海馬特異カルシウム結合蛋白質:ヒポカルシンの神経細胞内情報伝達における機能の解析

海马特异性钙结合蛋白：下钙素在神经元内信号传递中的功能分析

• 批准号: 06780662
• 负责人: 小林 正明
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780662/
• 关键词: ヒポカルシン; カルシウム結合蛋白質; 海馬; 神経細胞; ロドプシン; リン酸化; ヒポカルシン結合蛋白質

ヒポカルシンは、申請者らが見い出した大脳の海馬に特徴的に存在する神経特異的カルシウム結合蛋白質で、カルシウム濃度の生理的変動を感知して神経細胞内の情報伝達系の効率を調節していると考えられている。そこで、ヒポカルシンがカルシウム依存性に制御する細胞内情報伝達系を同定することを目的とした。1)ロドプシンのリン酸化に対するヒポカルシンの作用網膜視細胞に存在するヒポカルシン類似蛋白質:S-モジュリンは、高カルシウム濃度でロドプシンのリン酸化を抑制することで、光刺激に対する感受性を調節している。そこで、網膜視細胞外節画分を用いたin vitroの再構成系で検討したところ、光刺激した際のロドプシンのリン酸化を、ヒポカルシンはS-モジュリンと同程度に抑制することが明らかとなった。以上の結果から、ヒポカルシンが神経細胞に存在する、ロドプシンと構造の類似する受容体のリン酸化を調節している可能性が示唆された。2)ヒポカルシン結合蛋白質の検索ラット脳について、ヒポカルシンとカルシウム存在下に特異的に結合する蛋白質をフィルター・オーバーレイ法で検索したところ、数種類の蛋白質バンドが見い出された。このうち、ヒポカルシンと最も高い親和性を示す分子量約48kDaの可溶性蛋白質を精製し、部分アミノ酸配列を決定したところ、ラットのクレアチン・キナーゼBサブユニットの配列と一致した。既にヒポカルシン遺伝子導入細胞を得ており、今後、ロドプシンと構造の類似する神経細胞の受容体のリン酸化および受容体機能に対するヒポカルシンの作用を検討する。

ヒ ポ カ ル シ ン は, applicants ら が see い out し た big 脳 の hippocampal に に existence of 徴 す る god 経 specific カ ル シ ウ ム binding protein で, カ ル シ ウ ム concentration の physiological - move を perception し て の intelligence 伝 経 cell of god is の を sharper rates し て い る と exam え ら れ て い る. そ こ で, ヒ ポ カ ル シ ン が カ ル シ ウ ム dependency に suppression す る intelligence を 伝 of department in the cell with fixed す る こ と を purpose と し た. 1) ロ ド プ シ ン の リ ン acidification に す seaborne る ヒ ポ カ ル シ ン の に retinal visual cells exists す る ヒ ポ カ ル シ ン similar protein: S - モ ジ ュ リ ン は, high カ ル シ ウ ム concentration で ロ ド プ シ ン の リ ン acidification を inhibit す る こ と で, light stimulation に す seaborne る susceptibility を adjust し て い る. そ こ で painting, retinal extracellular quarter を with い た in vitro の reconstitution of で beg し 検 た と こ ろ, light stimulation し た interstate の ロ ド プ シ ン の リ ン acidification を, ヒ ポ カ ル シ ン は S - モ ジ ュ リ ン と に inhibit the same extent す る こ と が Ming ら か と な っ た. の above results か ら, ヒ ポ カ ル シ ン が god に 経 cells exist す る, ロ ド プ シ ン の と structure similar す る by let body の リ ン acidification を adjust し て い が る possibility in stopping さ れ た. 2) ヒ ポ カ ル シ ン binding protein の 検 cable ラ ッ ト 脳 に つ い て, ヒ ポ カ ル シ ン と カ ル シ ウ ム に in the presence of specific に combining す る protein を フ ィ ル タ ー · オ ー バ ー レ イ method で 検 cable し た と こ ろ, several kinds の protein バ ン ド が see い out さ れ た. こ の う ち, ヒ ポ カ ル シ ン と most も い high affinity を す molecular weight in 48 kda の soluble protein を refined し, partial ア ミ ノ acid with column を decided し た と こ ろ, ラ ッ ト の ク レ ア チ ン · キ ナ ー ゼ B サ ブ ユ ニ ッ ト の match column と consistent し た. Both に ヒ ポ カ ル シ ン heritage 伝 sons を import cells may て お り, in the future, ロ ド プ シ ン の と structure similar す る の 経 cells by god, let body の リ ン acidification お よ び by let body enginery に す seaborne る ヒ ポ カ ル シ ン の role を beg す 検 る.

项目成果

Saitoh S.,Takamatsu K.,Kobayashi M.et al: "Expression of hippocalcin in the developing rat brain." Developmental Brain research. 80. 199-208 (1994)

Saitoh S.、Takamatsu K.、Kobayashi M.等人：“海马钙素在发育中的大鼠大脑中的表达。”

Saitoh S.,Takamatsu K.,Kobayashi M.et al: "Immunohistochemical localization of neural visinin-like Ca^<2+>-binding protein 2 in adult rat brain." Neuroscience Letters. 171. 155-158 (1994)

Saitoh S.、Takamatsu K.、Kobayashi M.et al：“成年大鼠脑中神经维西宁样 Ca^2-结合蛋白 2 的免疫组织化学定位。”

Takamatsu K.,Kobayashi M.et al: "Molecular cloning of human hippocalcin cDNA and chromosomal mapping of its gene." Biochem.Biophys.Res.Commun.200. 606-611 (1994)

Takamatsu K.，Kobayashi M.et al：“人海马钙素 cDNA 的分子克隆及其基因的染色体定位。”

Kobayashi M.et al: "Molecular cloning of a novel calcium-binding protein structurally related to hippocalcin from human brain and chromosomal mapping of its gene." Biochimica et Biophysica Acta. 1222. 515-518 (1994)

Kobayashi M.等人：“从人脑中分子克隆了一种与海马钙素结构相关的新型钙结合蛋白，并对其基因进行了染色体定位。”