がんに対する細胞移植/遺伝子治療の基礎的研究

细胞移植/癌症基因治疗基础研究

• 批准号: 05151019
• 负责人: 浅野 茂隆
• 金额: $ 14.08万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05151019/
• 关键词: がん; 遺伝子治療; 遺伝子導入; レトロウイルスベクター; アデノウイルスベクター; リポソーム法; 細胞移植; 抗腫瘍免疫

1.遺伝子導入法の基礎検討:レトロウイルスベクターとアデノウイルスベクターの比較検討を行ったところ、後者は遺伝子発現持続期間が短いものの、遺伝子導入効率は優れていた。また、HVJ-リポソーム法によりアンチセンスオリゴヌクレオチドを血管平滑筋細胞へ効率良く導入する方法を確立し、in vivo遺伝子導入への応用が可能であることを示した。2.癌細胞への遺伝子導入による増殖阻害:白血病細胞にHSV-TK遺伝子を導入し、ガンシクロビル処理による殺細胞効果を確認した。また、転座型白血病ではキメラ遺伝子転写産物の融合点に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドやリボザイムの利用に関する検討を進めた。その他、RAS抑制変異体が腫瘍抑制活性を示すことを明らかにした。尚、動物モデルの準備として、SCIDマウスを用いてATL細胞のin vivo増殖系を確立した。3.癌に対する免疫遺伝子治療の基礎検討:TNF,IFN-γ,GM-CSFなどの遺伝子を導入した腫瘍細胞をマウスに移植し、抗腫瘍免疫能の誘導を図り、免疫学的解析を行った。CTLの誘導にはCD28を介したシグナルが重要であるが、新たなリガンド(B70)のcDNAクローニングに成功した。また、抗原提示細胞として重要な役割を果たす樹状突起細胞の分離培養法(GM-CSFを使用)を確立した。4.細胞移植療法:骨髄移植後の白血病再発に対して、ドナーリンパ球輸注療法を実施し、一部の症例で有効性が確認された。以上の他に、造血幹細胞や白血病細胞の増殖機構を解明するため、、受容体-シグナル伝達系の解析を進めた。また、相同組換えを利用した遺伝子ターゲティング法に関する研究を行った。

1. But beg: 伝 son import method based 検 の レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー と ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー の is 検 line for を っ た と こ ろ, the latter は but 伝 発 now hold 続 during short が い も の の, but 伝 import working rate は optimal れ て い た. ま た, HVJ リ ポ ソ ー ム method に よ り ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を vascular smooth muscle cell へ sharper rate good く import す し を る method established, the in vivo heritage 伝 son import へ の 応 may use が で あ る こ と を shown し た. 2. Cancer cells へ の posthumous son 伝 import に よ る raised colonization resistance against: leukemia cells に HSV TK - heritage 伝 を import し, ガ ン シ ク ロ ビ ル 処 Richard に よ る kill cells working fruit を confirm し た. ま た, planning type of leukemia で は キ メ ラ heritage 伝 child product planning write の blend に す seaborne る ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド や リ ボ ザ イ ム の using に masato す る beg を 検 into め た. Youdaoplaceholder0 そ he, the RAS inhibitory variant が ulcer inhibitory activity を shows す とを とを and ら に た た た. Shang, animal モデ モデ <s:1> <s:1> <s:1> と prepare と て て, SCID ウスを ウスを establish を た using <s:1> てATL cells <s:1> in vivo proliferative line を. 3. Cancer に す seaborne る immune heritage 伝 son treatment based 検 の beg: TNF, IFN - gamma, gm-csf な ど の posthumous son 伝 を import し た swollen sores cells を マ ウ ス し に transplantation, swollen sores can immune の induced を 図 り, immunological analytical を っ た. Induced CTL の に は CD28 を interface し た シ グ ナ ル が important で あ る が, new た な リ ガ ン ド (B70) の cDNA ク ロ ー ニ ン グ に successful し た. ま た your cells, antigens と し て important な "を cut fruit た す dendritic protrusions の isolated culture method (gm-csf を) を establish し た. 4. Cell transplantation therapy: の leukemia after bone marrow transplantation 発 に し seaborne て, ド ナ ー リ ン パ ball infusion therapy を be し, and an example で の is sharper availability が さ れ た. に の above him, hematopoietic stem cells や leukemia cells の raised colonization institutions を interpret す る た め, and the capacity of body - シ グ ナ ル 伝 da is の parsing を into め た. ま た, the same group in え を using し た posthumous son 伝 タ ー ゲ テ ィ ン グ method に masato す る を line っ た.

项目成果

Abe,A.: "Transduction of a drug-sensitive toxic gene into human leukemia cell lines with a novel retroviral vector." Toxin Gene for Killing leukemia Cells. 203. 354-359 (1993)

Abe,A.：“用新型逆转录病毒载体将药物敏感的毒性基因转导到人类白血病细胞系中。”

Kanegae,Y.: "A simple and efficient purification method of infectious adenovirus virions." Jap.J.Med.Sci.Biol.(in press).

Kanegae,Y.：“一种简单有效的传染性腺病毒病毒颗粒的纯化方法。”

Ogiso,Y.: "Resistance of NIH3T3 cells to v-fes transformation induced by a dominant negative H-ras mutant." Exp.Cell Res.208. 415-421 (1993)

Ogiso,Y.：“NIH3T3 细胞对显性失活 H-ras 突变体诱导的 v-fes 转化的抵抗力。”

Uemura,N.: "The Mechanism and New Approach on Drug Resistance of Cancer Cells. 13" Elsevier Science Publishers B.V., 1440-1448 (1993)

Uemura,N.：“癌细胞耐药性的机制和新方法。13”Elsevier Science Publishers B.V.，1440-1448 (1993)

Nishikawa,M.: "Changes in hematopoiesis-supporting ability of C3H10T1/2 mouse embryo fibroblasts during differentiation." Blood. 81. 1184-1192 (1993)

Nishikawa,M.：“C3H10T1/2 小鼠胚胎成纤维细胞分化过程中造血支持能力的变化。”