活性酸素DNA損傷修復酵素欠損の分子病態

活性氧DNA损伤修复酶缺乏的分子病理学

• 批准号: 12213013
• 负责人: 山本 和生
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213013/
• 关键词: mutT; クローニング; ミューテーター; 脱ユビキチン; mutT-box; 自然突然変異; 塩基置換突然変異; A:T→C:G transversion

酵母mutT funactional homologをクローニングするために、mutT欠損大腸菌のミューテーター活性を相補する酵母遺伝子をgenomic libraryから検索した。その結果1つのクローンが得られ、塩基配列を求めたところ、脱ユビキチンに関わる遺伝子であることが明らかとなった。この遺伝子のアミノ酸配列中には非常に弱いながらmutT-box様の配列が認められた。MutT欠損大腸菌は、mutT^+株に比べて約100倍高い自然突然変異となるが、酵母の遺伝子を持つmutT欠損株では約10倍となり、1/10に低下した。この遺伝子を破壊した酵母株は野生株に比べて2.5〜6倍高い変異率となった。突然変異体の塩基配列変化を求めたところ、A:T→C:G transversionのみが有意に増加していた(P<0.05)。A:T→C:G transversion変異は大腸菌mutT欠損に特徴的な塩基置換突然変異である。以上の結果は、この遺伝子が、mutT-functional homologであることを強く示唆している。一方、遺伝子破壊株で観察される突然変異の増加は、大腸菌mutT欠損株で観察されるほどには高くはならなかった。このことは、今回クローニングした遺伝子以外にもmutTを相補する遺伝子があるのかもしれない。大腸菌のmutT欠損を相補するものとしてクローニングしてきた経緯から、脱ユビキチンの作用は今回の観察には関わらないと考えられる。

Yeast mutT funactional homolog を ク ロ ー ニ ン グ す る た め に, mutT owe damage coliform の ミ ュ ー テ ー タ ー を active phase fill す る yeast heritage 伝 son を genomic library か ら 検 cable し た. そ の results 1 つ の ク ロ ー ン が have ら れ, salt base with column を o め た と こ ろ, ユ ビ キ チ ン に masato わ る heritage 伝 son で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. The <s:1> cultural heritage 伝 sub-<s:1> ア ノ ノ ノ acid combination に に is very に weak ながら ながらmut t-box type <s:1> combination が is recognized められた. MutT owe damage of coliform は, MutT ^ + strains に than べ て natural suddenly - about 100 times the high い different と な る が, yeast の heritage 伝 son を hold つ MutT owe damage strain で は about 10 times と な り, 1/10 に し た. The <s:1> cultural heritage 伝 seed を breaks 壊 た た yeast strain <e:1> wild strain に is 2.5 to 6 times higher than べて <s:1> mutation rate となった. Suddenly - variant の salt base with column patches.by - を め た と こ ろ, A: T - > C: G transversion の み が intentionally に raised plus し て い た (P < 0.05). A:T→C:G transversion change に coliform bacteria mutT underloss に characteristic な base exchange sudden change である. の above results は, こ の heritage 伝 が, mutT - functional homolog で あ る こ と を く and shown strong sucking し て い る. One party, but 伝 broken 壊 strains で 観 examine さ れ る - different の suddenly raised は, coliform mutT owe damage strain で 観 examine さ れ る ほ ど に は high く は な ら な か っ た. こ の こ と は, today back to ク ロ ー ニ ン グ し た heritage 伝 child outside に も mutT を phase fill す る posthumous son 伝 が あ る の か も し れ な い. Coliform の mutT fill owe loss を phase す る も の と し て ク ロ ー ニ ン グ し て き た 経 weft か ら, ユ ビ キ チ ン の role は today back の 観 examine に は masato わ ら な い と exam え ら れ る.

项目成果

Shingo Nakamura: "Radiation-induced mutation in spleen and brain of lacZ transgenic mouse"Int J Radiat Biol.. 76. 431-440 (2000)

Shingo Nakamura：“lacZ 转基因小鼠脾脏和大脑中的辐射诱导突变”Int J Radiat Biol.. 76. 431-440 (2000)

Tanbir Najrana: "Spontaneous and osmium tetroxide induced mutagenesis in Escherichia coli strain deficient both endonuclease III and endonuclease VIII"Mutagenesis. 15. 121-125 (2000)

Tanbir Najrana：“缺乏核酸内切酶 III 和核酸内切酶 VIII 的大肠杆菌菌株中自发和四氧化锇诱导的诱变”诱变。

Eiji Yamamura: "Characterization of spontaneous mutation in the oxyR strain of Escherichia coli"Biochem Biophys Res Commun. 279. 427-432 (2000)

Eiji Yamamura：“大肠杆菌 oxyR 菌株自发突变的表征”Biochem Biophys Res Commun。

Takashi Watanabe: "Miscoding and misincorporation of 8-oxo-guanine during leading and lagging strand synthesis in Escherichia coli."Molecular and General Genetics. (in press). (2001)

Takashi Watanabe：“大肠杆菌前导链和滞后链合成过程中 8-氧代鸟嘌呤的错误编码和错误掺入。”分子与普通遗传学。

Tetsuya Ono: "Age-associated increase of spontaneous mutation frequency and molecular nature of mutation in newborn and old lacZ-transgenic mouse."Mutation Research. 447. 165-177 (2000)

Tetsuya Ono：“新生和老年 lacZ 转基因小鼠中自发突变频率和突变分子性质与年龄相关的增加。”突变研究。