口腔疾患に関わるストレスシグナル解明への遺伝学的アプローチ

阐明与口腔疾病相关的应激信号的遗传学方法

基本信息

批准号：
20249074
负责人：
一條秀憲
金额：
$ 11.23万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20249074/
关键词：
p38 ストレス線虫

项目摘要

本研究は、我々がこれまで携わってきたストレス応答キナーゼに関する研究手法ならびに研究成果をもとに、線虫C.elegansならびにショウジョウバエS2細胞を用いた遺伝子探索によってストレス応答を制御する新たなリン酸化シグナル経路を見出し、マウスを用いた口腔発がん系ならびに粘膜自然免疫系での検証までを行うことで、ストレス応答異常をターゲットとした口腔疾患の新たな予防、診断、治療法の基盤開発を目指すものである。本年度は(1)線虫におけるp38活性検出系の構築、(2)p38活性刺激および刺激条件の検討、(3)ショウジョウバエS2細胞におけるp38活性検出系の構築の3項目について研究を開始し、それぞれ、(1)転写因子CHOPの転写活性化領域(CHOP-TA)と、酵母由来の転写因子GAL4のDNA結合領域(GAL4-BD)との融合タンパク質と、GAL4結合DNA配列の下流にGFP遺伝子を繋いだレポーター遺伝子をあらかじめ細胞に発現させる系の構築、(2)MMSに加えて、マウスの口腔発がんモデルに用いる4-nitroquinoline 1-oxide(4-NQO)が培養細胞や線虫でのp38活性検出系において有効であることの検討、(3)線虫での検出系のバックアップとして、哺乳類細胞よりはるかに効率よくRNAi法による遺伝子ノックダウンが可能であるショウジョウバエS2細胞におけるp38活性検出系の構築を行った。

基于我们参与压力反应激酶的研究方法和研究结果，该研究旨在为针对新的预防，诊断和治疗口腔疾病的新基础，通过发现新的磷酸化信号途径，通过发现新的磷酸化信号途径，从而通过搜索基因并使用elegantate Carcote and elemante Carcote and或Drosophila s2细胞来搜索基因，并通过发现新的磷酸化信号途径，以及使用小鼠。 This year, we have begun research into three categories: (1) Construction of a detection system of p38 activity in nematodes, (2) Studying p38 activity and stimulation conditions, and (3) Construction of a detection system of p38 activity in Drosophila S2 cells, and respectively, (1) Construction of a fusion protein of the transcriptional activation region (CHOP-TA) of the transcription factor GAL4 and the DNA binding region （GAL4-BD）的（GAL4-BD）的转录因子GAL4，以及一个系统，该系统将GAL4结合DNA序列下游连接GFP基因连接的记者基因提前在细胞中表达，（2）除MMS外，我们还使用用于小鼠模型的4-硝基喹啉。我们研究了1-氧化物（4-NQO）在培养的细胞和线虫中p38活性检测系统中的有效性，（3）作为线虫中检测系统的备份，我们在drosophila S2细胞中构建了p38活性的检测系统，可用于通过rnai方法来击倒基因的drosophila S2细胞，而不是效率更高。