赤血球分化に関する情報伝達分子の探索と機能解析

红系分化相关信息转导分子的搜寻及功能分析

• 批准号: 09878164
• 负责人: 吉村 昭彦
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09878164/
• 关键词: エリスロポエチン; JAK2; STAT5; SH2ドメイン; りん酸化; 情報伝達; チロシンキナーゼ; 分化

我々は赤芽球様細胞ELM-1を用いてエリスロポエチン(EPO)による赤血球分化の研究を行っている。この細胞はEPOによりヘモグロビン陽性にまで成熟し、IL3はそれ自体では分化は誘導しないもののEPOによる赤血球分化を促進する。我々はEGF受容体とEPO受容体のキメラ分子を作成し、さら受容体のチロシン残基に変異を導入することで受容体細胞内ドメインの2つのチロシン残基(Y343、Y401)のいずれかが赤血球分化に必須であることを証明した。これら2つのチロシン残基はSTAT5の活性化に必要であり、STAT5と分化は密接に関連していることが考えられた。しかしながらIL3受容体やプロラクチン受容体とのキメラ作成して本細胞に導入したところ、これらのキメラ分子はSTAT5を活性化するもののこの細胞の赤血球分化は誘導しないことを明らかにした。したがってIL3受容体になくEPO受容体に特異的な分化シグナルが存在し、STAT5とともに分化の促進に働くと考えのが自然であろう。そしてそのシグナルの発生にはEPO受容体Y343、Y401のいずれかのりん酸化が必要であることが示唆される。現在この2つのリン酸化チロシン残基と会合する情報伝達分子をクローニングすべくりん酸化ペプチドによる精製と酵母two-hybrid法によるスクリーニングを行っている。またJAK2の新しい基質となりうる分子APS(adaptor contatining PH and SH2 domain)をクローニングしており今後エリスロポエチンシグナルにおける役割を明らかにしたい。

I conducted a を study on を lines of って る る る of る red blam-like cells ELM-1を using <s:1> てエリスロポエチ <e:1> (EPO)による red blood cell differentiation <e:1>. こ の cells は EPO に よ り ヘ モ グ ロ ビ ン positive に ま で mature し, IL3 は そ れ autologous で は は differentiation inducing し な い も の の EPO に よ る を promote red blood cell differentiation す る. I 々 は EGF is let body と EPO is let body の キ メ ラ molecular を し, consummate さ ら by let body の チ ロ シ ン residues に - different を import す る こ と で within let somatic ド メ イ ン の 2 つ の チ ロ シ ン residues (Y343, Y401) の い ず れ か が red blood cell differentiation に must で あ る こ と を prove し た. こ れ ら 2 つ の チ ロ シ ン residues は STAT5 の activeness に necessary で あ り, STAT5 と differentiation は contact に masato even し て い る こ と が exam え ら れ た. し か し な が ら IL3 is let body や プ ロ ラ ク チ ン by let body と の キ メ ラ made し て in this cell に import し た と こ ろ, こ れ ら の キ メ ラ molecular は STAT5 を activeness す る も の の こ の cells の は red blood cell differentiation induced し な い こ と を Ming ら か に し た. し た が っ て IL3 is let body に な く EPO let body に specific な diversifies シ グ ナ ル が し, STAT5 と と も に の promote differentiation に 働 く と exam え の が natural で あ ろ う. そ し て そ の シ グ ナ ル の 発 raw に は EPO let body Y343, Y401 の い ず れ か の り ん acidification が necessary で あ る こ と が in stopping さ れ る. Now こ の 2 つ の リ ン acidification チ ロ シ ン residues meet と す る intelligence 伝 operatives を ク ロ ー ニ ン グ す べ く り ん acidification ペ プ チ ド に よ る refined と yeast two hybrid method に よ る ス ク リ ー ニ ン グ を line っ て い る. ま た JAK2 の new し い matrix と な り う る molecular APS (adaptor contatining PH and SH2 domain) を ク ロ ー ニ ン グ し て お り future エ リ ス ロ ポ エ チ ン シ グ ナ ル に お け る "を cut Ming ら か に し た い.

项目成果

Yokouchi.M., et al: "Cloning and characterization of APS,an adaptor molecule containing PH and SH2 domains that is tyrosine phosphorylated upon B-cell receptor stimulation." Oncogene. 15・1. 7-15 (1997)

Yokouchi.M. 等人：“APS 的克隆和表征，它是一种含有 PH 和 SH2 结构域的接头分子，在 B 细胞受体刺激下会被磷酸化”15·1（1997 年）。

Masuhara,M.,et al: "Cloning and Characterization of Novel CIS Family Genes." Biochem.Biophys.Res.Comm.239・2. 439-446 (1997)

Masuhara, M., 等人：“新型 CIS 家族基因的克隆和表征。”Biochem.Biophys.Res.Comm.239·2（1997）。

Matsumoto,A.,et al.: "CIS,a cytokine inducible SH2 protein is a target of the JAK-STAT5 pathway and modulates STAT5 activation." Blood. 89・9. 3148-3154 (1997)

Matsumoto, A. 等人：“CIS 是一种细胞因子诱导型 SH2 蛋白，是 JAK-STAT5 途径的靶标，可调节 STAT5 激活。” 89·9。

Endo,A.T., et al: "A new protein containing an SH2 domain that inhibits JAK kinases." Nature. 387・6636. 921-924 (1997)

Endo, A.T. 等人：“一种含有 SH2 结构域的新蛋白质，可抑制 JAK 激酶。” 387·6636 (1997)。

Iwatsuki.K., et al: "STAT5 activation correlates with erythropoietin receptor-mediated erythroid differentiation of an erythroleukemia cell line." J.Biol.Chem.272・13. 8149-8152 (1997)

Iwatsuki.K. 等人：“STAT5 激活与红白血病细胞系的促红细胞生成素受体介导的红细胞分化相关。”J.Biol.Chem.272·13 (1997)。