マウス胚性癌細胞におけるアクチビンの増殖・分化シグナル伝達機構の解析

小鼠胚胎癌细胞激活素增殖/分化信号转导机制分析

• 批准号: 05152089
• 负责人: 杉野 弘
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152089/
• 关键词: アクチビン; ホリスタチン; アクチビン受容体; キナーゼ; 胚性癌細胞

TGF-βスーパーファミリーに分類されるアクチビンのシグナル伝達系が,多分化能を有するマウス胚性癌細胞(EC細胞)の増殖や分化の機構とどのように関連しているかを明かにすることを目的として研究を展開し,次のような成果を得た。(1)ECP19細胞からクローニングしたアクチビン受容体(タイプII)をCOS細胞に発現させ,同受容体タンパク質を精製して,in vitro系においてそれが自己リン酸化能をもつSer/Thr及びTyr kinaseであることを確認した。(2)二種類のマウスアタチビン受容体タイプII及びタイプIIBのC末端アミノ酸配列を基にペプチドを合成して,受容体タンパク質を認識するポリクローナル抗体を作製した。(3)アクチビン結合タンパク質(ホリスタチン)がアクチビンと結合したまま細胞表層のヘパラン硫酸糖鎖に結合することや,このヘパラン硫酸との結合能がホリスタチンのC末端領域の構造の違いによって変化することを見いだした。以上の結果はアクチビン受容体が少なくともin vitro系ではdual kinase活性をもつ新しいタイプの受容体であることを強く支持しており,アクチビンのシグナルがこれまでに知られていない未知の経路を経て細胞内へ伝達されていることを示唆している。今後,今回得られた抗受容体抗体を用いて,受容体kinaseの細胞内基質の同定を進め細胞表層から細胞質に至るシグナルの実体を明かにしたい。また,課題であったアクチビン受容体の各種変異体を作製し,kinaseドメインの役割,分担を明らかにしたい。更に,こうしたアクチビンのシグナル伝達機構が,細胞表層に結合しているホリスタチンによってどのように制御されているかについても検討を加える予定である。

TGF- β-phenotype has been classified into several categories. The system has been successfully developed, and multiple differentiation can be achieved in embryonal cancer cells (EC cells). The differentiation mechanism of embryonal carcinoma (CEC) has been successfully developed, and the results have been achieved in the second round. The main results are as follows: (1) ECP19

项目成果

T.Atsumi et al: "The activin-dependent proliferation of PCC3/A/1 embryonal carcinoma cells in serum-free medium." Develop.Growth Differ.35. 81-87 (1993)

T.Atsumi 等人：“PCC3/A/1 胚胎癌细胞在无血清培养基中的激活素依赖性增殖。”

A.Suzuki et al.: "Autoinduction of activin genes in early Xenopus embryos." Biochem.J.(in press). (1993)

A.Suzuki 等人：“早期非洲爪蟾胚胎中激活素基因的自诱导。”

K.Ogawa et al.: "Expression of α,βA and βB subunits of inhibin or activin and follistatin in rat pancreatic islets." FEBS Lett.319. 217-220 (1993)

K. Okawa 等人：“抑制素或激活素和卵泡抑素的 α、βA 和 βB 亚基在大鼠胰岛中的表达。FEBS Lett.317-220 (1993)”

A.Fukui et al.: "Isolation and characterization of Xenopus follistatin and activins." Devlop.Biol.159. 131-139 (1993)

A.Fukui 等人：“非洲爪蟾卵泡抑素和激活素的分离和表征。”

K.Sugino et al: "Molecular heterogeneity of follistatin,an activin-binding protein:Higher affinity of the carboxyl-terminal truncated forms for heparan sulfate proteoglycans on ovarian granulosa cell." J.Biol.Chem.268. 15579-15587 (1993)

K.Sugino 等人：“卵泡抑素（一种激活素结合蛋白）的分子异质性：羧基末端截短形式对卵巢颗粒细胞上的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖具有更高的亲和力。”