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細胞増殖制御の情報伝達過程におけるタンパク質リン酸化カスケ-ド機構の解明

阐明细胞增殖调控信号转导过程中的蛋白磷酸化级联机制

基本信息

批准号：
03152120
负责人：
中谷一泰
金额：
$ 1.86万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、細胞増殖制御の最も単純な情報伝達のリン酸化カスケ-ド機構を、カゼインキナ-ゼ2を中心として結び付けて分子レベルで明らかにすることを目的とする。本年度は、まずマウス繊維芽細胞腫Balb/c3T3細胞の細胞周期を同調させ、細胞周期の制御にカゼインキナ-ゼ2が関係しているかを調べた。活性の測定は細胞周期の各々の時間に於て、細胞の可溶性画分を調製し、基質は我々が開発したカゼインキナ-ゼ2に特異的な合成ペプチドを用いて行った。酵素量の変動は、カゼインキナ-ゼ2のβサブユニットに対する抗体を用いたイミュノブロットとゲル内リン酸化反応を用いて解析した。その結果、カゼインキナ-ゼ2活性はG1期からS期にかけて上昇し、S期を過ぎると活性は低下した。しかし細胞周期を通して細胞内の全カゼインキナ-ゼ2量には変化が認められなかった。またカゼインキナ-ゼ2活性に連動して、数種類の内在性タンパク質のリン酸化が変化したが、その内の一つは免疫学的手法によりヌクレオリンと同定された。またレ-ザ-蛍光顕微鏡により、カゼインキナ-ゼ2の存在部位を調べたところ、活性の上昇するS期にヌクレオリンの存在する核小体にカゼインキナ-ゼ2も局在していた。今後は、カゼインキナ-ゼ2の活性化が、ポリアミンの濃度変化によりなされるのか、cdc2によりリン酸化によりなされるのかを調べる予定である。また一方、癌細胞から正常細胞への分化誘導機構は細胞増殖制御機構と密接に関係している。そこで白血病細胞が、我々が開発した分化誘導剤であるVP16やブファリンにより分化誘導されるときのシグナルトランスダクションにタンパク質リン酸化反応が関与しているかを調べた。その結果、VP16やブファリンによる処理の初期に、MAPキナ-ゼ(Mitogenーactivated protein kinase)活性が一過性に上昇することを見いだした。今後はこのシグナルが分化誘導剤による細胞増殖制御のシグナルとなっているかどうか、およびMAPキナ-ゼによりリン酸化される下流の基質を検討する予定である。

In this study, the most important information in the system of cell colonization and control has reached the level of acidification in the organization and the center of the enterprise. the results show that the molecular mechanism has a clear effect on the purpose of the system. This year, the Balb/c3T3 cell cycle, the cell cycle and the cell cycle. For the determination of cell cycle temperature, the cell cycle time of each cell cycle is different, the cell soluble picture is divided into two parts, and the cell cycle is very different from that of the cell cycle. Enzyme activity, enzyme activity The results showed that the activity of G _ 1 phase, S phase, S phase and S phase was lower than that of S phase. The cell cycle is different from that of the whole cell. In this paper, we use the method of immunology to determine the same level of immunology. in this paper, we use the method of immunology to determine the same level of activity. The presence of nucleosomes, nucleosomes. In the future, the temperature will increase, and the temperature will increase. In the future, the temperature will not change. In the future, the temperature will be activated, the temperature will increase, and the temperature will increase. In the future, the temperature will not change. In the future, the temperature will be changed. On the other hand, the leading organ for the differentiation of normal cancer cells, the leading organ for the differentiation of cancer cells, and the organ for the reproductive system of cancer cells shall be closely connected with each other. Leukemia cells, VP16 cells, leukemia cells The results of the experiment, the initial stage of VP16 testing, and the activity of MAP screening (Mitogen screening activated protein kinase) were analyzed in this paper. In the future, we need to know how to differentiate and differentiate. In the future, we need to know how to control the colonization of cells. In the future, we need to know how to control the colonization of the cells. In the future, we need to know that there is a problem of acidification, that is, the acidification of MAP.