic disposition of native and galactosylated polyethyleneimine complexed with plasmid DNA in perfused rat liver"Drug Metab.Pharmacokin.. 18(4). 230-237 (2003)

S.Fumoto 等人：“在灌注大鼠肝脏中与质粒 DNA 复合的天然和半乳糖基化聚乙烯亚胺的肝脏分布分析”Drug Metab.Pharmacokin.. 18(4)。

S.Fumoto et al.: "Analysis of hepatic disposition of galactosylated cationic liposome/plasmid DNA complexes in the rat perfused liver"Pharm.Res.. 20(9). 1452-1459 (2003)

S.Fumoto 等人：“大鼠灌注肝脏中半乳糖基化阳离子脂质体/质粒 DNA 复合物的肝脏分布分析”Pharm.Res.. 20(9)。

C.Managit et al.: "Targeted and sustained drug delivery using PEGylated galactosylated liposomes"Int.J.Pharm.. 266. 77-84 (2003)

C.Managit 等人：“使用聚乙二醇化半乳糖基化脂质体进行靶向和持续药物递送”Int.J.Pharm.. 266. 77-84 (2003)

M.Nishikawa et al.: "Residualizing indium-111-radiolabel for plasmid DNA and its application to tissue distribution study"Bioconjugate Chem.. 14(5). 955-961 (2003)

M.Nishikawa 等人：“质粒 DNA 的 Indium-111-radiolabel 残留及其在组织分布研究中的应用”Bioconjugate Chem.. 14(5)。

K.Morimoto et al.: "Molecular weight-dependent gene transfection activity of unmodified and galactosylated polyethyleneimine on hepatoma cells and mouse liver"Mol.Ther.. 7(2). 254-261 (2003)

K.Morimoto 等人：“未修饰和半乳糖基化聚乙烯亚胺对肝癌细胞和小鼠肝脏的分子量依赖性基因转染活性”Mol.Ther.. 7(2)。