口腔疾患に関わるストレスシグナル解明への遺伝学的アプローチ

阐明与口腔疾病相关的应激信号的遗传学方法

• 批准号: 20249074
• 负责人: 一條 秀憲
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20249074/
• 关键词: p38; ストレス; 線虫

本研究は、我々がこれまで携わってきたストレス応答キナーゼに関する研究手法ならびに研究成果をもとに、線虫C.elegansならびにショウジョウバエS2細胞を用いた遺伝子探索によってストレス応答を制御する新たなリン酸化シグナル経路を見出し、マウスを用いた口腔発がん系ならびに粘膜自然免疫系での検証までを行うことで、ストレス応答異常をターゲットとした口腔疾患の新たな予防、診断、治療法の基盤開発を目指すものである。本年度は(1)線虫におけるp38活性検出系の構築、(2)p38活性刺激および刺激条件の検討、(3)ショウジョウバエS2細胞におけるp38活性検出系の構築の3項目について研究を開始し、それぞれ、(1)転写因子CHOPの転写活性化領域(CHOP-TA)と、酵母由来の転写因子GAL4のDNA結合領域(GAL4-BD)との融合タンパク質と、GAL4結合DNA配列の下流にGFP遺伝子を繋いだレポーター遺伝子をあらかじめ細胞に発現させる系の構築、(2)MMSに加えて、マウスの口腔発がんモデルに用いる4-nitroquinoline 1-oxide(4-NQO)が培養細胞や線虫でのp38活性検出系において有効であることの検討、(3)線虫での検出系のバックアップとして、哺乳類細胞よりはるかに効率よくRNAi法による遺伝子ノックダウンが可能であるショウジョウバエS2細胞におけるp38活性検出系の構築を行った。

This study is aimed at exploring new ways to control the development of oral cavity and mucosal natural immune system through the use of C.elegans in S2 cells. A new approach to prevention, diagnosis and treatment of oral diseases This year, we started three research projects: (1) construction of p38 activity assay system for mitochondrial DNA;(2) investigation of p38 activity stimulation and stimulation conditions;(3) construction of p38 activity assay system for S2 cells;(1) construction of CHOP activity domain (CHOP-TA); construction of DNA binding domain (GAL4-BD); and fusion of GAL4. Construction of a Cell Development System for GFP Gene in the Downstream of GAL4 Binding DNA Alignment;(2) Development of a Cell Development System for MMS Addition and Use of 4-Nitroquinoline 1-oxide(4-NQO) in Cultured Cells;(3) Development of a Cell Development System for Xanthozoa; Construction of p38 activity expression system in mammalian cells by RNAi method