Exportproteine in der Blut-Hirn Schranke und ihre Bedeutung für die Wirkung ZNS-aktiver Wirkstoffe

血脑屏障中的输出蛋白质及其对中枢神经系统活性物质作用的重要性

• 批准号: 5098572
• 负责人: Professor Dr. Gert Fricker
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung Pharmazeutische Technologie und Biopharmazie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1997-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5098572?language=en
• 关键词: Exportproteine; der; Blut; Hirn; Schranke

Die Durchlässigkeit des cerebralen Kapillarendothels (Blut- Hirn-Schranke) ist eine wichtige Determinante für die ZNS-Aktivität vieler Arzneistoffe. Dabei leisten die zellulären ABC (ATP-Binding-Cassette) Exportproteine p-Glycoprotein (p-gp, mdr1) und Subtypen des multidrug-resistance-related-Proteins (mrp) einen wesentlichen Beitrag zur Permeabilität von Arznei- stoffen. In isolierten, kultivierten Kapillarendothelzellen konnten wir p-gp, sowie mrp1 und mrp2 molekular und funktionell nachweisen. Der Expressionsgrad dieser Proteine in vivo wird in der Literatur kontrovers diskutiert. Deshalb soll in einem neuen Modell isolierter, morphologisch und funktionell intakter Kapillargefäße aus Schweinehirn die Expression und Funktion dieser Proteine bestimmt werden. Mit fluoreszenzmarkierten, selektiven Substraten wird die Funktion der einzelnen Proteine mittels konfokaler Fluoreszenzmikroskopie untersucht. Mit Hilfe spezifischer Antikörper, bzw. Primär wird der Expressionsgrad der einzelnen Proteine durch Western-Blot Analyse, quantitative RT-PCR von Genmaterial aus Kapitaleren und kultivierten Zellen in verschiedenen Kultivierungsstadien gemessen. Weiterhin wird mittels spezifischer Antikörper und funktioneller Assays an Kapillaren und isolierten Zellern das Vorhandensein weiterer ABC-Proteine (z. B. s-pgp; sister of p-Glycoprotein) in der BlutHirn-Schranke untersucht.

Die Durchlässigkeit des Brain Kapillarendothels (Blut- Hirn-Schranke) 是 ZNS 活动的决定因素。 Dabei leisten die zellulären ABC (ATP-Binding-Cassette) Exportp-糖蛋白 (p-gp, mdr1) 和多药耐药相关蛋白亚型 (mrp) einen wesentlichen Beitrag zur Permeabilität von Arzneistoffen。在 isolierten 中，kultivierten Kapillarendothelzellen konnten wir p-gp，sowie mrp1 和 mrp2 分子和功能 nachweisen。文献中讨论了体内蛋白质的表达。在新的模型分离器、形态学和功能完整中，我们将展示蛋白质最佳的表达和功能。通过荧光标记，可以选择与荧光微镜相关的蛋白质功能的底物。 Mit Hilfe spezifischer Antikörper，bzw。在蛋白质印迹分析、定量 RT-PCR 中使用 Genmaterial 和 Zellen 进行蛋白质印迹分析的初级技术。 Weiterhin wird mittels spezifischer Antikörper und funktioneller Assays an Kapillaren und isolierten Zellern das Vorhandensein weiterer ABC-Proteine (z. B. s-pgp; p-糖蛋白的姐妹) in der BlutHirn-Schranke untersucht.