トランスポゾンを用いたin vivo遺伝子発現長期化による新規慢性疾患療法の開発
通过使用转座子延长体内基因表达来开发新型慢性病疗法
基本信息
- 批准号:21659008
- 负责人:
- 金额:$ 1.92万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2010
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
昨年度、哺乳類において目的遺伝子のゲノムへの組込みが可能なプラスミドベクターの構築を目的に、piggy bacトランスポゾン認識配列内に目的遺伝子を有するドナーベクターおよびドナーベクターからの目的遺伝子の切り出しおよびゲノムへの組込みに関与するトランスポザーゼを発現するヘルパーベクターをそれぞれ構築した。本年度は、piggy bacトランスポゾンのアデノウイルやPCR産物によるベクター作成の可能性を検討するため、環状プラスミドDNAを切断またはPCRにより作成した直鎖状および環状のベクターを構築し、ヒト由来細胞HEK293細胞を用いてpiggy bacトランスポゾンによるゲノムへの組み込みにおけるベクターの形状の影響を評価した。その結果、いずれの直鎖状ベクターの場合も環状ベクターと比較するとゲノムへの組込みは極めて低かった。また、遺伝子発現効率が低い事が知られている初代培養系の細胞におけるpiggy bacトランスポゾンによるゲノムへの組込みの確認を目的に、EmGFP発現遺伝子を搭載したドナーベクターを新たに作成し、初代培養細胞間葉系幹細胞を用いてゲノムへの組込みが可能であることを確認した。さらに、ドナープラスミドおよびヘルパープラスミドが同一細胞内で作用する効率の増大により、ゲノムへの組込み可能な細胞数を増加させることを目的に1つのプラスミドにpiggy bacトランスポゾン認識配列内に目的遺伝子を有する配列とトランスポザーゼの配列を同時に有するベクターを作成し、HEK293培養細胞およびマウスにおいて効率よく遺伝子組込みが起こることを確認した。以上、哺乳類においてpiggy bacトランスポゾンにより目的遺伝子のゲノムへの組込みが可能であることを明らかにし、更にpiggy bacトランスポゾンの応用展開を目指したベクター設計に有益な情報を得ることができた。
In the past year, mammals have been able to identify target genes in the target gene set and construct target genes in the target gene set, piggy bac, and recognize target genes in the target gene set. This year, we will discuss the possibility of making piggy bac DNA fragments and PCR products, and evaluate the influence of DNA fragments and PCR products on the structure of piggy bac DNA fragments and PCR products. The result is that when you are in the middle of the game, you are in the middle of the game, and you are in the middle of the game. In addition, the efficiency of gene expression was low. In addition, the efficiency of gene expression was high. In addition, the efficiency of gene expression In addition, the number of cells in the same cell can be increased, and the number of cells in the same cell can be increased. The number of cells in the same cell can be increased. HEK293 culture medium The above, mammals in the piggy bac category, piggy bac category.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
piggyBac transposon-mediated long-term gene expression in mice.
- DOI:10.1038/mt.2009.302
- 发表时间:2010-04
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
長期発現に向けたpiggyBacトランスポゾン導入ベクター設計の最適化
用于长期表达的piggyBac转座子导入载体设计的优化
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:中西秀之;樋口ゆり子;川上茂;山下富義;橋田充
- 通讯作者:橋田充
piggyBacトランスポゾンを用いたEmGFP長期発発現骨髄由来間葉系幹細胞の構築
使用piggyBac转座子构建表达长期EmGFP的骨髓间充质干细胞
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:奥村聡子;樋口ゆり子;橋田充;他
- 通讯作者:他
piggyBacトランスポゾンを用いた遺伝子発現持続化における線状・環状DNA間の比較
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- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:中西秀之;樋口ゆり子;橋田充;他
- 通讯作者:他
幹細胞の蛍光標識法の開発とin vivoイメージングへの応用
干细胞荧光标记方法的开发及其在活体成像中的应用
- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:M.Wada;M.Kira;H.Kido;R.Ikeda;N.Kuroda;T.Nishigaki;K.Nakashima;水口峰之;土井龍輔;樋口ゆり子
- 通讯作者:樋口ゆり子
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$ 1.92万 - 项目类别:
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$ 1.92万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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13877396 - 财政年份:2001
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- 批准号:
12217069 - 财政年份:2000
- 资助金额:
$ 1.92万 - 项目类别:
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プラスミドDNA/キトサン/コンドロイチン硫酸三元複合体による遺伝子デリバリー
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12J03905 - 财政年份:2012
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- 批准号:
03917005 - 财政年份:1991
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- 资助金额:
$ 1.92万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (B)