NFκB活性化抑制に基づく新しい臓器移植における拒絶抑制法の開発

开发基于抑制NFκB激活的抑制器官移植排斥反应的新方法

• 批准号: 17659046
• 负责人: 橋田 充
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659046/
• 关键词: NFκB; 移植片拒絶; 遺伝子デリバリー; NFκBデコイ; ターゲティング; 炎症性サイトカイン; Kupffer細胞; リポソーム

移植治療において移植片の成着率およびレシピエントの生死を決定する移植片拒絶においてサイトカインの過剰産生は非常に重要な役割を果たすことが知られている。本研究の目的は、サイトカイン産生の分子メカニズムに基づきNFκBの活性化抑制によりサイトカイン産生制御による移植片拒絶抑制法を開発することである。本年度は、昨年開発したキャリア、フコース修飾カチオン性リポソーム(Fucリポソーム)を用いてin vivoでのNFκB活性化抑制およびサイトカイン産生抑制効果を評価した。まず、LPS投与により作成したin vivo NFκB活性化モデルマウスに、FucリポソームとNFκBデコイの複合体を静脈内投与したところ、標的臓器である肝臓の核内NFkBの有意な増加抑制が認められた。さらに、NFκBデコイ単独投与または、非修飾カチオン性リポソームとの複合体を投与した場合と比較し、NFκB活性化に引き続き起こる血清中サイトカイン濃度(TNFα、IFNγ、IL1β)の上昇および肝炎の指標である血清中のALT、AST濃度の上昇を有意に抑制した。そこで移植片拒絶において重要なサイトカイン産生細胞である抗原提示細胞へのデリバリーを目的にFucリポソームと同様の方法でマンノース修飾リポソーム(Manリポソーム)を作成した。腹部異所性心移植モデルラットを作成し、ManリポソームとNFκBデコイ複合体を投与したところ、血清中および移植心組織中のサイトカイン上昇を有意に抑制した。さらに、NFκB活性化の指標となるNFκB1の増加抑制をmRNAレベルで確認した。また、移植心における白血球の浸潤をMPOの免疫染色により確認したところ、有意な浸潤抑制が認められた。以上、ManリポソームによるNFκBデコイのNFκB抗原提示細胞選択的送達は移植片拒絶抑制において有用なキャリアとなりえることが示唆された。

The success rate of grafts is very important in terms of survival rate, life and death rate. The purpose of this study is to induce the activation of NF κ B gene, which is the target gene of biogenic molecules. In this study, we use the method of inhibition to prevent the production of bioactive grafts. Since the beginning of this year and last year, we have started to use in vivo activation NF κ B activation to reduce the incidence of severe acute respiratory syndrome (Fuc). This year and last year, we started this year and last year, and we have been able to improve the effectiveness of this year. The activation of in vivo NF κ B, the activation of NF κ B, the activation of NF κ B, the induction of NF κ B, the intravenous injection of the complex, and the inhibition of NFkB in the nucleus of the liver. Anti-hepatitis, NF κ B, anti-hepatitis, hepatitis, The grafts refused to be grafted because they were important. The antigens indicated that the grafts were born. The antigens indicated that the aim was to Fuc the grafts. The method was the same. The method was the same as that of the grafts. The method was the same as that of the grafts. The method was to correct the Man cells. The abdominal heart transplantation was successfully established, and the NF κ B gene complex was implanted into the abdominal heart transplantation tissue. The NF κ B gene was implanted into the heart tissue, and the heart graft tissue was intentionally suppressed. Activation of NF κ B refers to the activation of NF κ B1 plus inhibition of mRNA activation. After transplantation, white blood cells were impregnated with MPO immunostaining, and intentionally immersed and suppressed by immunostaining. The above, Man antigen, NF κ B antigen indicated that the selected graft refused to inhibit the graft, and that it was useful to use it.

项目成果

In vivo gene transfer by ligand-modified gene carriers

通过配体修饰的基因载体进行体内基因转移

• 发表时间: 2005
• 作者: Nanako Ishimoto et al.;Takeshi Terada et al.;Yuriko Higuchi et al.;Y.Higuchi et al.;W.Yeeprae;C.Managit;S.Kawakami
• 通讯作者: S.Kawakami

Intracellular distribution of NFkappaB decoy and its inhibitory effect on TNFalpha production by LPS stimulated RAW 264.7 cells.

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society
• 作者: Y. Higuchi;S. Kawakami;M. Nishikawa;F. Yamashita;M. Hashida

Improved anti-oxidant activity of superoxide dismutase by direct chemical modification.

• DOI: 10.1016/j.jconrel.2005.12.005
• 发表时间: 2006-03
• 期刊: Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society
• 作者: N. Ishimoto;Takayuki Nemoto;Keiko Nagayoshi;F. Yamashita;M. Hashida

Analysis of the molecular interaction between mannosylated proteins and serum mannan-binding lectns

甘露糖化蛋白与血清甘露聚糖结合凝集素之间的分子相互作用分析

• 发表时间: 2006
• 期刊: International Journal of Pharmaceutics 316(1-2)
• 作者: Nanako Ishimoto et al.;Takeshi Terada et al.
• 通讯作者: Takeshi Terada et al.

Suppression of TNFa production in LPS induced liver failure mice after intravenous injection of cationic liposome/NFkB decoy complex

静脉注射阳离子脂质体/NFkB诱饵复合物后LPS诱导的肝衰竭小鼠TNFa产生的抑制

• 发表时间: 2006
• 期刊: Pharmazie 61(2)
• 作者: Nanako Ishimoto et al.;Takeshi Terada et al.;Yuriko Higuchi et al.
• 通讯作者: Yuriko Higuchi et al.